鹅痛风发病原因及防治措施研究
2024-12-31翟桂发崔莉影段陈风谢锐陈郑辉阮崇美
摘要 鹅痛风是近年来危害鹅产业较为严重的疾病之一,一年四季均可能发生,冬季多发,给该产业的健康发展造成一定的影响。本文从鹅星状病毒感染、饲养及营养管理和肠道菌群紊乱等角度综述了鹅痛风相关的发病原因,探讨了鹅痛风的临床诊断及分子生物学诊断方法,并从药物防治、生物安全防治和综合防治3个方面分析了鹅痛风的防治措施等。目的在于为养殖户防治鹅痛风、促进鹅产业健康绿色发展提供参考。
关键词 鹅痛风;鹅产业;雏鹅;星状病毒;病因;诊断方法
中图分类号 S829.9;S858.3" " 文献标识码 A" "文章编号 1007-7731(2024)14-0044-05
DOI号 10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2024.14.010
Research progress on the cause and control of goose gout
ZHAI Guifa1" " CUI Liying1" " DUAN Chenfeng1" " XIE Rui1" " CHEN Zhenghui1" " RUAN Chongmei1, 2
(1College of Animal Science, Anhui Science and Technology University, Fengyang 233100, China;
2Anhui Province Key Laboratory of Animal Nutrition Regulation and Health, Fengyang 233100, China)
Abstract Goose gout is one of the serious diseases that have harmed the goose industry in recent years. It may occur throughout the year, but more common in winter, which has a certain impact on the healthy development of the goose industry. The causes of gout in geese were reviewed from the astrovirus of infection, feeding and nutritional management, and dysbiosis of gut microbiota. The clinical diagnosis and molecular biology diagnostic methods of gout in geese were explored, and the prevention, and treatment measures of gout in geese were analyzed from three aspects:drug control, biosafety control, and comprehensive control. The purpose was to provide references for preventing and treating gout in geese for farmers and promoting healthy and green development of the goose industry.
Keywords goose gout; goose industry; gosling; astrovirus; pathogeny; diagnostic method
