基于信号通路的中药治疗膜性肾病的机制研究概述

马云娜 雷根平 刘丽 王婷 董盛 罗星羽

膜性肾病(membranous nephropathy, MN)是肾小球疾病中常见的一种病理类型,以肾小球上皮细胞下免疫复合物沉积伴基底膜增厚为主要病理特征[1]。近10年来,MN患病率逐年上升,在原发性肾小球疾病中排名第二。调查显示,MN合并肾穿刺活检的比列由12.2%增至24.9%[2]。目前MN发病机制尚不明确,约80%与肾脏本身病变有关,称之为原发性MN;约20%与其他继发性因素相关,称之为继发性MN。MN的主要致病因素为自身免疫反应,其相关靶抗原、循环抗体、补体活化、环境污染及遗传易感基因等因素均参与了MN免疫应答[3]。由此可见,抑制肾脏病免疫反应对MN的治疗极具重要意义。

中医经典中并没有明确提出MN的病名,但根据其临床表现将其归属于“尿浊”、“水肿”、“虚劳”等范畴[7]。中医认为MN总属本虚标实,其脾肾亏虚为基本病机,气滞、血瘀、湿热、痰凝为其标实,虚实夹杂共同导致MN进展[4]。中药在治疗MN上具有毒副作用小、多层次、多靶点、多通路等特点。MN的发生与发展与多条信号通路的参与及异常激活有着密切的联系。本文根据已有的实验研究,总结近年来中药调控相关信号通路治疗MN的作用机制,以期为后续的实验研究与临床研究提供新的研究思路与科学证据。

1 PI3K/Akt信号通路

1.1 PI3K/Akt信号通路与MN的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)发现于1998年,由调节亚基p85和催化亚基p110组成,可传导多种重要的生物学信号[5]。蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)为PI3K/Akt 信号通路传导的核心,为PI3K下游的主要信号传导物。当激活PI3K时,可使其下游信号传导物Akt发生磷酸化,从细胞质转移到细胞膜,并可依次调节下游各种靶点蛋白,包括mTOR、糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3, GSK3β)、相关死亡启动因子(Bcl-xL/Bcl-2 asociated death promoter, Bad)等[6-7],从而介导细胞增殖、自噬和凋亡等。研究发现,激活PI3K/Akt信号通路可以保护肾脏,抑制肾脏免疫炎症反应,其主要从足细胞自噬、足细胞凋亡、氧化应激,炎症反应等方面发挥作用[8-10]。由此可见,激活PI3K/Akt信号通路在MN的发生发展过程中发挥着重要的作用。

1.2 中药基于PI3K/Akt信号通路治疗MN的机制

粉防己碱是从中药防己中提取的一种双苄基异喹啉类生物碱。研究表明粉防己碱除了抗肿瘤、抗过敏、抗心律失常作用外,还有抗炎、抗氧化、抗纤维化等作用[11]。Yin等[12]通过建立Heymann肾炎大鼠模型实验,发现粉防己碱通过抑制PI3K/Akt通路显著降低大鼠肾组织白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1, MCP-1)等炎症因子表达,升高足细胞裂隙隔膜分子(Nephrin)和膜蛋(Podocin)的表达,抑制免疫炎症反应及足细胞凋亡,进而达到保护肾脏的作用。

姜黄素是从中药姜黄根茎中提取的一种多酚类物质。现代研究发现姜黄素具有降血糖、抗肿瘤、抗炎、抗氧化应激等多种作用[13]。Di等[14]的实验证明姜黄素可调控PI3K/Akt信号通路,诱导自噬,减轻足细胞损失,其可能与增加Bcl-2相互作用蛋白(Bcl-2 interacting coiled-coil protein 1, Beclin1)和微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ型/微管相关蛋白1轻链3-I型(microtubule associated protein 1light chain 3-Ⅱ/microtubule associated protein 1light chain 3- I, LC3 II/LC3 I)自噬小体活性标志物有关,此外也可通过升高肾脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)和过氧化氢酶(catalase, CAT)水平,降低丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平改善肾脏氧化应激反应,从而缓解MN的进展。

丹酚酸B是从中药丹参中分离得到的重要水溶性活性成分。相关研究证实丹酚酸B具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化和抑制细胞凋亡等多种药理作用[15]。Chen J等[16]实验研究发现,丹酚酸B可通过上调肾脏中miR-145-5p表达,增加自噬蛋白beclin1和微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(microtubule associated protein I light chain 3B, LC3B)的表达,诱导自噬,从而调控PI3K/Akt信号通路,抑制肾脏炎症反应与系膜细胞的增殖,起到保护肾脏的作用。

