慢性心力衰竭病人血清miR-487b表达水平及其与心肌重构的关系

潘立栋 吕强 王飞飞 韩震海 王兰

摘要 目的：分析慢性心力衰竭病人血清微小核糖核酸-487b（miR-487b）表達水平及其与心肌重构的关系。方法：选取2019年10月—2021年10月西安高新医院收治的96例慢性心力衰竭病人作为研究组，按照纽约心脏病协会心功能分级将病人分为Ⅰ级或Ⅱ级22例，Ⅲ级41例，Ⅳ级33例；另选取同期在同一所医院体检的健康者102名作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测所有研究对象血清miR-487b表达水平。比较研究组与对照组血清miR-487b表达水平及研究组不同心功能分级病人血清miR-487b表达水平。采用Pearson法分析慢性心力衰竭病人血清miR-487b表达水平与心肌重构指标［包括左室重构指数（LVRI）、左室舒张末期内径（LVEDD）、左心房内径（LAD）、左室质量指数（LVMI）、左室后壁厚度（LVPW）］的关系。结果：研究组血清miR-487b表达水平低于对照组（P＜0.001）；研究组LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于对照组（P＜0.001），LVRI低于对照组（P＜0.001）。研究组心功能Ⅳ级病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ级或Ⅱ级、Ⅲ级病人（P＜0.05），miR-487b表达水平、LVRI均低于Ⅰ级或Ⅱ级、Ⅲ级病人（P＜0.05）；Ⅲ级病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ级或Ⅱ级病人（P＜0.05），miR-487b表达水平、LVRI均低于Ⅰ级或Ⅱ级病人（P＜0.05）。Pearson相关分析结果显示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b与LAD、LVMI、LVPW均呈负相关（r值分别为－0.578、－0.502、－0.514，P＜0.001），与LVRI呈正相关（r＝0.464，P＜0.001）。结论：慢性心力衰竭病人血清miR-487b表达水平降低，且与心肌重构密切相关。

关键词 慢性心力衰竭；微小核糖核酸-487b；心肌重构；心功能指标；心功能分级

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.05.004

Serum miR-487b Expression in Patients with Chronic Heart Failure and Its Relationship with Myocardial Remodeling

PAN Lidong， LYU Qiang， WANG Feifei， HAN Zhenhai， WANG Lan

Xi′an Gaoxin Hospital， Xi′an 710000， Shaanxi， China

Corresponding Author HAN Zhenhai， E-mail： sea95527@sina.com

Abstract Objective：To investigate the serum microRNAs 487b（miR-487b） expression in patients with chronic heart failure and its relationship with myocardial remodeling.Methods：Ninety-six patients with chronic heart failure were selected as the study group.According to the heart function classification of New York Heart Association，the patients were divided into grade Ⅰ or Ⅱ（22 cases），grade Ⅲ（41 cases） and grade Ⅳ（33 cases），while 102 healthy individuals were selected as the control group.The serum miR-487b expression was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction（qRT-PCR）.The serum miR-487b expression were compared between the study group and the control group，and the serum miR-487b expression in patients with different cardiac function grades was compared.Pearson method was used to analyze the relationship between serum miR-487b expression level and myocardial remodeling indexes，including left ventricular remodeling index（LVRI），left ventricular end-diastolic diameter（LVEDD），left atrial diameter（LAD），left ventricular mass index（LVMI），and left ventricular posterior wall thickness（LVPW） in patients with chronic heart failure.Results：The serum miR-487b expression in the study group was lower than that in the control group（P＜0.001）.The LVEDD，LAD，LVMI and LVPW of the study group were higher than those of the control group（P＜0.001），and the LVRI of the study group was lower than that of the control group（P＜0.001）.In the study group，LVEDD，LAD，LVMI and LVPW of grade Ⅳ patients were higher than those of grade Ⅰ or Ⅱ and grade Ⅲ（P＜0.05），and the serum miR-487b expression and LVRI were lower than those of grade Ⅰ or Ⅱ and grade Ⅲ（P＜0.05）.The LVEDD，LAD，LVMI and LVPW of grade Ⅲ patients were higher than those of grade Ⅰ or Ⅱ（P＜0.05），and the serum miR-487b expression and LVRI were lower than those of grade Ⅰ or Ⅱ（P＜0.05）.The results of Pearson analysis showed that serum miR-487b was negatively correlated with LAD，LVMI and LVPW（r values were －0.578，－0.502 and －0.514，P＜0.001） and positively correlated with LVRI（r＝0.464，P＜0.001） in patients with chronic heart failure.Conclusion：The serum miR-487b expression were decreased in patients with chronic heart failure and it was closely associated with myocardial remodeling.

Keywords chronic heart failure; microRNA-487b; myocardial remodeling; cardiac function indexes; cardiac function classification

基金项目 西安市科技计划项目［No.20YXJ003（2）］

作者单位 1.西安高新医院（西安  710000）；2.西安市第一医院

通讯作者 韩震海，E-mail：sea95527@sina.com

引用信息 潘立栋，吕强，王飞飞，等.慢性心力衰竭病人血清miR-487b表达水平及其与心肌重构的关系［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2024，22（5）：795-798.

