芹菜对小鼠生育力及胎鼠生长发育的影响

孙　冉　刘　鹏　成倩倩　李福轮　李　慧　李洪波　李芝兰

【摘要】 目的 探讨芹菜对雄性小鼠生殖能力及胎鼠生长发育的影响。方法 160只成年健康SPF级昆明种雄性小鼠按体质量随机分为7 d和56 d两个时间组，各时间组随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每天定时给各剂量组小鼠以不同浓度的芹菜汁0．3 ml灌胃，对照组0．3 ml生理盐水灌胃，灌胃结束后与同种同龄的健康雌性小鼠按雄雌1C∶C1合笼；次日起每日阴道涂片，以查到阴栓为孕0 d（合笼7 d未见阴栓者，以合笼第4天为孕0 d），并分笼饲养，分别在孕18 d剖腹取胎，记录各组孕鼠受孕及子宫仔鼠着床情况，同时测定胎鼠身长及体质量。结果 各剂量组与对照组比较雌鼠受孕率、着床数、胎鼠身长、体质量差异均无统计学意义。结论 芹菜对胎鼠生长发育无明显影响，对雄鼠生育力的影响不能排除。

【关键词】小鼠；胎鼠；受孕率；着床

お

Effect of celery on fertility of mice and growth and development of fetus

SUN Ran，LIU Peng，CHENG Qian-qian，et al.School of Public Health，Lanzhou University,Lanzhou City,Gansu 730000，China

【Abstract】 Objective To explore the effect of celery on the reproductive capacity of male mice and the growth and development of fetus.Methods 160 healthy adult male SPF mice of Kunming strain were divided randomly into 7 days and 56 days time groups.Each group was divided into 4 groups including control group，low-dose group，middle-dose group and high-dose group according to the body weight.Mice of each group were administered by gavage at a certain time every day，control group with 0．3 mililiters of normal saline and experimental groups with 0．3 mililiters of celery juice of different concentration.After intragastric administration，male mice were mated 1:1 with untreated females for 7 days (time for completion of one estrous cycle in mice).The daily vaginal smears were checked.The day that vaginal plug was found was considered day 0 of gestation.and then the male and female mice were separated into different cages.The fetal mice were obtained by caesarean on day 18 of gestation.The pregnant rate，embryonic nidation of each group and the length and weight of fetus were recorded.Results There were not statistical significances in pregnant rate of female mice，number of embryonic nidation，or length and weight of fetus among any group(P>0．05).Conclusion Celery had no significant effect on growth and development of fetal mice，but the effect on reproductive capacity of male mice can not be excluded.

【Key words】Mice;Pregnant rate;Fetus;Nidation

基金项目：兰州大学高年级本科生创新能力支持项目（项目编号：LZUXJ2007-58-83）《芹菜对小鼠生殖机能影响的研究》、甘肃省人口和计划生育委员会人口基金项目（项目编号：GS-RK-2006-03）《芹菜避孕作用研究》

作者单位：730000 兰州大学公共卫生学院

据报道常吃芹菜能减少男性精虫的数量至难以受孕的程度，这种情况在停食16 周后又会恢复正常^[1]；芹菜可引起小鼠的精子运动参数改变，尤以精子密度的变化较为明显^[2]。本次实验通过对雄性小鼠给予不同时间、不同剂量的芹菜汁灌胃后，与正常雌性小鼠交配，观察雌鼠受孕率及胎（仔）鼠生长发育的各项指标，旨在探讨芹菜汁对雄性小鼠生殖能力的影响，从而为进一步明确芹菜是否具有抗生育作用提供一定的线索。

1 材料和方法

1．1 主要设备仪器 JA3003N 电子秤(上海精密科学仪器有限公司)；DK-600S型三用恒温水浴箱(上海精宏实验设备有限公司)；欧牌多功能榨汁机（佛山市顺德区金一百实业有限公司）。

1．2 芹菜汁的制备 称取市售的芹菜，摘取黄叶，洗净、晾干、切碎、称重（7025 g）后，采用榨汁机分次粉碎榨汁，用四层消毒纱布过滤菜汁，除去杂质，共得芹菜汁4603 ml；然后将原液665 ml封存、冷冻备用，即为低剂量组（浓度约为1．53 g/ml）；将其余芹菜汁以20 ml为单位分别放入直径9 cm的平皿中，然后将平皿置于50℃水浴箱中分别蒸发到原体积的1/2和1/4，待冷却后封存、冷冻备用，即得中剂量组（浓度约为3．06 g/ml）和高剂量组（浓度约为6．12 g/ml）。

1．3 实验动物及分组 成年健康SPF级昆明种雄鼠160只，雌鼠160只(由甘肃省中医学院SPF实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(甘)2004-0006-0000183),体质量28~34 g。将实验动物按体质量随机分为7 d和56 d两个时间组，各时间组随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。