白芍总苷是中药白芍提取的一组糖苷类物质。研究发现白芍总苷具有抗炎、抗氧化、免疫调节等药理作用[17]。林劲等[18]实验发现白芍总苷干预MN大鼠,可增加足细胞骨架蛋白Synaptopodin表达并减少间充质细胞标志蛋白结蛋白(Desmin)表达,维持足细胞结构的完整,其可能与调控PI3K/Akt 信号通路,显著上调Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白表达,激活自噬有关。

中药复方加味升降散在治疗MN方面相关研究较少,已有的实验研究证实加味升降散可抑制足细胞的凋亡,修复受损的足细胞,从而保护肾脏[19]。高飞等[20]实验发现加味升降散可抑制PI3K/Akt信号通路,提高LC3、Beclin1自噬蛋白水平,激活肾脏自噬,从而降低尿蛋白,减轻肾脏病理损伤,延缓MN的进展。

通过上述研究发现,粉防己碱、姜黄素、丹酚酸B、白芍总苷、加味升降散治疗MN作用机制主要是通过抑制PI3K/Akt信号通路,调控肾组织相关细胞因子、足细胞相关蛋白、肾脏相关蛋白酶的表达,从而抑制肾脏免疫炎症反应,抗氧化应激,抑制足细胞凋亡,诱导细胞自噬,达到治疗MN的目的。

2 TGF-β1/Smad信号通路

2.1 TGF-β1/Smad信号通路与MN的关系

TGF-β1为强致纤维化因子,与肾纤维化密切相关[21]。TGF-β1信号通路是足细胞上皮间充质转化(epithelial to mesenchymal transition, EMT)涉及的主要细胞信号通路之一,其可直接激活Smad信号传导,其下游重要信号传导分子有Smad2、Smad3、Smad4和Smad7[22]。研究发现磷酸化的Smad2和Smad3能上调Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白,造成细胞外基质(extracellular matrix, ECM)沉积,促进组织纤维化[23-24]。由此可见,此通路的激活与肾脏纤维化有着密切关系,参与MN的发展。

2.2 中药基于TGF-β1/Smad信号通路治疗MN的机制

扶正祛风方在保护MN足细胞取得满意疗效,相关实验证实其保护MN大鼠足细胞的机制主要是通过调控大鼠足细胞上相关蛋白表达来实现[25]。此外该方也可改善MN大鼠肾脏病理改变,从而延缓MN进展[26]。郭晓媛等[27]使用扶正祛风方干预MN大鼠,实验发现其可抑制TGF-β1/Smad信号通路,下调Desmin蛋白表达,抑制EMT分子机制,减少足细胞凋亡率,抑制肾脏纤维化,从而延缓MN进展。

芪龙通肾方对于降低MN大鼠蛋白尿疗效显著,前期研究证实其作用机制主要是通过降低血清中TGF-β1的含量,减少足细胞损伤,改善肾脏病理损伤,从而保护肾脏[28-29]。李毅等[30]使用C-BSA诱导的MN大鼠实验,发现芪龙通肾方可通过抑制TGF-β1/Smad信号通路,减少血清中TGF-β1的含量,抑制系膜细胞增生,减轻肾脏病理损伤,抑制肾脏纤维化,从而保护MN大鼠足细胞。

通过上述研究发现,扶正祛风方、芪龙通肾方治疗MN作用机制主要是通过抑制 TGF-β1/Smad信号通路,调控相关蛋白表达,抑制足细胞EMT,抑制肾脏纤维化,从而保护MN大鼠足细胞。

3 NOX4信号通路

3.1 NOX4信号通路与MN的关系

NOX家族为催化氧生成活性氧类的关键酶,包括Nox1～Nox5和功能氧化酶1、双功能氧化酶2七名成员。Nox4是Nox家族用于生产过氧化氢的唯一亚型,广泛存在于各类型细胞中,其中肾脏表达最高,具有广泛的生物学功能[31]。正常生理状态下,活性氧(active oxygen, ROS)在Nox4中生成持低水平,当机体受到外界刺激时,激活NOX4通路,而产生大量ROS。研究表明肾脏产生过量ROS会损伤足细胞,使肾脏发生氧化应激损伤[32]。由此可见,抑制Nox4信号通路对MN肾脏具有保护作用。

