海洋真菌Penicillium sp.HD-1-1 次级代谢产物研究

王 聪，王玉妃，徐 辉，许 睿，兰建洲，孔凡栋，周丽曼

广西民族大学化学化工学院，林产化学与工程国家民委重点实验室，广西林产化学与工程重点实验室，广西林产化学与工程协同创新中心，广西高校少数民族医药古方挖掘与开发重点实验室，广西 南宁 530006

海洋真菌具备特殊的生态环境（高盐、高压、寡营养等）、强大的基因簇，复杂的遗传背景决定了其在次生代谢产物方面具有高产率的优势，以及具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤等生物功能多样性[1-4]，是探索新型生物活性海洋天然产物（MNPs）的重要源泉[5-6]。

自1893 年Bartolomeo Gosio 首次报道霉酚酸（mycophenolic acid，MPA）以来，MPA 及其衍生物因其广泛的生物活性包括抗炎、抗真菌、抗病毒、免疫抑制等受到广泛关注。当前临床实践中，最常用的2 种MPA 衍生物是霉酚酸酯（mycophenolate mofetil，MMF）[7]以及霉酚酸钠（mycophenolate sodium，MPS）。MPA 的特点是经胃肠道吸收很差，而MMF 的酯化反应显著提高了其生物利用率，在预防器官移植排异领域做出了重要贡献[8]，但易导致消化疾病、血液疾病、癌症和神经系统疾病等。这些毒副作用以及MPA 在体内的葡萄糖醛酸化作用限制了MPA 类化合物的临床应用。因此，MPA衍生物的研究和开发成为当前药物研究的热点，寻找更加有效且低毒的MPA 类似物作为潜在的药物候选物成为研究人员关注的重点领域。海洋微生物在高盐、高压、低温、寡营养的环境下产生有别于陆生微生物的独特生理代谢途径，进而更有可能产生结构新颖、活性独特的次级代谢产物，为霉酚酸衍生物类药物研究和开发带来新的机遇。Chen 等[9]从南海深海沉积物来源的细小青霉次级代谢产物中分离得到3 种新的霉酚酸类似物，Zhang 等[10]从珊瑚来源的Penicilliumbialowiezense次级代谢产物中分离得到5 种具有良好免疫抑制活性的新的霉酚酸类似物，显示了海洋天然产物在霉酚酸类似物研究方面的潜在价值。

涠洲岛地处热带和亚热带交界处，是独特的火山兼海洋地貌，具有十分丰富的微生物类群，是有待开发的微生物资源宝库[11]。本研究从广西涠洲岛火山口来源的团扇藻样品中分离得到一株青霉Penicilliumsp.HD-1-1，通过液态培养从发酵物中分离鉴定了1 个新的霉酚酸类化合物（1）和16 种已知的化合物，分别为霉酚酸（mycophenolic acid，2）、甲基麦考酚酸（methyl mycophenolic acid，3）、6-(5-甲氧羰基-3-甲基戊-2-烯)-3,7-二羟基-5-甲氧基-4-甲基苯酚-1-酮 [6-(5-methoxycarbonyl-3-methylpent-2-enyl)-3,7-dihydroxy-5-methoxy-4-methylphthalan-1-one，4]、6-(5-羧基-3-甲基戊-2-烯)-3,7-二羟基-5-甲氧基-4-甲基苯酚-1-酮 [6-(5-carboxy-3-methylpent-2-enyl)-3,7-dihydroxy-5-methoxy-4-methylphthalan-1-one，5]、7-羟基-5-甲氧基-4-甲基-6-(3-甲基-4-氧代戊基)-二氢异苯并呋喃-l-酮 [7-hydroxy-5-methoxy-4- methyl-6-(3-methyl-4-oxopentyl)-phthalan-l-one，6]、6-(3-羧基丁酯)-7-羟基-5-甲氧基-4-甲基苯酞-1-酮[6-(3-carboxybutyl)-7-hydroxy-5-methoxy-4-methylphthalan-1-one，7]、breynivosamide A（8）、伞形香青酰胺（anabellamide，9）、N-(N'-苯甲酰基-S*-苯丙氨酰基)-S*-苯丙氨醇苯甲酸酯[N(N'-benzoyl-S*-phenylalaninyl)-S*-phenylalaninol benzoate，10]、(3S,6R)-6-(对-羟苯基)-1,4-二甲基-3,6-二甲硫基哌嗪-2,5-二酮 [(3S,6R)-6-(p-hydroxybenzyl)-1,4-dimethyl-3,6-bis(methylthio)piperazine-2,5-dione，11]、(3R,6R)-6-(对-羟苯基)-1,4-二甲基-3,6-二甲硫基哌嗪-2,5-二酮[(3R,6R)-6-(p-hydroxybenzyl)-1,4-dimethyl-3,6-bis(methylthio)piperazine-2,5-dione，12]、(+)-新海胆灵A [(+)-neoechinulin A，13]、(3R,8S)-5,7-二羟基-3-(1-羟乙基)苯酚 [(3R,8S)-5,7-dihydroxy-3-(1-hydroxyethyl)phthalide，14]、5,7-二甲氧基-4-甲基异苯并呋喃-1(3H)-酮 [5,7-dimethoxy-4-methylisobenzofuran-1(3H)-one，15]、saccharonol A（16）、6,8-二羟基-3-羟甲基异香豆素（6,8-dihydroxy-3-hydroxy-methylisocoumarin，17）。其结构见图1。通过CCK-8 法测试化合物对5 种肿瘤细胞（人非小细胞肺癌A549 细胞、人非小细胞肺癌NCI-H1581 细胞、人乳腺癌MCF7 细胞、人胃癌AGS 细胞、人结直肠癌HT29细胞）的细胞毒活性。结果显示，化合物2 和3 对于AGS 细胞显示出强细胞毒活性，半数抑制浓度（median inhibition concentration，IC50）值分别为0.69、1.12 µmol/L。此外，化合物2 对NCI-H1581细胞显示出一定的抑制活性，其IC50值为17.95µmol/L，化合物3 对HT29 细胞显示出中等抑制活性，其IC50值为19.30 µmol/L，丰富了霉酚酸衍生物作为海洋微生物来源天然产物的基础研究。

