利用毕赤酵母系统表达重组人生长激素的研究

朱振洪　葛立军　刘文洪　赵伟春　万海同

摘要：为了获得重组人生长激素在毕赤酵母中高表达的菌株，按毕赤酵母基因密码子偏爱性，人工合成hGH的全基因序列，该基因被克隆到穿梭质粒pPIC9K中，PEG1000介导转入毕赤酵母GS115细胞，通过G418筛选获得高拷贝转化子。在甲醇的诱导下，实现了hGH在毕赤酵母中的成功表达。通过发酵条件的优化，发酵上清中的表达量达1537mg/L经过超滤和两步层析。重组蛋白的得率达35％，纯度为97％。相对分子质量测定表明重组蛋白的相对分子质量与理论值相近，N-端氨基酸测序证实hGH基因在毕赤酵母中获得正确的表达。

关键词：重组人生长激素；毕赤酵母；表达；纯化

中图分类号：Q78文献标识码：A文章编号：1007－7847(2009)01－0020－05