3.2 中药基于NOX4信号通路治疗MN的机制

三焦祛湿方在保护MN肾组织方面有较好疗效,实验研究发现该方对MN大鼠肾小球足细胞具有保护作用,其作用主要是与上调足细胞α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)、足糖萼蛋白(Podocalyxin)、闭锁小带蛋白-1(zonula occludens-1, ZO-1)和synaptopodin蛋白有关[33-34]。赵亚云等[35]使用60只C-BSA诱导的MN小鼠实验,研究发现三焦祛湿方可通过抑制NOX4信号通路,减少NOX4表达,下调p38 磷酸化水平与ROS表达水平,抑制肾组织氧化应激,进而减轻肾脏病理损害,起到保护肾脏的作用。李绍慧等[36]使用加味升降散干预MN大鼠,实验发现其可通过抑制NOX4信号通路,显著升高B细胞淋巴瘤-2/Bcl-2相关x蛋白(B-cell lymphoma-2/Bcl-2 related x protein, Bcl-2/Bax)水平,促进podocin、synaptopodin,podocalyxin、nephrin足细胞标志蛋白的表达,从而抑制足细胞凋亡,延缓MN进展。

通过上述研究发现,三焦祛湿方、加味升降散治疗MN作用机制主要是通过抑制NOX4信号通路,调控相关蛋白,促进足细胞标志蛋白表达,减轻足细胞损伤,达到治疗MN的目的。

4 Nrf2/HO-1信号通路

4.1 Nrf2/HO-1信号通路与MN的关系

Nrf2是机体重要的抗氧化核转录因子,HO-1为其下游的主要信号蛋白。正常情况下,HO-1蛋白活性较低,当组织受缺血缺氧刺激时,HO-1可通过Nrf2调控,表达上调,从而发挥抗氧化作用[37]。研究表明此通路的激活具有抗炎、抗氧化应激及抑制细胞凋亡等作用[38],与MN的发生发展有着密切关系。

4.2 中药基于Nrf2/HO-1信号通路治疗MN的机制

三芪口服液对于肾脏的保护取得了满意疗效,有实验证实其可抑制细胞凋亡,诱导自噬,从而保护肾脏[39]。Wang等[40]实验研究发现,三芪口服液干预MN大鼠,可上调裂解凋亡蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)水平,增加Bax/Bcl-2比值,促进其足细胞标志蛋白的表达,抑制足细胞凋亡,其作用机制与调控Nrf2/HO-1信号通路有关。赵亚云等[41]使用三焦祛湿方干预MN小鼠,实验发现其可通过调控Nrf2/HO-1信号通路,显著上调HO-1、NQO1、Nrf2蛋白表达,降低ROS水平,抑制肾组织氧化应激,从而保护肾脏。

通过上述研究发现,三芪口服、三焦祛湿方治疗MN作用机制主要是通过抑制Nrf2/HO-1信号通路,调控相关足细胞蛋白,相关氧化应激蛋白酶,抑制氧化应激反应,降低足细胞凋亡率,达到治疗MN的目的。

5 MAPK信号通路

5.1 MAPK信号通路与MN的关系

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是一类介导细胞反应的蛋白激酶家族,广泛存在于真核细胞中,参与细胞多种生理过程,具有促进细胞生长、增殖,抑制细胞凋亡及炎症等作用[42]。MAPK信号通路主要包括c-Jun氨基末端激酶(c-Jun amino terminal kinase, JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)及ERK5这4条信号通路,其中主要通过JNK与p38MAPK 信号通路干预MN发展,涉及细胞增殖、细胞凋亡、炎症、应激等多种生理活动[43-44]。由此可见,该通路在调控MN发病过程中有着至关重要的作用。

5.2 中药基于MAPK信号通路治疗MN的机制

车前子与牛膝中所含有效化学成分槲皮素具有抗炎、抗氧化应激、免疫调节等作用[45-46]。赵宏等[47]通过网路药理学研究发现,车前子与牛膝配伍通过抑制MAPK信号通路,影响TNF、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)等炎症因子的表达及肾小球系膜细胞增生,从而达到治疗MN的作用。

