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小鼠gdnf基因在真核细胞NIH-3T3中的表达

2009-04-29王庆忠潘智芳石玉强

生命科学研究 2009年1期
关键词:超量细胞株分类号

王庆忠 潘智芳 石玉强

摘要:为了得到超量表达胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neuotrophic factor,GDNF)的NIH-3T3细胞株,用于制作精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)培养的饲养层,通过RT-PCR方法成功地从幼年小鼠睾丸中克隆了gdnf基因,构建了真核表达载体pcDNA3.1-gdnf,并用其转染NIH-3T3细胞,对筛选出的阳性细胞克隆进行的免疫荧光染色、RT-PCR和Western blottig的结果表明,获得了超量表达gdnf基因的NIH-313细胞株,这为精原干细胞的培养奠定了基础。

关键词:GDNF;RT-PCR;NIH-3T3;基因表达

中图分类号:R742.5文献标识码:A文章编号:1007-7847(2009)01-0055-05

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