1．4 实验方法 动物饲养在甘肃省中医学院中心实验室的SPF级实验室内（实验室合格证号为：SCXK(甘)2004-0006-0000081）。每天定时给阴性对照组0．3 ml生理盐水灌胃，各剂量组以0．3 ml不同浓度的芹菜汁灌胃。灌胃结束后与同种同龄的雌性小鼠（不做任何处理）按雄雌15C∶C1合笼。次日起每日阴道涂片，以查到阴栓为孕0 d（合笼7 d未见阴栓者，以合笼第4天为孕0 d），并分笼饲养，分别在孕18 d颈椎脱臼处死孕鼠，剖开腹腔，暴露子宫角，剪开子宫，将胎鼠按顺序编号记录，即从孕鼠左侧子宫角上方开始，到子宫颈再向右侧子宫角依次计数，记录总胎数，测量活胚胎的体长并进行称重。

1．5 生育力指标的测定 观察孕鼠胚胎着床情况，记录总胎数；测量胎鼠身长、体质量,计算窝平均身长、体质量和受孕率（雌鼠受孕率=受孕雌鼠数/总雌鼠数×100%）。

1．6 统计学方法 全部实验数据均录入SPSS 13．0软件，结果以构成比及x±s表示，并应用χ²检验、方差分析进行统计学检验。

2 结果

2．1 雌鼠受孕率 灌胃7 d和56 d雄鼠与未处理雌鼠交配后，各实验组雌鼠受孕率均不同程度低于对照组。经χ²检验，7 d和56 d各组间受孕率差异均无统计学意义（χ²=2．257，P=0．521；χ²=2．967，P=0．397），见表1。

2．2 雌鼠子宫仔鼠着床数 灌胃7 d和56 d雄鼠与未处理雌鼠交配后，孕鼠子宫仔鼠着床数经方差分析，各组间差异均无统计学意义（F=0．298，P=0．827；F=0．249，P=0．861），见表2。

2．3 胎鼠体长、体质量 灌胃7 d和56 d雄鼠与未处理雌鼠交配后，各组孕鼠所得胎鼠总数经方差分析，各组间差异无统计学意义（F=0．929，P=0．433；F=0．249，P=0．861）；7 d和56 d各组胎鼠体质量的差异无统计学意义（F=2．289，P=0．078；F=1．117，P=0．342）；7 d和56 d各组胎鼠身长差异无统计学意义（F=2．283，P=0．079；F=0．208，P=0．891），见表3。

3 讨论

性功能障碍是男性的一种常见病，据美国估计在 6 对夫妇中就有1对不孕，其中40%属于男性问题。滥用药物、吸毒和接触化学毒物可能是导致男性不育的主要原因^[3]。近年来大量研究对性功能的障碍有了更新一步的认识和发展^[4-5]。本实验模拟人接触的实际情况，对雄性小鼠给予不同剂量、不同时间的芹菜汁灌胃，与同龄雌鼠交配，孕18 d处死雌鼠，观察了芹菜对小鼠生殖能力和胚胎发育的影响。结果表明灌胃7 d和56 d雄鼠与未处理雌鼠交配后，各实验组雌鼠受孕率均不同程度低于对照组，尽管其差异无统计学意义，但是本团队以往的研究证实芹菜可以降低小鼠的精子密度^[2]，笔者认为芹菜对雄性小鼠生育力的影响尚不能排除，有必要进一步研究探讨。

化学毒物通过亲代对配子、胚胎、胎儿的有些损伤会在下一代表现为某些系统功能异常或疾病，这类情况通称为传代效应，传代效应也属于发育毒性之一。化学毒物对生殖与发育损害的机制复杂，多数还不清楚。目前有①基因突变与染色体畸变；②干扰核酸功能和有丝分裂；③酶受抑制；④细胞凋亡；⑤干扰营养；⑥性激素代谢受干扰；⑦产生活性氧^[6]，等多种致畸^[7]学说。本次实验结果显示，7 d和56 d各实验组孕鼠子宫仔鼠着床数与对照组基本相同，各实验组胎鼠体长、体质量与对照组比较差异均无统计学意义，提示，以浓度2．03、4．06、8．12 g/ml芹菜汁灌胃7 d和56 d雄鼠与未处理雌鼠交配，对胎鼠的生长发育无明显影响，即不存在发育毒性。

参 考 文 献

［1］ 高金燕,陈红兵.芹菜中活性成分的研究进展.中国食物与营养,2005（7）:28-31.

［2］ 蒲育栋,李芝兰,等.芹菜对小鼠精子质量影响的实验研究.卫生职业教育,2007,25（13）:122-124.

［3］ 郝思柱,高永,罗文海,等.环氧乙烷对大鼠精子影响的研究.中国公共卫生学报,1996,15（4）:236.

［4］ 王至中,高鹏翔,常世华,等.白山雄栓治疗阳痿的临床和实验研究.中国医药学报,1991,6(41):121.

［5］ 胡岩,郭教礼.中医药治疗阳痿近况概述.中国医药学报,1992,7(1):54.

［6］ 张桥.卫生毒理学基础.人民卫生出版社,2000:11-277.

［7］ 张慧.稀土元素铈对雄性小鼠生殖毒性的研究.吉林大学,2007.