图1 化合物1～17 的结构Fig.1 Structures of compounds 1—17

1 仪器与材料

1.1 仪器与试剂

HCB-1300V 型洁净工作台（青岛海尔特种电器有限公司），LRH-500A 型生化培养箱（广东泰宏君科学仪器股份有限公司），AD500S-P 型高剪切分散乳化机（上海昂尼仪器仪表有限公司），LDZX-75KBS 型立式高压蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂），ZF-20D 型暗箱式紫外分析仪（巩义市予华仪器有限责任公司），Agilent 1260 高效液相色谱仪（美国Agilent 公司），Nacalai tesque COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ型（250 mm×10 mm，5 μm）半制备柱，COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ型（250 mm×20 mm，5 μm）色谱柱，YMC*GEL ODS-A-HG 反相硅胶（日本YMC Group），细胞级DMSO（SIGMA 公司），MCO-18AC 二氧化碳细胞培养箱（PHcbi 公司），布鲁克400 MHz 核磁共振波谱仪（布鲁克公司），MULTISKAN MK3 多功能酶标仪（Thermo 公司），CHEETAH 9200 型中压制备色谱（天津博纳艾杰尔科技有限公司），LC3000 型高效液相色谱仪（上海楚定分析仪器有限公司），实验试剂为色谱纯（苏州速研医药科技有限公司）或分析纯（成都市科隆化学品有限公司）。细胞毒活性测定的5 种肿瘤细胞（A549 细胞、NCI-H1581 细胞、MCF7 细胞、AGS细胞、HT29 细胞）均购自武汉普诺赛公司，所用阳性对照为盐酸阿霉素（doxorubicin hydrochloride，Dox，Solarbio Life Sciences 公司）。

1.2 菌株来源及鉴定

菌株 HD-1-1 分离自广西涠洲岛火山口（N21°1′42.97′′，E109°7′46.29′′）的团扇藻样品中，由上海生工生物工程股份有限公司完成菌株基因组DNA 提取、扩增、纯化与测序工作，在NCBI 数据库中对ITS 测序鉴定的结果进行比对，综合菌株生长形态与ITS 测序鉴定结果（GenBank accession No.OR742886），将菌株鉴定为Penicilliumsp.HD-1-1，并利用MEGA（Version 7.0）绘制菌株的系统进化树。

