急性缺血性脑卒中血清指标与预后的关系

姚晓雷,井亚萍,胡月丽

(商丘市第三人民医院,河南 商丘 476000)

急性缺血性脑卒中(AIS)是一种以脑组织缺血缺氧损害和颅内血栓形成为主要临床特征的脑血管疾病,老年人高发,对患者家庭和社会均造成沉重的经济负担[1-2]。若能尽早诊断病情并及时给予对症治疗,可显著改善此类患者的临床预后。血清标志物检查具有检测方便、结果及时等优势,已广泛应用于临床工作中。研究证实[3-4],血清同型半胱氨酸(Hcy)与脑梗死具有明确的因果关系。研究发现[5],AIS的发生与血脑屏障受损、动脉粥样硬化、炎症反应及长链非编码RNA等相关。有报道指出[6],在蛛网膜下腔出血患者中,血清LnRNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)含量明显增加,可通过促进神经元细胞损害起到加速疾病进展的作用。现已证实[7-8],动脉粥样硬化是导致脑卒中发生的主要病理机制,而抗髓过氧化物酶(MPO)抗体与动脉粥样硬化存在密切联系。目前关于血清Hcy和LncRNA MEG3及抗-MPO抗体水平与AIS患者神经功能缺损和脑梗死面积的相关性研究较少。本研究探讨了急性缺血性脑卒中血清指标与预后的关系,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2021年3月—2023年3月收治的AIS患者100 例为观察组,选择同期体检健康者100 例作为对照组。两组患者一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。根据脑梗死体积将观察组分为小面积组(d<2 cm,n=42)、中面积组(d≥2～<5 cm,n=30)和大面积组(d≥5 cm,n=28)。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将其分为轻型组(NIHSS评分<5 分,n=40)、中型组(NIHSS评分≥5～≤20 分,n=28)和重型组(NIHSS评分>20 分,n=32)。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 纳入和排除标准

观察组纳入标准:经影像学检查明确诊断为AIS,诊断标准参照《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》[9];均为首次发病,发病至就诊时间不超过24 h;临床资料完整,均自愿签署知情同意书。

对照组纳入标准:无心脑血管疾病的健康人群,未发生急性缺血性脑卒中;临床资料完整,且均自愿参与本研究;均为我院体检的健康人群。

两组排除标准:无症状脑梗死;合并风湿性心脏病、脑外伤、心力衰竭及瓣膜性心脏病者;伴有严重脏器功能障碍者;妊娠、哺乳期妇女;合并精神疾病和恶性肿瘤者;依从性不佳者。

1.3 方法

所有受试者均于收治入院时完成颅脑MRI检测。观察组患者入院次日和对照组健康体检者体检当日清晨采集空腹肘静脉血8 mL,经离心处理后,保留上层血清于-80 ℃环境中保存,待统一检测。

1.3.1 血清抗-MPO抗体及Hcy水平

使用贝克曼AU5800检测仪器检测血清Hcy和抗-MPO抗体水平,采用酶联免疫法(ELISA),试剂盒购自长光华医生物医学工程有限公司,所有检测操作均严格遵照说明书标准执行。

1.3.2 血清LncRNA MEG3水平

采用qRT-PCR法检测LncRNA MEG3含量,具体如下:解冻冻存的血液样本,采用Trizol法提取样本中的总DNA,并逆转录为cDNA。根据扩增反应试剂盒说明书配置反应体系,并进行扩增和检测。以GAPDH为内参,LncRNA MEG3的上游引物序列为5＇-ATCATCCGTCCACCTCCTTGTCTTC-3＇,下游引物序列为5＇-GTATGAGGATAGCAAAGGTGAGGGC-3＇,引物由北京义翘神州科技有限公司合成,根据2-ΔΔCt法计算LncRNA MEG3相对表达量。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 两组一般资料比较

两组患者的体质量指数(BMI)、性别、年龄和吸烟、糖尿病患者比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组高血压患者比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

表1 两组临床资料对比

2.2 两组血清指标水平及抗-MPO抗体阳性率比较

观察组患者血清LncRNA MEG3,Hcy水平和抗-MPO抗体阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

表2 两组患者血清指标水平及抗-MPO抗体阳性率比较

2.3 不同梗死面积患者抗-MPO抗体和血清水平比较

随着患者梗死面积的增加,其血清Hcy和LncRNA MEG3水平呈升高趋势,且抗-MPO抗体阳性率也明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)(见表3)。

