不同产地桑树桑黄的总黄酮量和部分金属元素含量的比较

李婉茹 何峰

摘要：本试验采用分光光度法测定了云南麻栗坡、山东夏津、西藏波密、吉林长白山、云南丽江5个产地的野生桑树桑黄和西藏波密人工养殖的桑树桑黄的总黄酮量，经测定结果表明，野生桑树桑黄的总黄酮量含量较高，其中西藏波密的野生桑树桑黄的总黄酮量含量最高，并采用电子耦合等离子体发射光谱法测定了这六个样品的部分金属元素含量，结果得到西藏波密野生桑黄的K和Zn含量较高。

关键词：桑树桑黄；总黄酮；金属元素含量

桑黄俗称桑黄菇、桑臣和桑耳，野生桑树桑黄的药用价值极高，具有抗发炎、止血、治妇女病的功效，在我国已证实的产地有西藏、四川、云南、山东、河南、吉林等地，现代医学的研究中，桑黄在治疗癌症领域的真菌中排名第一[1]，桑黄中提取的黄酮具有抗肿瘤的功效[2]，桑黄营养价值丰富[3]，具有保健的功效，被制成茶包[4]等产品，学者们关于桑树桑黄的分类属性争论不休，在近十年来对桑黄这类真菌的分类属性达成共识，认为它们是担子菌门（Basidiomycota）蘑菇纲（Agaricomycetes）锈革菌目（Hymenochaetales）锈革菌科（Hymenochaetaceae）的大型多孔菌[5]。

近年来，有学者发现中药的药效与所含微量元素及其含量比值有关。这些微量元素是有着重要的生理功能、营养作用和临床诊断意义比如Zn能参与多种酶的合成与激活，并直接参与生长发育、内分泌、免疫遗传功能，还可以参与防衰老抗癌肿[6]。现已经由实验证实，黄酮与金属元素所形成的配合物的OH-1自由基清除能力要强于黄酮，同时也表现出黄酮与金属元素之间的抗活性氧的协同作用，OH-1自由基清除能力顺序为：二价锌配合物＞三价铁配合物[7]，现有研究中对桑黄金属元素含量和黄酮含量的比较分析较少。为研究各产地的桑树桑黄是否由于地域差异存在差异，本研究比较了云南麻栗坡、山东夏津、西藏波密、吉林长白山、云南丽江5个产地的野生桑树桑黄的总黄酮量和部位金属元素含量，同时，桑黄作为一类珍贵的食药用菌，具有良好的营养价值、药用价值及保健功效，在抗菌消炎、抑制肿瘤、降血糖等方面均有重要作用[8]，为探讨种植桑黄是否与野生桑黄存在差异，选取了西藏波密养殖桑树桑黄进行比较分析，为更地开发和利用该资源提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料和试剂

1.1.1 试验材料

试验材料为2023年7～11月从各地采购，经送样检测后，利用PCR法进行测定，1—6号样品经琼脂糖跑胶鉴定均检出650 bp大小片段，根据桑树桑黄的引物对比较后，确定送检样品均为桑树桑黄。

1.1.2 试验试剂

芦丁标样（合肥博美生物科技有限责任公司），试验所需硝酸铝、醋酸钾、硝酸、高氯酸等均为优级纯。

1.2 试验方法

1.2.1 桑黄中总黄酮的提取

桑黄总黄酮量的测定采用分光光度法[9]，将材料经过粉碎后，过14目筛，混匀，称取1.000 g粉碎后的样品置于烧杯中，加入95%的乙醇约30 mL，65℃水浴加热45 min搅拌萃取黄酮，冷却后迅速过滤上清液，残渣用95%乙醇洗至无色，再用95%乙醇稀释至50 mL定容，摇匀后取5～10 mL样品置于50 mL容量瓶中使用95%乙醇定容，摇匀。

1.2.2 桑黄中总黄酮含量的测定

（1）配置浓度为100 g·L－1的硝酸铝溶液：称取17.60 g Al（NO3）3·9H2O，加水溶解后定容至

100 mL。

（2）配置浓度为9.8 g·L－1的硝酸铝溶液：称取醋酸钾9.814 g，加水溶解后定容至100 mL。

（3）标准曲线的绘制：准确称取干燥后的芦丁

50 mg，加无水乙醇定容至50 mL的容量瓶中，取芦丁标样0、1、2、3、5、7、10 mL分别置于50 mL容量瓶中；再用吸量管依次加入配置好的硝酸铝溶液1 mL，配置好的醋酸鉀溶液1 mL，15 mL 95%乙醇，加水定容后摇匀静置1 h后待测，使用分光光度计，调至波长为415 nm处，依次测定吸光度，建立标准曲线。

（4）待测样品测定：移取1.2.1中的1.0 mL，置于50 mL容量瓶中，再依次加入1 mL硝酸铝溶液、1 mL醋酸钾溶液和15 mL 95%乙醇，加水定容。使用分光光度计在415 nm处测量得到待测样品的吸光值。