2 方法

2.1 菌株发酵

在PDA 培养基上接种Penicilliumsp.HD-1-1 置28 ℃恒温培养箱中培养4 d，在超净工作台将长有菌的培养基划成小块投入灭菌后的真菌2 号液体培养基中，室温条件下，静置发酵30 d，发酵规模为300 mL×100 瓶。

真菌2 号发酵培养基：味精0.01 g/mL、磷酸二氢钾0.000 5 g/mL、海水素0.033 g/mL、酵母膏0.003 g/mL、琼脂0.02 g/mL、麦芽糖0.02 g/mL、葡萄糖0.01 g/mL、甘露醇0.02 g/mL。

2.2 次级代谢产物的提取分离

使用醋酸乙酯对Penicilliumsp.HD-1-1 菌株的发酵物进行了3 次萃取，经滤过和减压浓缩，最终获得了35.6 g 粗提物。用石油醚和90%甲醇-水各3 L 将粗提物充分溶解，在分液漏斗中混匀、静置过夜。对完全分层的2 种液体分别进行减压浓缩，得到石油醚萃取物4.05 g 和90%甲醇-水萃取物29.24 g。

对90%甲醇-水萃取物进行减压硅胶柱色谱，采用石油醚-醋酸乙酯（1∶0、10∶1、9∶1、8∶1、6∶1、4∶1、2∶1、1∶1、0∶1）梯度洗脱，经过TLC-HPLC 的分析，合样后获得了12 个组分Fr.1～12。Fr.6（168.3 mg）通过HPLC 制备（C18半制备柱，甲醇-0.1%三氟乙酸水溶液65∶35，4 mL/min），得到了化合物6（tR＝6.7 min，6 mg）和16（tR＝7.7 min，7 mg）。Fr.8（137.3 mg）通过HPLC（C18半制备柱，甲醇-酸水70∶30，4 mL/min）制，得到化合物9（tR＝18.6 min，12.3 mg）。Fr.9（1.901 1 g）通过高效液相色谱（C18色谱柱，甲醇-水70∶30，10 mL/min），得到化合物7（tR＝17.2 min，9 mg）、10（tR＝17.8 min，119 mg）、15（tR＝17.9 min，35 mg）。Fr.10（5.643 7 g）经中压制备色谱，甲醇-水（10%→100%）梯度洗脱，共分得12 个组分Fr.10.1～10.12。Fr.10.4 经半制备HPLC，乙腈-酸水（40∶60，4 mL/min）分离得到化合物3（tR＝14.82 min，80 mg）。Fr.10.8 经半制备HPLC，乙腈-酸水（40∶60，4 mL/min）分离得到化合物2（tR＝14.9 min，5 mg）。Fr.11（7.776 6 g）经中压制备色谱，甲醇-水（20%→100%）梯度洗脱，共分得9 个组分Fr.10.1～10.9。Fr.11.2 经半制备HPLC，甲醇-水（20∶80，体积流量4 mL/min）分离得到化合物14（tR＝9.1 min，3.2 mg）。Fr.11.4 经半制备HPLC，甲醇-酸水（40∶60，体积流量4 mL/min）分离得到化合物11（tR＝25.3 min，8.1 mg）、12（tR＝26.5 min，14.7 mg）、17（tR＝9.6 min，7.5 mg）。Fr.11.6经半制备HPLC，甲醇-酸水（60∶40，体积流量4 mL/min）分离得到化合物13（tR＝8.4 min，250 mg）。Fr.11.7 经半制备HPLC，甲醇-酸水（60∶40，体积流量4 mL/min）分离得到化合物4（tR＝16.5 min，7.5 mg）。Fr.11.9（3.75 g）经中压制备色谱梯度洗脱，洗脱体系：甲醇-水（20%→100%），共分得10个组分Fr.11.9.1～11.9.10。Fr.11.9.3 经半制备HPLC，甲醇-酸水（55∶45，体积流量4 mL/min）分离得到化合物5（tR＝13.2 min，6.1 mg）。Fr.11.9.6经半制备HPLC，甲醇-酸水（60∶40，体积流量4 mL/min）分离得到化合物8（tR＝16.1 min，5.2 mg）、1（tR＝20.2 min，41.3 mg）。

