野山杏研究进展

卫丁一，戴小华*，丁 昱，何子涵，黄 磊，刘浩然，何 莹，依斯马依力·吾拉依木，阿衣古丽·艾力

（1.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.新疆草食动物新药研究与创制重点实验室，新疆乌鲁木齐 830052）

野山杏是一种重要的果树，主要分布在喜马拉雅山西北部的干燥温带地区[1]，巴基斯坦、俾路支地区和克什米尔因野山杏种植面积大而闻名[2]。另外，俄罗斯的西伯利亚，蒙古东部、东南部以及我国内蒙古、辽宁、北京、山西、黑龙江、吉林、新疆等地区也有分布[3]。野山杏是蔷薇科（Rosaceae）李属（Prunus）落叶乔木，高6~10 m；树冠圆形、扁圆形或长圆形；树皮灰褐色，纵裂；枝条坚固、曲折，小枝无毛。多年生枝浅褐色，皮孔大而横生，一年生枝浅红褐色，有光泽，无毛，具多数小皮孔；叶片宽卵形或圆卵形，长5~9 cm，宽4~8 cm，突尖，深绿色，无毛或具腋毛，均匀排列有圆形齿；茎长达2.5 cm。野山杏不仅是一种优良的水土保持经济植物，也是为嫁接仁用杏和优质肉用杏提供理想砧木的最佳选择[4]。野山杏的杏仁有一定的毒素，使用时要进行解毒处理[5]。国内对野山杏的报道多集中在抗炎、镇痛、调节血脂、抗氧化等药效的研究方面；国外的研究则主要集中在杏仁的食用价值、工业用途及其分子构象、基因型变异等方面。

1 野山杏的成分及功效

野山杏中含有丰富的氨基酸、膳食纤维[6]、黄酮类化合物[7]、有机酸[8]。由于野山杏果肉高酸和低糖，所以不适合食用[1]。野山杏所含药用成分主要有膳食纤维、总有机酸、总黄酮、杏仁蛋白、杏仁油等；各成分发挥的药理作用主要有抗炎、镇痛、调节血脂、抗氧化等。

1.1 膳食纤维

膳食纤维通常根据其溶解性分为可溶性膳食纤维（SDF）和不溶解膳食纤维（IDF）。已有研究证实IDF 对炎症综合征和肥胖有一定的缓解作用。尼格尔热依等[9]研究发现，野山杏果肉IDF 能够显著改善和调节实验大鼠的血脂，这种作用与其对肠道菌群的调节和影响肠道代谢物中短链脂肪酸的含量有关。彭禛菲[10]研究表明，野山杏果肉中IDF 和SDF 均对肠道菌群体外生长呈现出良好的作用效果，有益于肠道菌群发挥其调节免疫和代谢等作用，其中IDF 发挥的作用更突出。阿依姑丽等[11]研究还发现野山杏IDF 对高脂血症大鼠血脂代谢和肝脏保护有显著影响，可明显地降低血脂并保护肝脏，其效果呈现一定的量效关系。

1.2 总有机酸

有机酸是指一些具有酸性的有机化合物，广泛分布于植物的叶、根，特别是果实中。李珊等[8]发现，野山杏果肉总有机酸（TOAWA）成分中草酸、酒石酸、乙酸、富马酸的含量相对较低，而奎宁酸、苹果酸、柠檬酸的含量较高，其中柠檬酸和奎宁酸是导致野山杏果肉呈酸涩口感的主要原因。野山杏果肉TOAWA 的报道多见于对抗氧化能力和血脂水平影响的研究。阿依姑丽等[12]发现，野山杏TOAWA 对超氧阴离子自由基（DPPH）有较好的清除作用，当质量浓度为2、4、8 mg/mL 时，清除率均高于49%；在质量浓度为8 mg/mL 时，清除率达到97%。阿依姑丽等[13]还研究了野山杏TOAWA 对卵黄脂蛋白过不饱和脂肪酸（PUFA）对过氧化体系中脂质过氧化活性和小鼠脂质过氧化活性的影响，发现野山杏TOAWA 显示了较强的体外抗脂质过氧化活性。有报道称[14-16]，野山杏果肉TOAWA 通过调节血清载脂蛋白（Apo）质量浓度、提高肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPAR-α）和低密度脂蛋白受体（LDL-R）基因表达量以及改善肝脏功能来实现调节血脂水平、提高抗氧化活性、保肝等作用。李珊等[17]发现，野山杏TOAWA 可能通过提升高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）浓度和机体抗氧化酶类活性、降低血清中血脂水平从而降血脂并保护机体细胞不被自由基损伤。