慢性心力衰竭是由于各种器质性或功能性心脏疾病造成心室充盈、射血能力下降的一种临床综合征，严重影响病人日常生活和健康安全［1-2］。有研究显示，心肌重构是贯穿于慢性心力衰竭发展中的病理生理过程，抑制心肌重构是早期治疗慢性心力衰竭的关键措施［3］。微小核糖核酸（miRNA）是细胞生长、分化、凋亡等过程的重要调节因子，在心血管疾病发生发展中发挥着重要作用，参与心肌细胞凋亡、心肌重构等病理生理过程［4-6］。Welten等［7］研究报道，缺血后抑制miR-487b表达可促进侧支动脉直径增加和毛细血管生成，有助于心血管事件后血流恢复。刘一等［8］研究指出，慢性心力衰竭病人和大鼠血清miR-487b表达均下降，miR-487b可抑制心肌纤维化，发挥保护心脏的作用，推测血清miR-487b可能与慢性心力衰竭病人心肌重构的发生发展有关。本研究通过分析慢性心力衰竭病人血清miR-487b表达水平变化，探讨其与心肌重构的关系，旨在为慢性心力衰竭病人的治疗提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

经医院伦理委员会审批后，选取2019年10月—2021年10月西安高新医院收治的96例慢性心力衰竭病人作为研究组。纳入标准：符合《慢性心力衰竭基层诊疗指南》［9］中相关标准，确诊为慢性心力衰竭；病程＞6个月；所有病人均签署知情同意书。排除标准：合并急慢性感染、恶性肿瘤；合并心脏瓣膜病、肺动脉栓塞；近期接受介入术治疗；近期发生急性心肌梗死、不稳定型心绞痛；肝、肾等重要器官功能不全。研究组96例，男55例，女41例；年龄45～76（64.42±8.12）岁；体质指数22.45～27.76（25.14±1.56）kg/m2；原发疾病类型：冠心病23例，高血压性心脏病30例，糖尿病性心肌病24例，缺血性心脏病19例。根据心功能分级分为Ⅰ级或Ⅱ级22例，Ⅲ级41例，Ⅳ级33例。另选取同期在同一所医院体检的健康者102名作为对照组，男57名，女45名；年龄46～78（64.71±8.26）岁；体质指数21.37～27.42（24.84±1.43）kg/m2。对照组与研究组性别、年龄、体质指数比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

病情严重程度分级标准［10］：按照纽约心脏病协会心功能分级，Ⅰ级为日常活动不受限制，无心力衰竭症状；Ⅱ级为日常活动稍受限制，出现轻度乏力、呼吸困难等症状，休息后可缓解；Ⅲ级为日常活动明显受限，轻度活动即出现乏力、呼吸困難等症状；Ⅳ级休息时出现上述心力衰竭症状，无法进行任何体力活动。

1.2 方法

1.2.1 血清miR-487b检测方法

采集研究组与对照组空腹外周血5 mL，置于无菌抗凝管中，在4 h内将血液样本置入150C型低速离心机（购自北京白洋医疗器械有限公司），以4 000 r/min离心5 min分离血清，取上清液后，统一置于－80 ℃冰箱中保存待测。采用RNA提取试剂盒（购自上海晶抗生物工程有限公司）和TRIzol裂解抽提法提取总RNA，鉴定纯度和完整性后采用Fermentas逆转录试剂盒（购自上海晶抗生物工程有限公司）进行逆转录，反应条件：15 ℃ 30 min，45 ℃ 30 min，86 ℃ 5 min。使用荧光定量PCR仪（购自南京贝登电子商务有限公司）进行实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR），miR-487b正向引物序列为5′-TGCGGAATCGTACAGGGTCATCCA-3′，反向引物序列为5′-CCAGTGCAGGGTCCCAGGT-3′；内参U6正向引物序列为5′-GCGCGTCGTGAAGCGTTC-3′，反向引物序列为5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′；反应条件：95 ℃ 5 min，90 ℃ 20 s，60 ℃ 40 s，72 ℃ 25 s，共40个循环，应用2－△△Ct法计算miR-487b表达水平。记录并比较研究组与对照组血清miR-487b表达水平及不同心功能分级病人血清miR-487b表达水平。

1.2.2 心肌重构指标检查

采用飞利浦EPIQ 5超声诊断仪对研究组和对照组行超声心动图检查，测定左室重构指数（LVRI）、左室舒张末期内径（LVEDD）、左心房内径（LAD）、左室质量指数（LVMI）、左室后壁厚度（LVPW）。记录并比较研究组不同心功能分级病人心肌重构指标。

1.3 观察指标

比较研究组与对照组血清miR-487b表达水平、心肌重构指标及不同心功能分级病人血清miR-487b水平及心肌重构指标变化；采用Pearson相关性分析血清miR-487b水平与慢性心力衰竭病人心肌重构的关系，记录相关系数（r）值。

