重组结核杆菌融合蛋白(EC)在结核病潜伏感染诊断和筛查中的应用价值

摘要：目的 研究重组结核杆菌融合蛋白（EC）在结核病潜伏感染诊断和筛查中应用价值。方法 选取我县2023年9月秋季入学的3000名高一年级新生进行结核病筛查，采用随机数字表法分为对照组（n=1500）和观察组（n=1500），对照组进行卡介菌纯蛋白衍生物（BCG-PPD）皮肤试验检测，观察组进行EC皮肤试验检测，同时筛查肺结核可疑症状及结核病密切接触史。对PPD皮肤试验强阳性者进行胸片DR检查，EC皮肤试验阳性者进行胸片DR检查。比较两组皮试阳性率、有肺结核可疑症状及结核病密切接触史患者阳性率、胸片DR结果及试验不良反应。结果 观察组皮试阳性率（0.80%）低于对照组（16.53%）（P<0.05）;观察组有肺结核可疑症状及结核病密切接触史者阳性率与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）;观察组皮试阳性/强阳性者胸片DR检出率为8.33%，高于对照组的6.67%（P<0.05）;观察组检测不良反应发生率低于对照组（P<0.05）。结论 EC在结核病潜伏感染诊断和筛查中具有显著的作用，可一定程度提高筛查准确性，同时检测安全性相对高，可作为学校结核病筛查的首选方法。

关键词：结核病;重组结核杆菌融合蛋白;潜伏感染;筛查

中图分类号：R52 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2024.20.031

文章编号：1006-1959（2024）20-0147-04

Application of Recombinant Mycobacterium Tuberculosis Fusion Protein （EC） in the Diagnosisand Screening of Latent Infection of Tuberculosis

LIAO Yuanyuan1，SUN Yanfei2，CHEN Dasheng1，ZHANG Zhicong2

（1.Department of Tuberculosis Prevevtion，Anyuan County Center for Disease Control and Prevention，Anyuan 342100，Jiangxi，China;

2.Department of Infectious Diseases，Anyuan County People's Hospital，Anyuan 342100，Jiangxi，China）

Abstract：Objective To study the application value of recombinant Mycobacterium tuberculosis fusion protein （EC） in the diagnosis and screening of latent tuberculosis infection. Methods A total of 3000 high school freshmen enrolled in the autumn of September 2023 in our county were selected for tuberculosis screening. They were divided into control group （n=1500） and observation group （n=1500） by random number table method. The control group was tested by BCG-PPD skin test， and the observation group was tested by EC skin test. At the same time， the suspicious symptoms of tuberculosis and the history of close contact with tuberculosis were screened. Chest DR examination was performed on those with strong positive PPD skin test， and chest DR examination was performed on those with positive EC skin test. The positive rate of skin test， the positive rate of patients with suspicious symptoms of tuberculosis and close contact history of tuberculosis， the results of chest X-ray DR and adverse reactions were compared between the two groups.Results The positive rate of skin test in the observation group （0.80%） was lower than that in the control group （16.53%） （P<0.05）. There was no significant difference in the positive rate of patients with suspicious symptoms of tuberculosis and close contact history of tuberculosis between the observation group and the control group （P>0.05）. The detection rate of chest DR in patients with positive/strong positive skin test in the observation group was 8.33%， which was higher than 6.67% in the control group （P<0.05）. The incidence of adverse reactions in the observation group was lower than that in the control group （P<0.05）.Conclusion EC plays a significant role in the diagnosis and screening of latent tuberculosis infection， which can improve the accuracy of screening to a certain extent， and the safety of detection is relatively high. Thus， it can be used as the preferred method for tuberculosis screening in schools.

Key words：Tuberculosis;Recombinant Mycobacterium tuberculosis fusion protein;Latent infection;Screening

结核病（tuberculosis）是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病，严重危害人类的健康[1]。结核潜伏感染是指机体内感染了结核分枝杆菌，但没有发生临床结核病，没有临床细菌学或者影像学方面活动结核的证据[2]。结核潜伏感染者没有结核病相关的症状和体征，没有传染性[3]。相关数据调查显示[4]，结核潜伏感染人群（latent tuberculosis infection， LTBI）是结核新发病的重要来源。目前检测诊断 LTBI 者尚缺乏统一的方法及相应的标准[5]。因此，如何简便且确性又高地诊断感染者并实施预防是结核病防治工作的关键。目前我国注册上市的TBST产品ESAT-6/CFP-10蛋白有重组结核杆菌融合蛋白（EC），EC具有结核分枝杆菌复合群抗原特异性，可将其作为变态反应原用于结核感染筛查[6，7]。本研究选择我县2023年9月秋季入学的3000名高一年级新生作为筛查对象，进一步探究EC 在结核病潜伏感染诊断和筛查中的价值，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料 选取安远县2023年9月秋季入学的3000名高一年级新生进行结核病筛查，采用随机数字表法分为对照组（n=1500）和观察组（n=1500），对照组男780名，女720名;年龄15～17岁，平均年龄（16.02±1.03）岁;有肺结核可疑症状及结核病密切接触史者20名。观察组男765名，女735名;年龄14～17岁，平均年龄（15.98±0.80）岁;有肺结核可疑症状及结核病密切接触史者17名。两组性别、年龄及有肺结核可疑症状及结核病密切接触史者比例比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。所有学生均自愿参加本研究，并签署知情同意书。