2.3 电子圆二色谱（electronic circular dichroism，ECD）计算

根据密度泛函理论（density functional theory，DFT）在Gaussian 09 软件中进行ECD 计算。首先通过hyperchem 软件对在5.0 kcal/mol（1 kcal＝4.2 kJ）内进行了初步构象搜索，之后在B3LYP/6-31G（d）水平上进行几何优化和单点能计算，获得Boltzmann 占比在1%以上稳定构象。用SCRF/PCM方法在相同的DFT 水平上评价甲醇溶液的溶剂效应并通过B3LYP/6-31G（d）中的TDDFT 计算得到化合物甲醇中的电子激发能和旋转强度（选择的激发态数目为30 个）。

2.4 化合物抗肿瘤活性测试

采用CCK-8 法测定细胞毒活性[12]，用DMSO将化合物溶解为20 μmol/L 的溶液。用10 %胎牛血清培养液将细胞稀释成单细胞悬液，96 孔板每孔接种90 μL 5×104个/mL 的贴壁细胞，在37 ℃、5%CO2的条件下预培养24 h。之后每孔加入10 μL 样品溶液，培养48 h 后，吸出旧培养基和样品溶液，每孔各加入100 μL 稀释10 倍的CCK-8 溶液，在27 ℃、5% CO2条件下培养4 h（避光操作，实时观察）。用酶标仪检测450 nm 处吸光度（A），用Excel标准化处理原始数据，按照公式计算初筛抑制率。若抑制率大于50 %则说明化合物对肿瘤细胞有较好抑制活性，后续对其进行IC50测定，用GraphPad Prism 8（版本8.0.2，GraphPad Software Inc）计算IC50，实验结果以±s表示。实验中每个浓度设3个复孔，同时设置空白组、药物组和对照组，以盐酸阿霉素为阳性对照。

抑制率＝(A对照－A药物)/(A对照－A空白)

3 结果与分析

3.1 菌株鉴定结果

菌株HD-1-1 的ITS 序列PCR 扩增序列长度为508 bp，这与NCBI 数据库中的Penicilliumsp.在系统进化树上是同一分支，进一步观察其形态特征可以发现，菌落绒状致密边缘为白色，能生成大量的孢子，孢子面为蓝绿色，这与青霉菌的形态特征是一致的。因此，初步鉴定HD-1-1 这一菌株是青霉菌Penicilliumbrevicompactum，并将其命名为Penicilliumsp.HD-1-1（图2）。

图2 菌株Penicillium sp.HD-1-1 的系统发育树Fig.2 Phylogenetic tree of Penicillium sp.HD-1-1

3.2 化合物结构鉴定

表1 化合物1 的1H-NMR (400 MHz, CD3OD) 和13C-NMR (100 MHz, CD3OD) 数据Table 1 1H-NMR (400 MHz, CD3OD) and 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) data of compound 1

图3 化合物1 的主要1H-1H COSY、HMBC 和ROESY 相关性Fig.3 Key 1H-1H COSY, HMBC and ROESY correlations of compound 1

图4 化合物1 的实测和计算ECD 谱图Fig.4 Experimental and calculated ECD spectra of compound 1

化合物2：白色粉末；ESI-MSm/z343.1 [M＋Na]+，分子式C17H20O6；1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 5.25 (1H, t,J= 6.9 Hz, H-2′), 5.22 (2H, s, H-3),3.76 (3H, s, 5-OMe), 3.38 (2H, d,J= 6.9 Hz, H-1′),2.36 (2H, t,J= 7.2 Hz, H-5′), 2.26 (2H, t,J= 7.6 Hz,H-4′), 2.14 (3H, s, H-8), 1.81 (3H, s, H-7′)；13C-NMR(100 MHz, CD3OD)δ: 177.3 (C, C-6′), 173.8 (C,C-1), 164.8 (C, C-5), 154.7 (C, C-7), 146.6 (C, C-3a),135.0 (C, C-3′), 124.4 (CH, C-2′), 123.6 (C, C-6),117.8 (C, C-4), 107.7 (C, C-7a), 70.8 (CH2, C-3), 61.6(CH3, 5-OMe), 35.8 (CH2, C-4′), 33.8 (CH2, C-5′),23.6 (CH2, C-1′), 16.3 (CH3, C-7′), 11.4 (CH3, C-8)。该化合物的数据与文献报道的一致[14]，故鉴定化合物2 为霉酚酸。