1.3 总黄酮

黄酮类化合物是一类广泛存在于蔬菜水果、中草药、豆类及豆制品的多酚类代谢产物，目前已发现黄酮类化合物多达9 000 余种。植物黄酮具有抗氧化、抗菌、抗病毒以及抗肿瘤等生物活性功能[18]。Dulf 等[19]研究表明，野山杏经过固体发酵后的甲醇提取物具有清除自由基的能力，经测定芦丁和槲皮素为该发酵产物的主要黄酮类物质。郭元印等[20]发现，不同剂量的野山杏总黄酮可显著改善三黄肉鸡的屠宰性能，包括宰前体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、皮下脂肪厚度、肌间脂肪宽度、腹脂重、胸肌重、腿肌重。谷虹霏等[21]发现，野山杏总黄酮在使用醋酸扭体法、热板致痛法、温浴甩尾法建立的小鼠疼痛模型当中，均有明显的镇痛作用。阿依姑丽等[22]通过研究野山杏总黄酮对高血脂大鼠的降血脂作用和抑制肝脏脂质过氧化的能力，发现野山杏总黄酮可降低高血脂大鼠的血脂，减少肝脏损伤，抑制肝脏脂质过氧化过程，并且具有剂量依赖性。束佳敏[23]通过建立脂多糖（LPS）诱导三黄鸡雏鸡炎症模型，对比不同剂量野山杏总黄酮对雏鸡抗炎效果以及对宿主肠道菌群的影响，发现野山杏总黄酮具有良好的抗炎效果并可改善雏鸡肠道菌群的结构和功能。

1.4 杏仁蛋白

杏仁蛋白质中氨基酸含量丰富，苦杏仁中蛋白质含量为19.6%~25.7%[24]。Beenu 等[25]研究证明，野山杏杏仁经过脱毒处理后减少了其中的抗营养素，显著提高了营养质量，因此脱毒的杏仁粉可以作为一种优质且经济的蛋白质补充品用于制作高附加值的杏仁蛋白产品。蒋丽等[26]通过测定衰老小鼠血清、肝组织以及脑组织匀浆中的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量，研究野山杏多肽各剂量组对衰老模型小鼠的体内抗氧化作用，发现野山杏杏仁多肽对衰老小鼠具有良好的体内抗氧化作用。田丝雨等[27]分析比较不同浓度野山杏杏仁多肽对自由基的清除能力，发现野山杏杏仁多肽表现出良好的清除自由基的能力，尤其是在清除DPPH 自由基方面，其清除率高达75.48%，展现了野山杏杏仁多肽较强的抗氧化能力。

1.5 杏仁油

杏仁出油率高达45.8%，是食品工业、化妆品工业、医药工业的主要原料[28]。野山杏杏仁油作为一种绿色能源，也是新型而高效的生物柴油潜在来源[29]。生物柴油和传统柴油相比，生物柴油具有包括十六烷值高、无毒、可生物降解、高闪点、低温下发动机启动性能良好等多种优势。Ashok 等[30]使用单级碱催化酯交换法将野山杏杏仁生产为山杏甲酯（PAME），作为化石燃料的替代品用于柴油发动机，并且无需对发动机进行任何重大修改。Nabi 等[31]测得野山杏杏仁的含油率为38%~55.3%，油酸是其中的关键脂肪酸，占比60.01%~70.56%。Etminan 等[32]研究发现，野山杏杏仁油制备的纳米乳可以抑制A549 癌细胞的生长和增殖，减少癌细胞诱导的细胞凋亡，并减少对血管生成的影响，故有可能用于癌症治疗。郝文杰[33]发现，野山杏杏仁油清除DPPH 自由基、羟自由基、超氧自由基和还原力均具有剂量依赖性，并且随浓度的增加，清除自由基能力随之增强。姚健等[34]发现，高中低剂量的野山杏杏仁油均对高血脂大鼠模型具有辅助降血脂的作用。

