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鸡传染性支气管炎的诊断及科学有效的防治措施

2024-06-28李婷婷

农民致富之友 2024年18期
关键词:琼脂宿主支气管炎

李婷婷

DOI: 10.3969/j.issn.1003-1650.2024.18.032

鸡传染性支气管炎属于一种急性呼吸道疾病,是由传染性支气管炎病毒感染而引起的一种严重、具有高度接触性的传染病,在临床上可以将鸡肉分为呼吸型、肾型、腺胃炎型和生殖系统型4种,在这4种类型当中,呼吸型和肾型的发生率是最多的。患病鸡会有以下症状:无法正常呼吸,持续的咳嗽,气喘,打喷嚏,流鼻涕,气管内有啰音,气管内有浆液性或卡他性炎症病变。肾型出现的症状是:肾明显肿胀,表面变得苍白,并且有很多的尿酸钠在肾小管和输尿管内堆积。该病通常以起病突然、发展迅速、死亡率高为特征,一旦暴发,将对鸡的生长与繁殖造成极大的危害。成年期的鸡如果被传染了一般没有什么症状,但会对鸡的生产有很大的危害,导致蛋鸡的产蛋率明显降低,鸡蛋壳变薄,蛋清淡薄,肉鸡生长发育不良。

传染性支气管炎多见于成年期的鸡群和30-35日龄的幼鸡,其他时期的鸡对该种疾病有比较高的抵抗力。在产蛋期,当蛋鸡被传染上传染病后,其产蛋率会降低10%-50%,甚至下降60%-90%,对养鸡业带来巨大的经济损失。根据目前我国畜禽疫病的发病和传播情况,由于缺乏有效的防治措施,导致畜禽疫病的爆发,给畜禽整体带来巨大的经济损失。另外,由于鸡群中存在着多种细菌、病毒等疾病,因此,在进行鸡群传染病治疗的时候,往往会出现一些比较复杂的病症,这给鸡群的诊断带来了一定的困难。因此,在进行疾病防治的时候,必须强化对鸡传染性支气管炎流行病学研究,进行详细的了解,有效的预防和治疗,在较快的速度下将病情控制住,以免造成更加严重的经济损失。

一、鸡流行病学特征

1、病原特征

鸡传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒引起的一种急性、高度传染性的疾病。该病主要影响呼吸道,但也可以影响鸡肾脏和生殖系统,对家禽产业造成严重经济损失。IBV的血清分型非常复杂,这是因为病毒具有高度的遗传多样性,可导致不同的血清型出现。血清型的划分基于病毒表面的刺突(S)蛋白,这种蛋白负责与宿主细胞受体结合,并且是引起免疫反应的主要抗原。传统上,血清型是通过病毒中和试验确定的,但这种方法耗时久且需要专门的实验室条件。随着分子生物学技术的发展,尤其是序列分析和分子标记技术的应用,现在可以更精确地进行血清型鉴定。IBV是冠状病毒科(Coronaviridae)的成员,其特征是具有俗称“冠”的棘突(spike)蛋白,这些蛋白从病毒颗粒的表面突出。IBV的病毒颗粒通常是圆形或多形性的,并且直径约为120-160nm。病毒颗粒包括一层脂质包膜,这使得它们对环境因素(如溶剂和消毒剂)相对敏感。病毒的基因组由单链正义RNA组成,大约有27000-32000个核苷酸。病毒对环境的适应性较差。病毒对热、干燥和紫外线非常敏感,但在冷和湿润的条件下可以存活较长时间。在室温下,病毒可能在干燥的表面上存活几天,在水中或湿度较高的物体表面上可能存活更长时间。环境中的不同消毒剂,如甲醛、醇类和氯化物,可以有效地灭活该病毒。IBV是一种具有脂质包膜的RNA病毒,对温度和pH的变化敏感。病毒在56℃的温度下几分钟内可被灭活,在酸性或碱性条件下也容易失活。病毒对有机溶剂和去垢剂敏感,因为这些化学物质可以破坏病毒的脂质包膜。