鹅痛风是危害鹅产业较为严重的疾病之一,多发生于2周龄以内的雏鹅群体中,系各种原因导致的以内脏、关节广泛尿酸盐沉积为特征的一类代谢性疾病。Smyth等[1]研究指出,内脏型痛风多见于雏鹅,呈群体急性发作特征;关节型痛风主要见于仔鹅,呈慢性发作特征。Palya等[2]研究认为,该病发病率和致死率均较高,10~15日龄为死亡高峰。鹅痛风一年四季均可发生,冬季多发,鹅痛风发病原因较多,临床表现形式多样,现阶段,针对鹅痛风的诊断方式主要是以病理剖检结合临床症状分析,辅以实验室检查进行确诊。Lacroux等[3]研究发现,疑似鹅痛风临床病例肾脏出血严重,个别雏鹅十二指肠及回肠有“肠栓”现象,实验室分离发现存在鹅星状病毒感染。
本文就鹅痛风的病因、诊断方法和防控措施进行综述,为养殖户提供防治鹅痛风的具体策略、促进鹅产业健康发展提供参考。
1 鹅痛风发病原因分析
1.1 星状病毒感染
依据病毒感染宿主的不同,将星状病毒科分为禽星状病毒属和哺乳动物星状病毒属。鹅星状病毒(Goose astrovirus,GoAstV)作为禽星状病毒属的一种,其结构为无囊膜呈二十面体结构的单股正链RNA病毒,Fu等[4]研究认为,该病毒基因组包含5'非编码区(5'Untranslated region,5'-UTR),3个开放阅读框(Open reading frames,ORF),即ORF1a、ORF1b和ORF2,3'非编码区(3'-UTR)及poly(a)尾。ORF2的翻译产物是由病毒sgRNA合成的大小为87~90 kDa衣壳蛋白,同时ORF2具有多样性。除了作为划分种的依据,其编码的病毒粒子衣壳前体蛋白也是病毒的主要抗原区域。突变时常发生在ORF1a区,ORF1a不仅编码非结构蛋白,而且在病毒复制、免疫调节中起重要作用。Pantin-Jackwood等[5]研究认为,ORF1b也编码非结构蛋白,仅存在较少的氨基酸突变,是高度保守的区域。
Zhang等[6]在湖南某鹅场患肠炎的鹅群中发现GoAstV,并命名为FLX株;Liu等[7]在患肠炎的鹅群中分离出GoAstV HN1G株,基因测序发现HN1G株与FLX株氨基酸同源性仅在62%,HN1G株与2017年之后在疑似痛风的鹅病例中发现的GoAstV毒株如SD01株[8]、SDPY株[9]、GD株[10]和CXZ18株[11]等,同源性高达95%。张玉杰等[12]通过采集多个省份的鹅临床发病资料发现,鹅星状病毒属于两个不同的基因群,即新型鹅星状病毒和鹅星状病毒FLX株的变异株病毒,提示临床上大多数的鹅痛风病是两种鹅星状病毒协同作用的结果。
GoAstV可通过水平传播和垂直传播途径感染,Bidin等[13]在鹅胚中检测出星状病毒,揭示种蛋的集中孵化会造成该病毒水平传播,这可能是造成雏鹅早期发病的关键因素之一。Wei等[14]在无症状的繁殖鹅群中发现了高流行的新型GoAstV,提示临床上带毒的雏鹅呈亚健康状态,在特定条件下,如应激、抵抗力下降等诱因作用下,发病表现出典型的临床特征。以上众多研究结果表明,GoAstV是引起鹅痛风的主要病原之一,而目前暂无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)检测鹅胚接种实验数据的支持,因此鹅胚可能含有其他未知病毒,实践中是否存在其他潜在的病原共同感染尚未可知。邵春荣等[15]使用GoAstV感染雏鹅复制出的模型多为肝脏损伤、肾脏和输尿管肿胀,无法全面复制典型的痛风症,且发病程度及死亡率远不及田间自然病例严重。随着培养条件的优化,姜晓宁等[16]成功分离培养出GoAstV病毒,并将其接种至鸡肝癌细胞和鹅胚肾细胞等进行传代培养,但GoAstV接种鸡肝癌细胞无细胞病变。因此,目前缺乏合适的体外培养GoAstV细胞系,GoAstV对肾脏损伤的致病机理暂不完全清晰。
1.2 饲养及营养管理
不良的饲养管理条件对鹅痛风的发生起到一定的助推作用,禽舍空间密闭、阴暗潮湿、空气污浊或饲养密度大,均会导致雏鹅痛风发病率的上升。作为一种植食性家禽,鹅日粮中需要添加适量的含粗纤维饲料,蛋白质含量不高于15%。赵孟丽等[17]研究认为,生产中部分养殖场使用的鹅饲料中蛋白质水平可能偏高。选用自配料时,若添加大量嘌呤与蛋白质,如鱼粉、肉骨粉等,会加重鹅肾脏代谢的负担,加剧痛风的风险。潘雪男等[18]研究认为,鹅饲料中若富含钙、镁,缺乏维生素A,可能会致使鹅泌尿系统管道上皮细胞角质化,阻碍尿酸的分泌和排泄;若使用霉变玉米、麸皮以及变质鱼粉等,可能会导致鹅肾脏损伤,使钙与尿酸结合形成的难溶性尿酸盐沉积在关节处或内脏组织中。贝壳粉是畜禽饲料常用的钙源之一,实践中若作为鹅的饲料添加剂,可能会超出雏鹅的代谢和吸收能力,导致钙盐蓄积沉积在关节及脏器中,加剧鹅痛风。