2 野山杏有效成分的提取纯化和测定

野山杏各类成分的提取方式多样，一般采用酶处理、酸碱处理等方式；纯化工艺主要是大孔树脂吸附法；测定方法多使用高效液相色谱法（HPLC）。

2.1 膳食纤维

野山杏果肉膳食纤维的主要提取方法包括酸处理法、碱处理法以及酸碱共处理法。张继等[35]采用碱处理法，碱溶液用量11 mL/g 果肉，处理温度30℃，处理时间60 min，获得的膳食纤维的纯度为82.60%，溶胀性为8 mL/g。阿依姑丽[36]用4 种方法对野山杏果肉膳食纤维进行了提取，其中酸碱共处理法相比单用酸或单用碱提取的膳食纤维得率稍低，但纯度较高，质量较好，酶法处理后的膳食纤维较化学法提取的膳食纤维品质更高。

2.2 总有机酸

有机酸的传统提取方式主要有回流提取法、水蒸气蒸馏法、连续回流渗漉法，随着科技的进步和学科之间的交互发展，一些新的提取方式逐渐被广泛应用，如超声提取技术、超临界流体萃取技术、微波辅助提取法等。李珊[37]对野山杏果肉TOAWA 提取工艺进行研究，得出最佳提取工艺是采用50%~60%的乙醇超声提取，具体操作方式为使用50%乙醇，进行2 次1∶10 的回流提取，浓缩回收乙醇；使用717 型交换树脂，洗脱得到洗脱液并浓缩，用正丁醇萃取得到正丁醇相并回收，最终干燥得到TOAWA 纯品。有机酸的测定方式主要有酸碱滴定法、毛细管电泳法、高效液相色谱法，其中以高效液相色谱法最为普遍。在野山杏TOAWA 的测定中，Hasib 等[38]使用高效液相色谱法测定山杏中有机酸的含量，主要的有机酸是柠檬酸，其次是半乳糖醛酸、苹果酸、奎宁酸和酒石酸，草酸、莽草酸和富马酸则含量较少；李珊等[8]测定了野山杏中10 种有机酸的含量，奎宁酸、苹果酸、柠檬酸含量偏高，草酸、酒石酸、乙酸、富马酸含量较低。

2.3 总黄酮

黄酮类化合物的提取和纯化技术主要包括溶剂萃取法、大孔树脂吸附法和离心分离法等。金科旭等[39]采用D101 大孔吸附树脂对野山杏总黄酮进行了分离，其最佳分离纯化工艺是：D-101 大孔树脂直径高比为1∶6，野山杏粗提液最大加样量为6.3 BV，最佳加样浓度0.3 mg/mL，加样速率为1.0 mL/min，静置时间为2 h，水洗体积为5 BV，水洗液洗脱流速为1.5 mL/min，洗脱溶剂为80%乙醇，洗脱溶剂用量为2 BV，洗脱剂流速为0.5 mL/min。

2.4 杏仁蛋白

常用的植物蛋白提取方式包括：碱溶酸沉法、酶解法、反胶束法、盐溶提取法、膜分离法等。温程程[40]采用超声波辅助碱溶酸沉法提取杏仁蛋白的最佳的工艺条件为pH 8.7、料液比为1.5 g/mL、超声提取时间是46 min、超声温度33℃，产率为85.80%。李大文[41]用超声波辅助盐溶法对杏仁蛋白的提取工艺进行优化，优化后的最佳工艺为NaCl 浓度3%、料液比50∶1 g/mL、超声时间30 min、温度50℃、固定在超声波功率400 W，提取次数为2 次，所得产率为79.60%。