1.2纳入和排除标准 纳入标准：①均为高一年级新生;②均进行现场流行病学个案调查。排除标准：①随访资料不完善者;②依从性较差，不能积极配合者。

1.3方法 对照组进行卡介菌纯蛋白衍生物（BCG-PPD）皮肤试验检测[8]，观察组进行EC皮肤试验检测，同时筛查肺结核可疑症状及结核病密切接触史。皮肤试验检测法：分别在对照组、观察组的受试者左前臂掌侧中下1/3的皮肤部位皮内注射BCG-PPD 0.1ml（5 IU）、EC 0.1 ml（5 IU）试剂，直至出现6～10 mm大小橘皮样的圆形丘，不要揉摩，将针稍捻转后退出，在皮试后72 h（48～72 h）查验反应，PPD皮试以触摸和测皮肤硬结为阳性判断标准，EC皮试以红晕或硬结为判断标准。对PPD和EC皮肤试验阳性者进行胸片DR检查。

1.4观察指标 在皮试后72 h （48～72 h）查验反应，比较两组皮试阳性率、有肺结核可疑症状及结核病密切接触史患者阳性率、胸片DR结果以及试验不良反应。

1.4.1 BCG-PPD判断标准[9] 以触摸和测皮肤硬结为阳性判断标准，根据《肺结核诊断标准》（WS 288-2017），皮试硬结平均直径[（横径+纵径）/2）]<5 mm或无反应者为阴性;硬结平均直径 ≥5 mm为阳性反应（其中硬结平均直径5～10 mm为一般阳性;硬结平均直径10～15 mm为中度阳性;硬结平均直径≥15 mm或局部出现双圈、水疱、坏死及淋巴管炎者为强阳性，为结核感染强阳性反应）。

1.4.2 EC判断标准[10] 以红晕或硬结大者为准。无红晕或硬结反应为阴性;红晕或硬结平均直径[横径+纵径）/2]≥5 mm或水疱、坏死、淋巴管炎者为阳性，为结核感染。

1.5统计学方法 采用统计软件包SPSS 20.0版本对本研究的数据进行统计学处理，采用（x±s）表示符合正态分布的计量资料，组间比较采用t检验;计数资料采用[n（%）]表示，采用χ2检验，P<0.05说明差异有统计学意义。

2结果

2.1两组皮试阳性率比较 观察组阳性率低于对照组（P<0.05），见表1。

2.2两组有肺结核可疑症状及结核病密切接触史者阳性率比较 观察组阳性率与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

2.3两组胸片DR检测结果比较 观察组皮试阳性/强阳性者胸片DR检出率高于对照组DR检出率（P<0.05），见表3。

2.4两组检测不良反应发生率比较 观察组检测不良反应发生率低于对照组（P<0.05），见表4。

3讨论

当前，结核病潜伏感染的诊断主要依赖于特定的诊断技术和辅助检查[11]。目前，世界卫生组织（WHO）推荐的主要诊断技术包括结核菌素皮肤试验（PPD）、γ-干扰素释放试验以及新型皮肤试验如EC，其中EC是一种新型检测方法，它结合了两种检测技术的特点，成为结核感染检测技术家族的新成员[12，13]。但是目前关于EC对结核病潜伏感染诊断和筛查的相关研究较少，且已有研究结论存在差异，是否具有良好应用有效性、安全性，还需要临床进一步探究证实[14，15]。

本研究结果显示，观察组阳性率低于对照组（P<0.05），提示EC皮试检测阳性检出率低于BCG-PPD皮试。但是EC皮试均为阳性或强阳性，提示两者强阳性率基本相似。因此，EC与BCG-PPD皮肤试验检测均可对结核病潜伏感染进行筛查。分析认为，因为PPD 成分复杂，易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌感染产生的交叉免疫反应影响，从而假阳性概率较高[16，17]。本研究显示，观察组阳性率与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05），表明对肺结核可疑症状及结核病密切接触史者进行筛查，EC皮肤试验检测阳性率与BCG-PPD结果基本相似，进一步提示对高危人群进行筛查，以上两种方法可自由选择[18]。卢鹏等[19]的研究与本次结果类似，说明在肺结核可疑症状及结核病密切接触史人群中，采用EC皮肤试验诊断结核潜伏感染可能更为合适。建议在肺结核可疑症状及结核病密切接触史人群中采用EC皮肤试验阳性以提高灵敏度。因此，临床在高危人群筛查中EC皮肤试验检测具有显著的优势[19]。本研究发现，观察组皮试阳性/强阳性者胸片DR检出率为8.33%，高于对照组DR检出率6.67%（P<0.05），提示对EC皮试阳性者进行胸片DR检查，可提高检出率。该结论表明通过EC皮试大规模筛查后，进行DR进一步检查，可相对提高结核病潜伏感染检出率，有效降低假阳性，缩小筛查范围。同时EC皮肤试验检查价格适中，操作简便，在大规模人群筛查中具有优势。此外，观察组检测不良反应发生率低于对照组（P<0.05），提示EC皮试检测安全性更好，检测不良反应少，利于良好的筛查耐受性，尤其适合学校大规模筛查[20]。

总之，EC作为我国自主研发的一种新型结核感染皮肤试验的检测，不仅价格适中，操作简便，而且具有良好的敏感度，可避免卡介疫苗影响，降低假阳性。同时EC在高危人群筛查中可获得与比BCG-PPD高的灵敏度，且不良反应少，在大规模人群筛查中具有显著的应用优势。

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编辑/成森

基金项目：2023年赣州市指导性科技计划项目（编号：GZ2023ZSF372）

作者简介：廖媛媛（1979.10-），女，江西安远县人，本科，主治医师，主要从事结核病预防及治疗工作