复方蛇龙胶囊在肾病治疗上发挥重要作用,主要可降低尿蛋白,改善肾微循环,减轻肾脏间质病变,延缓肾小球硬化等[48]。司瑞花等[49]实验研究发现,复方蛇龙胶囊通过抑制p38MAPK 信号通路,降低TNF-α、IL-6、白细胞介素-8(interleukin-8, IL-8)等炎症因子的表达,抑制肾组织炎症反应,从而保护肾脏。

通过上述研究发现,车前子与牛膝、复方蛇龙胶囊治疗MN的作用机制主要是通过抑制MAPK信号通路,减少肾脏炎症因子的释放,抑制免疫炎症反应,从而保护肾脏,达到治疗MN的目的。

6 ERK/cPLA2信号通路

6.1 ERK/cPLA2信号通路与MN的关系

磷脂酶A2(phospholipase A2, PLA2)是一类参与细胞信号传递的超脂酶家族,其可水解磷脂sn-22位酯释放出溶血磷脂和游离脂肪酸[50]。其中胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)是其主要的亚型,当激活cPLA2时,通过释放游离的花生四烯酸,产生前列腺素和血栓素,致使膜攻击复合物(C5b-9)发挥作用,在MN发生发展中起到至关重要的作用[51]。同时C5b-9可反式激活受体型酪氨酸激酶,从而导致其ERK信号通路的激活,进而促进细胞质靶蛋白磷酸化,而其中cPLA2是其主要靶点之一,因此激活ERK信号通路也可导致cPLA2激活[52]。由此可见,此通路在MN病理发展中极具重要意义。

6.2 中药基于ERK/cPLA2信号通路治疗MN的机制

川芎嗪为中药川芎有效成分之一,是天然的四甲基吡嗪。现代研究发现川芎嗪具有抗炎症、抗氧化、抗凋亡和调节血液循环等作用[53]。李莉等[54]实验研究发现川芎嗪通过抑制ERK/cPLA2信号通路,减少IL-1β、IL-6、TNF-α等促炎因子的释放,并可降低Bax蛋白水平,增加Bcl-2 蛋白水平,抑制肾脏炎症反应及细胞凋亡,进而实现保护肾脏的作用。

膜肾方前期治疗MN未有相关机制研究,但其主要的中药黄芪与汉防己在保护肾脏方面具有较好的疗效,可调控细胞免疫功能,抑制炎症反应,从而达到保护肾脏的作用[55-56]。丁秀等[57]实验研究发现,膜肾方通过抑制ERK/cPLA2信号通路,下调p-cPLA2、p-ERK1/2蛋白表达,减轻肾脏病理损伤,降低尿蛋白,保护肾功,延缓MN进展。

通过上述研究发现,川芎嗪、膜肾方治疗MN的作用机制主要是通过抑制ERK/cPLA2信号通路,调控炎症因子、足细胞蛋白及其磷酸化蛋白表达,减轻肾脏炎症反应、足细胞损伤及肾脏病理损伤,达到治疗MN的目的。

7 mTOR信号通路

7.1 mTOR信号通路与MN的关系

mTOR是一种属于大分子蛋白的丝氨酸/苏氨酸激酶,mTOR信号通路受上游多种信号通路调控,包括生长因子信号通路、某些种类氨基酸和能量变化影响通路等[58]。mTOR是三磷酸腺苷(ATP)与氨基酸二者的感受器,是抑制细胞自噬的关键分子。该信号通路的激活会抑制足细胞自噬,与MN的发展有着密切关系。

7.2 中药基于mTOR信号通路治疗MN的机制

参芪颗粒在治疗肾脏病方面的机制目前研究较少,有相关研究证实了其可改善大鼠肾组织病变,保护肾脏[59]。Wei L等[60]实验证实参芪颗粒可调控mTOR信号通路,抑制mTOR/ULK1磷酸化水平,上调α-actinin-4和CD2相关蛋白(CD2AP)的表达,增加LC3、Beclin1自噬蛋白表达,影响细胞自噬,从而起到保护肾脏的作用。

降脂通络软胶囊广泛用于肾病合并血脂代谢异常的患者,该药具有调脂、抗肿瘤、抗炎、抗纤维化等多种药理作用。郝文霞等[61]使用降脂通络软胶囊干预MN,实验发现其可抑制mTOR信号通路,提高LC3、Beclin-1自噬蛋白水平,增加肾脏自噬细胞活性,减轻肾脏病理损伤,从而保护肾脏。