2、致病机理

IBV主要通过呼吸道进入宿主体内。它的刺突(S)蛋白特别是S1亚基具有与宿主细胞表面受体结合的能力,这是病毒侵入细胞的第一步。病毒与受体结合后,通过膜融合或受体介导的内吞作用进入宿主细胞。病毒的RNA基因组在进入宿主细胞后直接作为mRNA使用,通过宿主的翻译机制产生病毒蛋白,包括结构蛋白和非结构蛋白。非结构蛋白参与病毒基因组的复制和亚基因组mRNA的合成。病毒的进入和复制触发宿主细胞内的免疫反应。宿主细胞会通过干扰素等抗病毒机制来抵抗病毒的复制。然而,IBV病毒具有一定的免疫逃避策略,可能通过抑制干扰素的产生或干扰干扰素信号通路来逃避宿主的抗病毒反应。IBV主要感染呼吸道上皮细胞,但也可以感染肾脏和泌尿生殖道。病毒的复制和蔓延导致细胞死亡和组织破坏,引发炎症反应。这些病理变化导致典型的临床症状,如呼吸困难、咳嗽、打喷嚏、流鼻涕和减少产蛋。病毒致病机理是一个复杂的过程,既包括病毒因子也包括宿主的免疫应答。由于病毒的高变异性,它能够逃避宿主的免疫系统并在鸡群中快速传播,导致疾病爆发和经济损失。因此,了解病毒的致病机理对于开发有效的疫苗和控制措施至关重要。

3、流行特点

鸡传染性支气管炎病毒是一种冠状病毒,天然宿主是鸡,各种年龄的鸡都有可能被病原感染,尤其是7-18周龄的鸡易感性最大,产蛋鸡中也容易被病原感染。传染性支气管炎病毒的传播和流行没有任何季节的关系,但是在秋冬季节的发生率是最高的,这是由于这两个季节存在着很多的应激因素,外部的温度会有很大的波动。如果养殖管理出现了问题,养殖密度过大,圈舍温度出现了改变,周围的卫生环境变得很差,饲料营养价值降低,营养严重缺乏,鸡群身体抵抗力降低,都可以引发或者促进该种病毒在养殖场内的快速传播蔓延。鸡传染性支气管炎病毒一般是经过胃肠道和带毒的鸡蛋进行横向和纵向的传播。临床康复期和成年期的鸡是传染性支气管炎病毒的重要感染源,尤其是康复期的鸡能够长期携带传染性支气管炎病毒,是导致畜禽养殖中多次暴发的重要因素。在正常情况下,鸡的传染能力很强,通常会在发病后1-2d内蔓延到全群。

二、临床表现

不同年龄鸡之间感染传染性支气管炎病毒后,临床表现也各不相同。在这些类型中,1-4周龄的雏鸡对病毒的易感性最强,会表现为突然发病。在发病后,多数患病病例会表现为:精神状态变差,生长发育受到了严重的影响,羽毛杂乱,双翅下垂,首先会出现严重的呼吸道症状,呼吸极其困难,不停地伸颈张嘴呼吸,有些患病的鸡还会表现出咳嗽。发病2-3d后,可在气管内听到病鸡呼出的啰音。大部分患病鸡的体温都在40℃以上,持续高烧,惧怕寒冷,聚在一起取暖,晚上可以听见鸡从呼吸道中传来的如同拉风箱般的喘息声。年龄较大的鸡临床症状比较温和,但会严重影响机体的生长发育,一般表现为生长迟缓,甚至停止生长,导致养殖场的淘汰率不断提高。此外,病毒还会对输卵管产生严重的影响,危害到输卵管的正常发育,成年期的鸡感染病毒后的临床症状比较轻微,但会明显降低成年蛋鸡的生产性能,产蛋率下降50%以上,许多病鸡排出的鸡蛋不成型,还有一些不带鸡蛋壳的畸形蛋。也有个别患病鸡出现比较严重的腹泻,大便呈灰白色,呈水样,大便中含有大量的灰白色的尿酸盐。经过一段时间的感染,鸡会变得非常虚弱,皮肤变得苍白,没有弹性,变得干瘪,鸡冠、肉髯发紫,最后倒地死去。