1.3 肠道菌群紊乱
三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)结合转运蛋白超家族成员之一的亚家族G成员2(ABCG2蛋白)是分泌尿酸的主要物质之一,Ichida等[19]研究指出,部分致病菌(如大肠杆菌、沙门氏菌和肠球菌等)的感染可通过多种途径影响ABCG2的表达。越来越多的研究证实肠道菌群生态系统对肾脏健康和痛风发生强相关。其中Xi等[20]研究证实,患有痛风症的雏鹅体内肠道菌群紊乱、肠壁通透性可通过肠源性脂多糖的转运而升高,提高了细菌等微生物入血的概率,进而损伤雏鹅肾脏。Guo等[21]报道发现,痛风鹅粪拟杆菌和解木聚糖拟杆菌在肠道中富集,普拉梭菌减少,这些微生物指标可作为检测鹅痛风的一种创新的、敏感的方法。朱道仙等[22]提出患痛风的雏鹅肠道菌群多样性降低,有害菌(如肠球菌属、埃希菌属及变形菌等)丰度增加,这种改变通过调控toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(Myeloid differentiationfactor 88,MyD88)和核因子κB(Nuclear factor-κB,NF-κB),即TLR4/ MyD88/ NF-κB信号通路加剧雏鹅肾脏损伤,促使痛风的发展。
2 鹅痛风诊断方法分析
2.1 临床诊断
鹅痛风的初步诊断可根据该病的临床症状结合病理剖检得出。内脏型痛风多见于1~15日龄的雏鹅,呈群体急性发作,临床症状为厌食,体温升高,泄殖腔周围黏附白色或黄色的尿酸盐结晶。病程长的雏鹅肾脏功能受损,致使多脏器逐渐衰竭而死,耐过的形成僵鹅,生长发育缓慢,且容易出现继发感染,病程一般在3~7 d。李曼曼等[23]通过病理剖检发现,雏鹅卵黄吸收不良,内脏器官黏连;肾脏肿胀或萎缩,出现花斑肾,输尿管扩大呈索状,增粗增厚,内有白色沉积物;胸壁、胸腹腔浆膜及腹部器官可见白色或黄白色细粉样沉积物,触摸有粗糙感,部分有肠道栓子出现。关节型痛风主要见于仔鹅和成年鹅,一般呈慢性发作。郭洪伟[24]研究发现,鹅痛风发病初期饮水量增加,髋关节、翅关节等有明显的软肿胀,随病程延长病鹅喙和噗苍白,跛行,部分患鹅瘫痪,体温高达42 ℃;疾病发展到后期,关节轮廓明显,腿肌、关节软骨周围出现尿酸盐结晶,严重时形成痛风石,内有硬结节,部分鹅翅、腿等关节部位显变形,仔鹅病变关节往往发生破溃。引起雏鹅痛风的因素较为复杂,确诊还需要结合实验室研究进行进一步检测。
2.2 分子生物学诊断
逆转录定量聚合酶链式反应(Reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)作为一种常规的病原检测方法,可以对临床疑似病例进行快速确诊。Yu等[25]建立TaqMan RT-qPCR探针法对GoAstV进行检测,检测结果具有较高的特异性和良好的批内、批间重复性,与其他鹅源病毒不存在交叉反应,变异系数在0.48%~0.99%。Yuan等[11]建立的检测GoAstV的RT-qPCR方法能实现最小检测样本量为52.5个的拷贝,比普通PCR的病毒检出率高7.5%。RT-qPCR可扩增鹅星状病毒的ORF1b、ORF2或RdRp基因,结合测序结果可对致病星状病毒进行分型。
环介导等温扩增反应(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种能够在恒温条件下进行的核酸扩增反应,具有快速、高效的优势,通过水浴锅即可完成,已大量应用于多种病原微生物的临床样本检测。张玉霞等[26]建立的LAMP检测方法,用于检测GoAstV,与RT-qPCR方法相比较,其阳性符合率达95.65%,最低检测浓度1 ng/μL,具有良好的特异性和较高的敏感性。Ji等[27]建立了一种新的基于逆转录环介导等温扩增(Reverse transcription-LAMP,RT-LAMP)的等温检测方法,与RT-qPCR相似,其可特异性地检测GoAstV,反应结束时可目测观察结果,该方法成本低、操作方便,能够用于检测GoAstV感染。
酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)是一种基于免疫学的血清学诊断方法,在畜牧业临床疾病诊断中被大量应用,具有操作简单、快速、高通量、特异性好和敏感性强等优点。鹅星状病毒血清学的ELISA检测试剂也表现出特异性强、敏感性高和能批量检测的优越性,临床样本的阳性、阴性检出准确率均较高。
3 鹅痛风防治措施分析
3.1 药物防治
鹅痛风暂无特效药,卵黄抗体可以作为防治雏鹅痛风的补充手段之一,配合使用经药敏试验得到的敏感抗生素,可以防止继发感染,但有时效果不够理想。中药在治疗鹅痛风病例中具有独特的优势,土茯苓和黄柏等可通过抑制黄嘌呤氧化酶活性来降低尿酸盐的生成,从而控制痛风的发作。丁瑞等[28]研究表明,土茯苓皂苷与别嘌呤醇合用可明显降低小鼠血清尿酸水平或使其正常化。单一的中草药可影响多个代谢途径,将几种单药组合使用会具有更好的治疗效果。复方中药治疗痛风的疗效好、不良反应少,一直备受青睐。白藜芦醇和海藻酸钠联合使用,对急性痛风性关节炎具有良好的效果,Wang等[29]检测发现白藜芦醇能够通过抑制核苷酸结合寡聚化结构域(Nucleotide binding oligomerization domain,NOD)样受体热蛋白结构域相关蛋白3的表达,有效抑制急性痛风性关节炎的发作;Chen等[30]研究发现,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3的表达还可以保护肾功能,降低血清中的尿酸水平。Wang等[31]研究表明,川胡抗痛风合剂与秋水仙碱相比在降低痛风复发率和减轻疼痛方面效果明显,副作用较小,对肾功能具有一定的保护作用。复方土茯苓颗粒主要由土茯苓和穿山龙组成,据Liu等[32]研究报道,复方土茯苓颗粒可以通过调节肾脏中葡萄糖转运蛋白9表达,促进尿酸的排泄。由此可以看出,中药在鹅痛风的治疗过程中具有一定的潜力。
3.2 生物安全防治
生物安全防治对切断由星状病毒等导致的鹅痛风的传染渠道至关重要。一是用离地网架饲养育雏,或者多层笼养,以减少粪污与雏鹅的接触,降低病原交叉感染概率;二是采用全进全出的方式,实现粪污的批次化处理及后续的资源化利用,这既可以降低对周围环境污染的压力,又可加强对批次间病原的控制;三是采用封闭式管理,优化饲养环境,做好厂区、器具设施、种蛋和工作人员等的消毒和清洁;四是采用科学的饲喂制度,均衡日粮营养,饲喂低蛋白、高粗纤维水平的饲粮,实现尿酸盐水平的降低;五是监测种源,优选父母代种苗,避免直接购买蛋源进行孵化,杜绝垂直传播。
3.3 综合防治
对于鹅痛风,临床上宜采用“预防为主,防大于治”的方案,及时淘汰发病鹅只,对病死鹅进行无害化处理,以降低病原微生物感染概率;加强禽舍通风,保证鹅舍内的温度、湿度及鹅只饲养密度在合理范围;减少使用可能加重肾脏负担的药物;采用合理的饲料配方,适量补充青草,以维持肠道内菌群微生态的平衡,必要时可饲喂有机酸、乳酸菌等益生菌。采取以上综合措施,可降低鹅痛风发生的风险。
综上,本文就鹅痛风的病因、诊断方法和防控措施进行综述,为养殖户提供防治鹅痛风的具体策略、促进鹅产业健康发展提供参考。
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(责任编辑:杨 欢)
基金项目 安徽省高等学校科学研究项目(2023AH051839);安徽科技学院引进和稳定人才项目(DKYJ202005);安徽科技学院大学生创新创业训练计划项目(S202210879207,S202210879209,S202210879192);临泉县牛羊产业创新基金项目(2020AK-LQ05)。
作者简介 翟桂发(2001—),男,安徽亳州人,从事动植物检疫研究。
通信作者 阮崇美(1983—),男,河南周口人,博士,讲师,从事畜禽健康养殖的教学与科研工作。
收稿日期 2024-02-05