益肾通络方对于MN大鼠足细胞具有保护作用,前期研究证实其主要是通过抑制足细胞分化过程来实现,同时延缓MN大鼠肾脏纤维化,从而保护肾脏[62]。张欣欣等[63]使用C-BSA诱导MN大鼠实验,发现益肾通络方可通过调控mTOR信号通路,上调Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达,下调p62蛋白表达,影响自噬,改善肾脏病理损伤,缓解其症状及并发症,达到其治疗目的。

通过上述研究发现,参芪颗粒、降脂通络软胶囊、益肾通络方治疗MN的作用机制主要是通过抑制mTOR信号通路,调控相关自噬蛋白表达,影响自噬,减轻肾脏病理损伤,达到治疗MN的目的。

8 NF-κB信号通路

8.1 NF-κB信号通路与MN的关系

核转录因子κB(nadear transcription factor-κB,NF-κB)由5种成员组成,分别为:RelA(p65)、RelB、c-Rel、NF-κB1(p50)和NF-κB2(p52),其中p50/p65异二聚体为 NF-κB 的最主要形式。正常情况下,NF-κB与IκB相互作用,固定于细胞质,处于非活性状态。当细胞受到外界刺激时,NF-κB与IκB因其磷酸化的IκB作用而分离并转移到细胞核内,从而调节多种炎症因子的表达,加速肾脏疾病炎症反应进程[64-65]。许多研究表明,抑制NF-κB信号通路的激活对MN肾脏具有保护作用。

8.2 中药基于NF-κB信号通路治疗MN 的机制

雷公藤甲素是中药雷公藤中提取的主要活性成分之一,具有抗炎、免疫抑制等多种药理作用,在治疗各种慢性肾脏病方面具有显著疗效[66]。Wan Q等[67]使用PM2.5诱导的足细胞损伤实验,研究发现雷公藤甲素可通过抑制NF-κB信号通路,显著增加SOD水平,并降低MDA、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)水平,抑制氧化应激反应,从而上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2、Nephrin和Podocin蛋白表达,降低足细胞凋亡率,改善足细胞损伤,起到治疗MN的作用。

芪地固肾方临床治疗MN效果显著,实验研究也证实了其疗效,对MN大鼠足细胞具有保护作用,其可调控足细胞裂孔隔膜蛋白表达,延缓MN进展[68]。高海娟[69]使用芪地固肾方治疗MN大鼠,取得较为满意的疗效,芪地固肾方可降低NF-κB p65、TNF-α和IL-1β的表达,抑制IκBα的降解,减轻肾脏炎症反应,从而减轻MN大鼠的肾脏损伤。冯喆[70]实验也证明,芪地固肾方可抑制NF-κB信号通路,显著下调p-NF-κB-p65、p-IκBα、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-related dot-like protein ASC, ASC)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-bound oligomerized domain-like receptor protein 3, NLRP3)蛋白表达,改善肾脏免疫炎性反应,从而降低肾损伤,达到治疗MN的目的。

芪苓通络方临床治疗MN疗效确切,前期研究治疗MN机制尚不明确。邵建彬等[71]实验研究其治疗MN作用机制,发现其通过抑制NF-κB信号通路,下调Toll样受体4(Toll-receptors-κB4,TLR4)、NF-κB蛋白表达,并减少血清中IL-1β、IL-6炎症介质释放,抑制大鼠炎症反应,减轻肾损伤,从而保护肾脏。此外Tian R等[64]对MN大鼠使用三芪口服液进行干预,发现其可抑制NF-κB信号通路,显著降低补体C3和IgG沉积,增加Podocin和Synaptopodin蛋白表达,恢复足细胞损伤,以此治疗MN。高飞等[72]使用加味升降散也进行类似研究,实验发现其可抑制NF-κB信号通路,降低血清中IL-1β、IL-6和TNF-α炎症介质含量,下调MCP-1、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)、α-平滑肌蛋白(α-smooth muscle protein, α-SMA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasmimogen activator inhibitor-1, PAI-1)、TGF-β1等表达,改善肾组织炎症反应,抑制肾脏纤维化,进而减轻MN大鼠肾损伤。