（5）根据式①计算总黄酮量。

式中：

X——总黄酮含量，%；

m——由吸光度值计算出的芦丁的质量，mg；

W——样品的质量，g；

d——稀释比例。

1.2.3 桑黄金属含量的测定

金属元素含量的测定采用电感耦合等离子体发射光谱法。

（1）样品处理：使用湿法消解，使用万分位天平准确称取0.2～1 g样品于150 mL高型烧杯中，加入9.0 mL 5%硝酸和1 mL高氯酸，置于电热板上，控制电热板温度为130～150℃，待大量棕色烟消失后，加热至180℃后继续消解，当消解液变为黑色后加入少量的5%硝酸，直至冒白烟，消解液呈透明，冷却后移入25 mL容量瓶中，多次洗涤合并入容量瓶中，定容，用相同的方法做空白样。

（2）样品测定：根据仪器操作说明，配置待测元素标液后，上机测定各待测的光谱强度，再由标准曲线得到待测金属元素的含量。

（3）根据②式计算各元素的含量。

式中：

X——待测元素含量，mg/kg；

ρ——待测元素浓度，μg/mL；

ρ0——待测元素空白浓度，μg/mL；

V——待测样体积， mL；

N——试样稀释倍数；

m——试样质量，g。

1.3 主要仪器和设备

紫外可见分光光度计（TU-1810），电感耦合等离子体发射光谱仪（ICAP7000），分析天平

（ME204E）。

2 结果分析

2.1 不同产地桑黄的总黄酮量比较

由表1可知，西藏波密产的野生桑黄（编号4）总黄酮含量最高，达到918.2 mg/100 g，是这6种产地中黄酮含量最高的。山东夏津产的野生桑黄（编号5）总黄酮含量为896.5 mg/100 g，居于第二位。吉林长白山产的野生桑黄（编号3）总黄酮含量也很高，达到371.8 mg/100 g，居于第三位。云南丽江产的野生桑黄（编号6）总黄酮含量为159.1 mg/100 g，居于较低水平。云南麻栗坡（编号2）和西藏波密产的人工养殖桑黄（编号1）总黄酮含量较低，分别为37.07 mg/100 g和

60.87 mg/100 g。可以认为野生桑黄的总黄酮含量普遍高于人工养殖的桑黄，而且不同产地的野生桑黄总黄酮含量也存在差异。

2.2 不同产地桑黄的Mg、K、Ga、Fe、Zn含量比较

取样0.2～0.4 g，样品编号同表1，湿法消解后定容，经测定得到不同金属含量。各个样品的Mg含量数据见图1。样品1和样品6分别是西藏波密人工养殖桑黄和云南丽江野生桑黄，这两个样品的Mg含量较高，吉林长白山（样品3）的Mg含量最低。

各个样品的K含量数据见图2。西藏波密野生桑黄（样品4）的K含量较高，其他样品的K含量都较低。

各个样品的Ca含量数据见图3。云南麻栗坡野生桑黄（样品2）的Ca含量较高。

各个样品的Fe含量数据见图4。云南麻栗坡野生桑黄（样品2）的Fe含量较低，其余桑黄的Fe含量差距不大。

各个样品的Zn含量数据见图5。西藏波密野生桑黄（样品4）的Zn含量较高。

3 讨论

在6个样品的比价中，种植桑黄与野生桑黄相比，总黄酮含量较低，其余各产地的野生桑黄中，产地为西藏波密的野生桑黄总黄酮量最高。在几种金属元素的比价分析中，西藏波密的野生桑黄的含Zn、K量较高，云南丽江的野生桑黄含Mg量较高，云南丽江和云南麻栗坡野生桑黄的Ca含量较高，不同产地桑黄因地域差异总黄酮量和金属元素含量具有一定的差异。考虑到现有研究中认为形成黄酮与金属元素形成的配位作用的抗氧化性更强，西藏野生桑黄的药用价值相较而言更高，而针对抗氧化能力这一指标，则需要通过试验进一步进行探讨。

本研究中，选取了同为西藏波密的野生桑黄和人工养殖桑黄进行了比较，无论是总黄酮量还是金属含量上都存在较大的差异，而种植方式是否影响桑树桑黄的药用效果，种植桑黄经过改良种植条件后是否能与野生桑黄具有等同的药用价值，都是值得进一步研究的问题。

参考文献

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[2] 黄罗丹，安春艳，刘德阳，等.液体发酵桑黄总黄酮对抗肿瘤活性及细胞周期的影响[J].山东理工大学学报（自然科学版），2019，33（2）：65-68+73.

[3] 刘锦程，弓志青，杨鹏，等.桑黄营养成分、活性成分及多糖性质分析[J].食品工业科技，2023（22）：241-248.

[4] 洪文龙，谢春芹，许俊齐，等.桑黄灵芝袋泡茶制作及冲泡工艺研究[J].保鲜与加工，2022，22（4）：52-58.

[5] 吴声华，黄冠中，陈愉萍，等.桑黄的分类及开发前景[J].菌物研究，2016，14（4）：187-200+185.

[6] 李倩華，孙淑军，王洋，等.金属元素在中医药研究中的现状[J].世界科学技术-中医药现代化，2015，17（4）：901-906.

[7] 李方.黄酮类有机金属配合物及其生物构效和协同作用的研究[D].宜宾：四川大学，2004.

[8] 谢存一，周禹佳，张疏雨，等.桑黄活性成分研究及行业发展分析[J].食用菌，2023，45（3）：1-5.

[9] 王烁，蒋明蔚，李晓斌，等.蜂胶中总黄酮含量的测定[J].食品与发酵工业，2012，38（12）：152-156.