化合物3：褐色粉末；ESI-MSm/z357.1 [M＋Na]+，分子式C18H22O6；1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ: 5.23 (3H, s, H-3, 2′), 3.75 (3H, s, 5-OMe), 3.56 (3H,s, 6′-OMe), 3.37 (2H, d,J= 7.0 Hz, H-1′), 2.39 (2H, t,J= 6.9 Hz, H-5′), 2.26 (1H, t,J= 7.6 Hz, H-4′), 2.14(3H, s, H-8), 1.80 (3H, s, H-7′)；13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ: 175.6 (C, C-6′), 173.8 (C, C-1), 164.8 (C,C-7), 154.8 (C, C-5), 146.6 (C, C-4), 134.8 (C, C-3′),124.6 (CH, C-2′), 123.6 (C, C-7a), 117.8 (C, C-6),107.7 (C, C-3a), 70.8 (CH2, C-3), 61.5 (CH3, 5-OMe),52.0 (CH3, 6′-OMe), 35.7 (CH2, C-4′), 33.7 (CH2,C-5′), 23.6 (CH2, C-1′), 16.2 (CH3, C-7′), 11.4 (CH3,C-8)。该化合物的数据与文献报道的一致[15]，故鉴定化合物3 为甲基麦考酚酸。

化合物5：棕色粉末；ESI-MSm/z359.2 [M＋Na]+，分子式C17H20O7；1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 6.60 (1H, brs, H-3), 5.25 (1H, t,J= 6.3 Hz, H-2′),3.76 (3H, s, 5-OMe), 3.40 (2H, d,J= 6.9 Hz, H-1′),2.28～2.38 (4H, m, H-4′, 5′), 2.25 (3H, s, H-8), 1.81(3H, s, H-7′)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3)δ: 179.5(C, C-6′), 171.7 (C, C-1), 165.2 (C, C-5), 154.5 (C,C-7), 145.7 (C, C-3a), 135.2 (C, C-3′), 125.5 (C, C-6),124.1 (CH, C-2′), 120.3 (C, C-4), 108.8 (C, C-7a),100.9 (CH, C-3), 61.5 (C, 5-OMe), 35.8 (CH2, C-4′),33.9 (CH2, C-5′), 23.7 (CH2, C-1′), 16.3 (CH3, C-7′),11.1 (CH3, C-8)。该化合物的数据与文献报道的一致[16]，故鉴定化合物5 为6-(5-羧基-3-甲基戊-2-烯)-3,7-二羟基-5-甲氧基-4-甲基苯酚-1-酮。

化合物10：白色粉末；ESI-MSm/z529.3 [M＋Na]+，分子式C32H30N2O4，1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ: 7.66～7.70 (4H, m, H-2′′, 2′′′, 6′′, 6′′′),7.18～7.41 (10H, m, H-2, 2′, 3, 3′, 4, 4′, 5, 5′, 6, 6′),7.35～7.52 (6H, m, H-3′′, 3′′′, 4′′, 4′′′, 5′′, 5′′′), 4.80(1H, dd,J= 9.5, 5.8 Hz, H-8′), 4.57 (1H, m, H-8),4.41 (1H, dd,J= 11.5, 4.5 Hz, H-9α), 4.14 (1H, dd,J= 11.4, 6.4 Hz, H-9β), 3.28 (1H, m, H-7′α), 3.12(1H, dd,J= 13.8, 9.0 Hz, H-7′β), 2.94 (1H, dd,J=13.7, 6.6 Hz, H-7α), 2.88 (1H, dd,J= 13.7, 8.3 Hz,H-7β)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3)δ: 173.1 (C,C-9′), 170.4 (C, C-7′′), 170.3 (C, C-7′′′), 139.1 (C,C-1), 138.5 (C, C-1′), 135.6 (C, C-1′′), 135.0 (C,C-1′′′), 132.9 (C, C-4′′′), 132.6 (CH, C-4′′), 130.3 (CH,C-2′, 6′), 130.2 (CH, C-2, 6), 129.6 (CH, C-2′′′, 6′′′),129.5 (CH, C-3, 5), 129.5 (CH, C-3′′, 5′′), 129.5 (CH,C-3′′′, 5′′′), 128.5 (CH, C-4′), 128.4 (CH, C-2′′, 6′′),127.9 (CH, C-3′, 5′), 127.6 (CH, C-4), 66.8 (CH2,C-9), 56.3 (CH2, C-8′), 51.9 (CH2, C-8), 38.0 (CH2,C-7′), 37.8 (CH2, C-7)。该化合物的数据与文献报道的一致[20]，故鉴定化合物10 为N-(N'-苯甲酰基-S*-苯丙氨酰基)-S*-苯丙氨醇苯甲酸酯。