通过上述研究发现,雷公藤甲素、芪地固肾方、芪苓通络方、三芪口服液、加味升降散治疗MN的作用机制主要是通过抑制NF-κB信号通路,调控炎症细胞因子、足细胞标志蛋白及纤维化相关蛋白表达,减轻肾脏免疫炎症反应,降低足细胞凋亡率,抑制肾脏纤维化,达到治疗MN的目的。

9 其他与足细胞凋亡相关信号通路

此外,也有其他信号通路参与MN调控,包括Notch、沉默信息调节因子2相关酶1/叉头转录因子O3(silencing information regulatory factor 2 associated enzyme 1/forked transcription factor O3, SIRT1/FoxO3)、微小RNA-29a/鼠双微体2基因(microRNA-29a/murine double minute2, miR-29a/MDM2)、葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/CCAAT-增强子结合蛋白同源蛋白(glucose-regulating protein 78/protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase/CCAAT-enhancer binding protein homologous protein, GRP78 / PERK/ CHOP)、微小RNA-514a-5p/肿瘤坏死因子超家族成员15(microRNA-514-5p/tumor necrosis factor superfamily member 15, miR-514a-5p/TNFSF15)信号通路,其信号通络的异常激活在MN足细胞的凋亡与存活具有至关重要的作用。

加味升降散、降脂通络软胶囊可抑制足细胞凋亡,减轻肾损伤,延缓MN进展。高飞[73]等实验研究证实加味升降散可调控Notch信号通路上调Bcl-2蛋白,下调发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1, Hes1)、Bax蛋白,促进足细胞Synaptopodin、Podocalyxin、Nephrin、Podocin等标志蛋白的表达,从而达到减少足细胞凋亡的目的。另赵方等[74]实验研究发现降脂通络软胶囊可调控SIRT1/FoxO3通路,上调大鼠肾组织中SIRT1表达,下调FoxO3表达,增加其Bcl-2/Bax表达,从而起到抑制足细胞凋亡的作用。

益肾通络方对MN疗效显著,其可抑制肾脏足细胞凋亡,维持其结构完整性,从而保护肾脏。毛竞宇等[75-76]通过抑制miR-29a/MDM2与miR-514a-5p/TNFSF15信号通路分别调控Bax、Bcl-2、Caspase-3、BAD、Bcl-XL以及足细胞标志蛋白的表达,从而抑制足细胞凋亡,延缓MN进展。张欣欣等[77]也使用其进行类似实验,证实其可上调Nephrin、Podocalyxin蛋白表达,下调Casepase-3蛋白表达,抑制足细胞凋亡,其主要通过调控GRP78/PERK/CHOP信号通路来实现。

通过上述研究发现,加味升降散、降脂通络软胶囊、益肾通络方治疗MN作用机制主要是通过抑制相关凋亡信号通路,调控相关靶蛋白,促进足细胞标志蛋白表达,减轻足细胞损伤,从而达到治疗MN的目的。

10 小结与展望

随着中医对MN认识的不断深化,我们根据MN临床症状将其归属为“水肿”、“尿浊”、“虚劳”等范畴。MN病理改变主要为肾小球基底膜增厚伴上皮下免疫复合物沉积。研究发现环境因素、细胞因子、相关蛋白及基因等都会引起肾脏的损伤。中医治疗MN的中药及复方等有效成分多为补益药、通利药、活血药、固涩药,有健脾益肾,利水活血等功效,其可改善肾脏循环代谢,抑制或激活信号通路从细胞凋亡、细胞自噬、炎症反应、氧化应激等方面保护肾脏。中药可通过调节多条信号通路治疗MN,如PI3K/Akt、TGF-β1/Smad、NOX4、Nrf2/HO-1、MAPK、ERK/cPLA2、mTOR、NF-κB等。通过对其信号通路的研究,使临床医师对中药治疗MN有更深入的认识。

中药治疗MN取得辉煌成就的同时也面临着各种挑战。其一,中药及复方在治疗MN上不只调控一条信号通路,同时一条信号通路也受多味中药的调控。此外不同信号通路之间存在串扰关系,但相关研究较少。其二,因地理及患者体质因素,中药配伍种类繁多,不利于探讨其作用机制,本文有许多院内制剂,还缺少大范围的临床推广数据,其方剂疗效还有待观察。其三,中药及复方服用禁忌、安全性等尚不完善,仍需大量对照实验,提高药物的安全性。总之,中药在治疗MN上有很大潜力,期待更多有价值的基础研究及临床研究,为MN的治疗提供更多的理论基础。