三、病理改变

对死亡的患病鸡进行了进一步的解剖,可以看到大部分患病鸡的呼吸道和肾脏都发生了变化。许多病死鸡在鼻腔、喉头、气管、支气管粘膜上都会有一层黄白色的脓性分泌物。如果是长期的病死病例,则会导致喉头严重堵塞,清除堵塞物后,可以看到喉头黏膜表面有糜烂水肿出血。老龄鸡病死解剖后,会发现输卵管有很大的损伤,输卵管非常的充血、水肿,而且在输卵管里面会有很多透明的蛋液,卵泡充血,而且会有各种的变形,有时候会有一些已经成熟的卵子会掉落进腹腔,引起卵黄性腹膜炎。除了呼吸道的病变外,大部分病死鸡还会出现肾脏的严重病变,肾脏明显肿胀,表面呈苍白色,剖开肾脏可有沙沙的触感。肾盂、输尿管、肾小管内有大量尿酸盐沉积,呈白色,导致肾小管、尿道明显扩张,肾脏呈花斑状,即花斑肾。通过以上几种典型的病理学改变,可以对传染性支气管炎做出初步诊断。为了进一步明确诊断,需要从病鸡中提取鲜血,用琼脂扩散试验来鉴定病原。

四、实验室诊断

1、琼脂扩散试验

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的琼脂扩散试验是一种用于检测IBV特异性抗体的血清学方法。准备试验材料包括IBV病毒、琼脂平板、待检血清、抗原-抗体复合物等。将琼脂平板划分为多个小区,每个小区的面积约为5mm×5mm。在每个小区中加入50μL的IBV病毒液。将加样后的琼脂平板放在酒精灯上加热,使样品凝固。在每个小区中加入50μL的待检血清,轻轻振荡混匀。将加样后的琼脂平板放在酒精灯上加热,使样品凝固。将琼脂平板放在37℃水浴锅中,孵育1-2h。用PBS缓冲液洗涤每个小区5次,每次洗涤50μL。在每个小区中加入50μL的抗原-抗体复合物,轻轻振荡混匀。将琼脂平板放在37℃水浴锅中,孵育1小时。用PBS缓冲液洗涤每个小区5次,每次洗涤50μL。在每个小区中加入50μL底物溶液,轻轻振荡混匀。在30s内观察每个小区的颜色变化,判断结果。对照组病毒对照孔和IgG对照孔出现明显的红色沉淀。试验组待检血清孔出现红色沉淀,表示待检血清中含有IBV特异性抗体。根据待检血清中的颜色变化与对照组相比,判断血清的抗体效价。

2、血凝抑制试验

准备试验材料包括IBV病毒、96孔板、红细胞悬液、待检血清等。将IBV病毒用PBS缓冲液稀释至适当的浓度。将洗涤过的红细胞用PBS缓冲液稀释至适当的浓度。将稀释后的病毒液和红细胞悬液分别加入96孔板中,每孔加样量为50μL。在每个孔中加入50μL的待检血清,轻轻振荡混匀。将96孔板置于37℃水浴锅中,孵育1-2h。用PBS缓冲液洗涤每个孔5次,每次洗涤50μL。在每个孔中加入50μL豚鼠抗鸡IgG,轻轻振荡混匀。将96孔板置于37℃水浴锅中,孵育1h。用PBS缓冲液洗涤每个孔5次,每次洗涤50μL。在每个孔中加入50μL底物溶液,轻轻振荡混匀。在30s内观察每个孔的颜色变化,判断结果。病毒对照孔和IgG对照孔出现明显的红色沉淀,表示待检血清中含有IBV特异性抗体。根据待检血清孔的颜色变化与对照组相比,判断血清的HI抗体效价。

3、病毒中和试验

准备试验材料包括IBV病毒、细胞培养液、待检血清、病毒稀释液等。将细胞培养液配制成适当的浓度,并调整pH值。将IBV病毒用细胞培养液稀释至适当的浓度。将稀释后的病毒液和待检血清分别加入细胞培养液中,轻轻振荡混匀。将细胞培养液放在37℃水浴锅中,孵育1-2h。将细胞培养液接种到适当的细胞培养板中,轻轻振荡混匀。细胞培养板放在37℃二氧化碳培养箱中,孵育1-2d。观察细胞培养板中的细胞病变情况,判断结果。对照组病毒对照孔和IgG对照孔出现明显的细胞病变。试验组待检血清孔出现较轻的细胞病变,表示待检血清中含有IBV特异性抗体。根据待检血清孔的细胞病变情况与对照组相比,判断血清的中和抗体效价。