1.4 统计学处理

采用SPSS 26.0软件进行数据分析，符合正态分布的定量资料以均数±标准差（x±s）表示，多样本比较采用单因素方差分析和SNK-q检验；定性资料以例数、百分比（%）表示，采用χ2检验。采用Pearson相关性分析慢性心力衰竭病人血清miR-487b水平与心肌重构的关系。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 研究组与对照组血清miR-487b表达水平

研究组血清miR-487b表达水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.001）。详见表1。

2.2 研究组与对照组心肌重构指标比较

研究组LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于对照组（P＜0.001），LVRI低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.001）。详见表2。

2.3 不同心功能分级病人血清miR-487b水平及心肌重构指标比较

不同心功能分级病人血清miR-487b、LVRI、LVEDD、LAD、LVMI、LVPW比较，差异有统计学意义（P＜0.001）。Ⅳ级病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ级或Ⅱ级、Ⅲ级（P＜0.05），miR-487b、LVRI低于Ⅰ级或Ⅱ级、Ⅲ级（P＜0.05）；Ⅲ级病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ级或Ⅱ级（P＜0.05），miR-487b、LVRI低于Ⅰ级或Ⅱ级（P＜0.05）。详见表3。

2.4 慢性心力衰竭病人血清miR-487b水平與心肌重构的相关性

Pearson分析结果显示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b与LAD、LVMI、LVPW均呈负相关（P＜0.001），与LVRI呈正相关（P＜0.001）。详见表4。

3 讨 论

随着我国人口老龄化的加剧，冠心病等心脏疾病发病率呈明显上升趋势，慢性心力衰竭病人数量日益增加，流行病学调查显示，2021年该病在我国的发病率约为0.9%［11］。慢性心力衰竭发生发展的重要机制是心肌重构，心肌收缩能力下降，能量供应无法满足机体的需求，引起心肌组织发生改变，最终导致心力衰竭的发生发展［12］。miRNA作为转录后基因表达的关键调节因子，参与多种病理过程［13］，但关于血清miR-487b与心肌重构的具体关系仍需进一步研究明确。

本研究结果显示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b表达低于对照组，且miR-487b水平随着病人心功能分级程度加重而降低，提示血清miR-487b表达与慢性心力衰竭发生发展相关。miRNA是具有调节功能的非编码RNA，其中miR-487b由14q32.31基因编码，除在细胞分化、凋亡中发挥作用，还可通过多种信号通路调控心肌细胞的生理功能［14］。Kaur等［15］研究报道，在心血管生物学中包括miR-487a在内的多种miRNA调节和控制各种生物过程，包括心脏的发育、心脏功能的维持，与多种心血管疾病有关。有研究显示，miR-487b通过抑制白细胞介素-33/生长抑素2信号通路，减少慢性心力衰竭大鼠模型细胞凋亡、纤维化，在慢性心力衰竭大鼠模型中表达显著减少［16］，说明miR-487b与心肌细胞病变相关。本研究结果还显示，研究组LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于对照组，且随着病人心功能分级程度加重而增加；LVRI低于对照组，且随着病人心功能分级程度加重而减小，提示心肌重构情况与慢性心力衰竭发展程度相关。心肌重构是由一系列复杂的细胞机制造成心肌结构、功能变化，临床多见心室容量增加、心室形状改变、横径增加等，心功能损伤越重，心肌重构程度越严重［17］。心肌重构贯穿慢性心力衰竭发展的全过程，心血管疾病初期，由于心功能受损，为维持正常器官血液灌注，发生心肌重构，随着病情持续发展，造成心室扩张，形成恶性循环，最终加重慢性心力衰竭甚至死亡［18］。LVRI、LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均为临床评价心肌重构的常用指标，高敏等［19］研究显示，慢性心力衰竭病人LVEDD、LVMI、LVPW均高于健康者，且随心功能分级程度加重而升高；LVRI低于健康者，且随心功能分级程度加重而降低，进一步说明心肌重构程度与慢性心力衰竭病情发展密切相关。本研究Pearson分析结果显示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b与LAD、LVMI、LVPW均呈负相关，与LVRI呈正相关，提示miR-487b与心肌重构有关。LVRI、LVMI、LVPW等指标可反映心肌重构的整体情况，其中LVEDD、LVPW越大提示心室壁增厚、心脏变形能力下降，心肌重构越严重。miR-487b在多种心血管疾病中发挥着重要作用，且与病人预后相关。裴颖皓等［20］研究显示，血清miR-487参与急性心肌梗死后心肌细胞纤维化的病变过程。Wang等［21］研究显示，上调血清miR-487b水平，心肌细胞超氧化物歧化酶水平上升，可减少氧化反应，保护心肌细胞凋亡和纤维化，改善心力衰竭病人心脏功能，其水平可一定程度反映慢性心力衰竭病人心肌重构程度。由此可见，miR-487b可能通过调控心肌细胞的增殖和凋亡，影响慢性心力衰竭病人心肌重构。

综上所述，慢性心力衰竭病人血清miR-487b和心肌重构指标较健康人群均异常变化，且与LVRI、LAD、LVMI、LVPW指标密切相关，对临床评估慢性心力衰竭病情和心肌重构有一定的指导意义。

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（收稿日期：2023-03-23）

（本文编辑薛妮）