人脑胶质瘤中PTEN、MMP9蛋白的表达及意义

吴红芳

南阳医学高等专科学校病理教研室（473000）

胶质瘤是中枢神经系统内最常见的肿瘤,占颅内肿瘤的40%～50 %[1]。胶质瘤的病因尚不十分清楚，有报道称胶质瘤的发生发展与多种基因异常有关。本文通过免疫组织化学方法检测PTEN和MMP9蛋白在正常脑组织和胶质瘤中的表达情况，探讨PTEN和MMP9基因异常与脑胶质瘤的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集南阳医专第一附属医院病理科2003年7月～2010年5月手术切除胶质瘤石蜡标本53例,其中男34例、女19例,患者年龄8～65岁,平均年龄（42.3±16.4）岁。根据2000年 WHO神经系统肿瘤的分类标准对胶质瘤进行组织学的分类和分级： Ⅰ级 9例，Ⅱ级19例，Ⅲ 级 18例，Ⅳ级 7例。将Ⅰ～Ⅱ级归为低度恶性，Ⅲ～Ⅳ级归为高度恶性，另取 12例脑外伤内减压术中切除的脑组织标本作为正常对照。

1.2 免疫组化染色

鼠抗人PTEN单克隆抗体及鼠抗人MMP9单克隆抗体均为Santa Cruz公司产品。S-P试剂盒及DAB显色剂由北京中杉金桥公司提供,染色过程按试剂盒操作。阴性对照用PBS代替Ⅰ抗。

1.3 结果判定

PTEN和 MMP9蛋白染色阳性反应信号呈棕黄色细小颗粒,定位于胞质。每例随机选 10个高倍视野，计数 1000个细胞,计算阳性细胞数的百分比。阳性细胞 ≥10%者为阳性病例；阳性细胞 ＜10%者均按阴性病例处理。

1.4 统计学处理

采用统计软件对数据进行χ2检验及相关性分析。

2 结 果

2.1 PTEN蛋白在胶质瘤中的表达

正常脑组织中均有PTEN蛋白表达，脑胶质瘤中的表达率为63.3%，表达有显著性差异（P＜0.01）；低度恶性组的阳性表达率为85.7%，高度恶性组的阳性表达率为36.0%,两组间的表达有显著性差异（P＜0.01）。

2.2 MMP9蛋白在胶质瘤中的表达

正常脑组织中均无MMP9蛋白表达，脑胶质瘤中的表达率为49.1%，表达有显著性差异（P＜0.01）；高分化组的阳性表达率为46.4%，低分化组的阳性表达率为52.0%,两组间的表达无显著性差异（P＞0.05）。

2.3 PTEN、MMP9蛋白在胶质瘤中表达的相关性

胶质瘤中PTEN和MMP9蛋白均不表达的1例，均表达的7例，PTEN蛋白表达而MMP9蛋白不表达的26例，PTEN蛋白不表达而MMP9蛋白表达的19例；胶质瘤中PTEN和MMP9蛋白的表达呈负相关（ r= - 0.483,P＜0.01）。

3 讨 论

PTEN基因被认为是继p53基因之后发现的又一重要抑癌基因[2]。PTEN基因的失活突变可能与肿瘤的发生发展，恶性程度及侵袭性密切相关。本研究中胶质细胞瘤PTEN蛋白阳性表达率显著降低，低度恶性组阳性率显著高于高度恶性组有显著性差异。结果提示人脑胶质细胞瘤中存在PTEN蛋白表达缺失，恶性程度越高缺失越明显，PTEN蛋白的表达情况可做为脑胶质瘤恶性程度的判定指标之一。基质金属蛋白酶MMPs是一种与肿瘤的恶性行为和浸润性生长密切相关的物质。MMP9是基质金属蛋白酶家族成员之一，可降解细胞外多种基质成分,在肿瘤浸润、 转移过程中发挥极其重要的作用[3-4]。发现MMP9蛋白在正常脑组织和脑胶质瘤中的表达有显著性差异；低度恶性组组与高度恶性组中的阳性表达无显著性差异。提示人脑胶质瘤中存在MMPs的过度激活，可能与脑胶质瘤的易复发及浸润性生长有关，与胶质瘤的恶性程度无关。

此外，抑制肿瘤细胞的浸润、转移是 PTEN基因的重要生物学功能之一 。本研究显示，胶质瘤中PTEN和MMP9蛋白的表达呈负相关，说明PTEN基因表达的减少或缺失，可能会诱导MMP9的过度激活，从而导致脑胶质瘤的复发和转移。因此，通过免疫组化方法检测人脑胶质瘤中PTEN蛋白的表达情况，可作为判断胶质瘤的恶性程度及是否易转移、复发的重要参考指标之一。

[1]吴在德,吴肇汉.外科学[M].北京：人民卫生出版社,2004：281-283.

[2]刁红宇,吴永刚.PTEN蛋白在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及意义[J].中国医科大学学报,2006,35(5)：532-533.

[3]孙荣辉,徐国政.VEGF、MMP9在人脑胶质瘤中的表达及其意义[J].中国临床神经外科杂志,2010,15(5)：273-277.

[4]李宝月,刘政操,姚琦等.神经胶质瘤细胞对血管新生作用及其血管生成素-2表达的影响[J].中国医药导报,2008,5(13)：14-16.