2.5 杏仁多肽

生物活性肽的制备方式主要是酶解法、微生物发酵法、化学合成法、化学水解法、基因重组法等。部分学者[42-44]已经对杏仁多肽的酶解工艺进行了探索，而蒋丽等[26]用酶解法获得的杏仁多肽水解度最高，该法提取野山杏杏仁多肽的最佳工艺为：酶底物比为4%，酶解时间120 min，pH 8，酶解温度为65℃。用酶解法提取生物活性肽所含杂质较多，还可以通过膜分离法、大孔树脂吸附法、色谱法、毛细管电泳法进一步纯化[45]。

2.6 杏仁油的提取

杏仁油的提取方法主要有冷榨法、热榨法、有机溶剂浸提法、超临界CO2萃取法和超声波提取法等。赵云霞[46]和郝文杰[33]均采用冷榨法对杏仁油进行了提取，但后者提取得率较高。有机溶剂浸提法中，有文献[47]报道，乙醇水剂法提取野山杏杏仁油的最佳提取工艺是：乙醇浓度18%，料液比1∶7 g/mL，温度34℃，搅拌转速120 r/min，提取时间120 min；在此条件下，油脂提取率为28.34%，亚油酸和油酸含量分别为23.72%、66.47%。王巨成[48]、范翠丽等[49]均采用超临界CO2萃取法提取了杏仁油，但产率不超过50%，而郝文杰[33]用相同方法提取了野山杏杏仁油，其得率可以达到81.57%。

3 野山杏种植工艺

3.1 生长特性

野山杏具有较强的保水能力[50]，喜光照、高温，耐旱、耐寒，很适宜在缺水、土层较薄的荒坡地带种植，对土壤要求不高，属暖温带树种[51]。

3.2 花期

花期是当花的各部分发育成熟时，从花朵开放，雌、雄蕊从花被中暴露出来，至完成传粉和受精作用，花朵凋谢的一段时期。野山杏一般在每年秋季10 月底播种，花芽一般在翌年3 月下旬开始萌动，4 月上旬或中旬进入初花期，始花至落花持续时间6~9 d，整个过程需26~31 d[52]。

3.3 种植工艺

野山杏秋季播种造林时间应安排在入冬封冻之前。播种前，种子用杀虫剂及杀菌剂消毒，一般用敌杀死、甲拌磷（3911）和甲基硫菌灵拌种，1 kg 药剂可拌150~200 kg种子，播种后，造林地要撒防鼠害药剂，以保证出苗率[53]。据张鑫[52]研究，不同浓度多效唑（PP333）、矮壮素（CCC）处理均可显著提高野山杏果实可溶性固形物含量，不同浓度果树促控剂（PBO）和摘心处理均能使野山杏果实平均单果重较不进行处理组明显增加。在培育选种时，还原糖、树干周长、树种空间多样性、果重、果核宽度、非还原糖、叶面积、果核重量、果核长度和糖酸比等几个性状和最终果实产量呈正相关关系[54]，可以将这些性状作为野山杏品种改良的选择指标。

4 展望

综上所述，野山杏的有效成分有膳食纤维、总有机酸、总黄酮和杏仁中的杏仁蛋白、杏仁油，其药效主要体现在抗炎、降血脂、调节肠道菌群、保肝、抗氧化、改善肉鸡屠宰性能、镇痛、抗癌等方面。野山杏成分的提取方法主要有化学提取法、酶解法、超声波辅助提取法、冷榨法、有机溶剂浸提法、超临界CO2萃取法；一般采用大孔树脂吸附法对有效成分进行分离纯化；常用HPLC 对野山杏成分进行测定。国内外缺少使用高新科技、附加值较高的绿色野山杏加工产品，推测其原因可能是野山杏食用、药用相关研究欠缺，对其生理功效的报道主要局限在国内研究，野山杏成分发挥功效的机制和同一成分对不同种属动物之间药效的区别还有待进一步探究。野山杏种植技术的报道仍局限在十几年以前，近年来少有对种植技术改良和培育新品种的研究，野山杏的优良性状选择培育仍有开发的潜力。新疆哈密苇子峡有不少85 岁以上的老人身体非常健康，该地区的人们也很少患肺结核病，这可能与长期食用野山杏有关。野山杏作为新疆特色林果业资源之一，对带动地方经济的发展具有十分重要的意义，故可在探明新疆野山杏果实有效成分药用机制的基础上对野山杏相关食用、药用产品进行开发。