化合物15：白色粉末；ESI-MSm/z383.1 [2M＋Na]+，分子式C9H8O4；1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 10.28 (2H, s, 5, 7-OH), 6.41 (1H, s, H-6), 5.09 (2H,s, H-3), 1.90 (3H, s, H-8)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ: 169.1 (C, C-1), 162.0 (C, C-5), 156.0 (C,C-7), 149.3 (C, C-3a), 108.6 (C, C-4), 102.2 (C, C-7a),102.1 (CH, C-6), 67.7 (CH2, C-3), 10.2 (CH3, C-8)。该化合物的数据与文献报道的一致[24]，故鉴定化合物15为5,7-二甲氧基-4-甲基异苯并呋喃-1(3H)-酮。

化合物16：黄色粉末；ESI-MSm/z407.1 [2M＋Na]+，分子式C10H8O4；1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 6.32 (1H, s, H-4), 6.30 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-5),6.28 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-7), 2.23 (3H, s, H-9)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 167.9 (C, C-1),167.3 (C, C-3), 164.9 (CH, C-4), 155,6 (C, C-4a),141.5 (CH, C-5), 105.5 (C, C-6), 103.4 (CH, C-7),102.4 (C, C-8), 99.7 (C, C-8a), 19.2 (CH3, C-9)。该化合物的数据与文献报道的一致[25]，故鉴定化合物16为saccharonol A。

化合物17：黄色粉末；ESI-MSm/z417.2 [2M＋H]+，分子式C10H8O5；1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 6.50 (1H, brs, H-4), 6.35 (1H, m, H-5), 6.33 (1H, m,H-7), 4.34 (2H, s, H-9) ；13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ: 167.5 (C, C-1), 167.4 (C, C-8), 164.9 (C,C-6), 157.4 (C, C-3), 140.7 (C, C-4a), 104.8 (CH, C-4),104.4 (CH, C-5), 103.0 (CH, C-7), 99.9 (C, C-8a), 61.3(CH2, C-9)。该化合物的数据与文献报道的一致[26]，故鉴定化合物17 为6,8-二羟基-3-羟甲基异香豆素。

3.3 活性测试结果

通过测试13 个化合物对5 种肿瘤细胞（A549、NCI-H158、MCF7、AGS、HT29）的抑制活性（表2）发现，化合物2 和3 对AGS 细胞具有较强抑制活性，IC50分别为0.69、1.12 μmol/L。此外化合物2 对NCI-H1581 细胞具有中等抑制活性，IC50值为17.95 μmol/L，化合物3 对HT29 细胞具有中等抑制活性，IC50值为19.30 μmol/L。

表2 13 个化合物的细胞增殖抑制活性测试Table 2 Antitumor activities for 13 compounds

4 讨论

本研究以涠洲岛火山口海洋真菌Penicilliumsp.HD-1-1 为研究对象，分离得到1 个新的霉酚酸类化合物（1）以及16 个已知化合物（2～17）。通过分析活性测试结果及化合物之间的结构差异，发现化合物2 和3 仅在C-6′位置有差异，说明C-6′位置的COOH 酯化为COOCH3增加了化合物对于HT29 细胞的细胞毒活性，降低了化合物对于AGS细胞和NCI-H1581 细胞的细胞毒活性。化合物2 和5 相比，说明苯并呋喃环上C-3 位置的羟基取代降低了化合物对于5 种肿瘤细胞的细胞毒活性。化合物1、4 与化合物3 相比，说明苯并呋喃环上C-3位置发生的甲氧基取代、及羟基取代降低了化合物对于5 种肿瘤细胞的细胞毒活性。结构的改变可能影响其在体内的吸收和稳定性、对肿瘤细胞的亲和力、片段的酶分解行为，这些因素微妙相关进而造成活性的变化[27]。

本研究发现的新霉酚酸类衍生物，丰富了海洋天然来源的MPAs 家族。此外，还研究了该类化合物对于5 种肿瘤细胞（A549、NCI-H1581、MCF-7、AGS、HT29）的细胞毒活性，为霉酚酸衍生物的生物活性探索研究提供了相应参考，以期获得新的有前途的霉酚酸类药物先导化合物。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突