4、反转录多聚酶链式反应

从IBV感染的鸡组织或细胞中提取病毒核酸。根据IBV基因序列设计引物,用于PCR反应。将提取的病毒核酸反转录成cDNA,反转录产物作为模板,进行PCR反应。将PCR产物进行电泳检测,观察结果。试验后对照组阳性对照孔出现明显的扩增带,阴性对照孔无扩增带。试验组待检样本孔出现扩增带,表示样本中含有IBV核酸。根据待检样本孔的扩增带与对照组相比,判断样本中IBV核酸的存在。

五、科学预防和控制

1、疾病治疗

当前鸡传染性支气管炎还没有特效药,总体的药物治疗效果并不理想。而且,由于临床康复鸡能够长期携带病毒,所以,在养殖基地中一旦出现了这种病,一般都是不需要进行治疗,而是将发病的鸡进行单独的宰杀,然后进行无害化处理。在养殖场中假设没有临床症状的健康鸡,可选用咳喘康,100g配水2000mL,煮沸30min后加凉开水25kg连续饮水1周。同时,每吨饲料加入黄芪多糖粉剂1000g,再加入100g的白头翁散药物,连续饲喂1周。1周后,再无新的病例出现。在疾病得到控制后,养殖人员会分批收集鸡群的鲜血,进行抗原测试,一旦发现有带毒的病鸡,就会立刻将其淘汰,并进行有效的净化。

2、防范措施

防止该种疾病的发生流行,重点是要强化养殖管理,要尽可能选择营养价值全面的饲料,确保饲料中的营养价值平衡。维生素、矿物质和必要的氨基酸添加必须要合理。饲料要定时定量投喂,不能给鸡投喂发霉变质的饲料。秋冬季节正是鸡传染性支气管炎发病的高峰期,在此期间要做好鸡舍的防寒保暖工作,增强通风协作,控制好饲养密度,避免同一个鸡舍养殖不同年龄的鸡,减少鸡群之间的接触,禁止拥挤。平时给鸡喂食时,要注意动作要轻一点,以免引起鸡的应激反应。结合传染病的流行特点,有针对性地对农户进行免疫。1-3日龄的雏鸡,可以用新传支二联活疫苗来点眼,也可以用来滴鼻。在5-7d的时候,可以选择滴眼、滴鼻等方式进行接种。20-25日龄,按以上方法进行第二次加强免疫。在70-80日龄时,选用新城疫四系疫苗和呼吸型传支二联活疫苗点眼和滴鼻。在此基础上,选用新支二联油佐剂灭活疫苗0.5mL进行肌肉注射。在开产前,选用新城疫四系疫苗及呼吸型传支二联活疫苗点眼和滴鼻,各2羽份。同时选用新支二联油佐剂灭活疫苗0.5mL进行肌肉注射。

总之,在大型禽业养殖中,鸡传染性支气管炎是一种比较常见的病毒传染病。这种病毒出现的很突然,并且扩散的速度也很快,在很短时间里可以引起一大批的鸡都出现症状,给养殖人员的生活和工作带来了很大的困难,经常会导致大规模的感染和死亡,给整个禽类养殖业都带来了很大的经济损失。在鸡群区内,畜牧兽医和养殖管理人员应当对传染性支气管炎所带来的巨大危害进行全面的了解和分析,重视对传染病的流行病学研究,对该种传染病的发生、流行情况进行全面了解,并与农户展开深入、详细的沟通,指导农户重视对传染病的检查、诊断以及对传染病的有效预防,切实做到早发现、早处置,将疫情遏制在萌芽状态,防止病原进一步的扩散、蔓延导致更加严重的经济损失。

(作者单位:812100 青海省西宁市湟源县畜牧兽医站)

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