表3 不同梗死面积患者血清指标和抗-MPO抗体阳性率比较

2.4 不同神经功能缺损程度患者血清指标和抗-MPO抗体阳性率比较

重型组患者的血清Hcy,LncRNA MEG3水平和抗-MPO抗体阳性率高于轻型组和中型组,差异均有统计学意义(P<0.05)(见表4)。

表4 不同神经功能缺损程度患者血清指标和抗-MPO抗体阳性率比较

2.5 AIS患者血清指标和抗-MPO抗体阳性率与脑梗死体积和神经功能缺损的相关性分析

AIS患者的血清LncRNA MEG3和Hcy水平及抗-MPO抗体阳性率与脑梗死体积、NIHSS评分均呈正相关(P<0.05)(见表5)。

表5 AIS患者血清指标和抗-MPO抗体阳性率与脑梗死体积和NIHSS评分的相关性分析结果

3 讨 论

临床证据显示[10-11],目前临床针对脑卒中患者的临床疗效并不十分理想,且不少患者治疗后伴有程度不一的神经功能缺损,这对患者生活质量造成了严重的负面影响,使社会医疗负担加重,同时还会影响患者情绪,继而对预后质量产生负面影响。文献指出[12],动脉粥样硬化是导致脑卒中发生的主要原因,其次是各种炎性介质和细胞参与的慢性炎症过程。髓过氧化物酶是一种具有促炎症作用的特异性标志物。中性粒细胞在被激活状态下,可通过分泌抗-MPO抗体来介导血管炎性改变和免疫反应[13]。本研究结果显示,观察组抗-MPO抗体阳性率高于对照组,提示高水平的MPO与AIS的发生发展过程存在密切联系,检测MPO抗体的水平可在一定程度上辅助临床早期诊断AIS。此外,本研究中,AIS患者的抗-MPO抗体阳性率随着脑梗死面积和NIHSS评分升高,提示抗-MPO抗体与脑卒中疾病的严重程度存在一定相关性。相关性分析结果显示,AIS患者的血清抗-MPO抗体阳性率与其脑梗死体积呈正相关。分析机制在于[14],在疾病早期,各种细胞因子或代谢产物均可刺激中性粒细胞,促使分泌抗-MPO抗体来参与AIS病理过程;此外,中性粒细胞的大量聚集还会触发机体的免疫反应,引发神经血管炎症,进而对患者神经功能造成损伤。

Hcy是甲硫氨酸和半胱氨酸代谢过程中的中间产物,其本质是一种含硫氨基酸。在正常情况下,Hcy在人体血液中的含量较低,但在一些外界因素(原发性或继发性)的影响下,其代谢会出现异常,致使血Hcy水平明显升高,诱发脑血管疾病的发生[15]。现已证实[16],高Hcy是导致脑血管病和动脉粥样硬化的独立危险因素,其表达水平与脑梗死呈剂量依赖关系。本研究中观察组血清Hcy高于对照组,且随着AIS患者脑梗死面积和神经缺损严重程度的增加,其表达水平也呈现明显上升趋势。相关性分析结果提示,血清Hcy与AIS患者脑梗死面积和神经功能缺损呈正相关,表明血清Hcy可在一定程度上辅助临床评估AIS患者病情的严重程度。分析其原因在于,高水平的Hcy可通过分泌超氧化物影响凝血因子的功能,血栓形成的风险明显增加,进而形成动脉粥样硬化,最终导致脑卒中的发生和病情恶化[17]。

LncRNA MEG3是一种与神经系统发育、突触可塑性相关的LnRNA,可促进细胞凋亡,并对细胞增殖起到抑制作用。其表达水平在脑缺血再灌注损伤发生时会出现异常改变,主要是通过影响神经元凋亡、血脑屏障通透性及脑梗死体积来参与脑缺血再灌注损伤的病理发展过程。胡雪钟和童同[18]研究发现,下调LncRNA MEG3水平可起到防止缺血损伤、改善神经功能的作用。脑梗死体积可体现卒中患者的病变体积和范围[19],NIHSS评分则可反映患者的神经缺损情况[20],两者可从不同方面来辅助临床判断AIS患者的病情。本研究发现,血清LncRNA MEG3水平可随着AIS患者脑梗死体积和NIHSS评分的增加而呈现升高趋势,表明LncRNA MEG3与AIS的病理过程存在密切联系,有望成为临床评估AIS患者病情的有效参考指标。分析其机制可能在于,LncRNA MEG3作为LncRNA家族成员之一,可通过影响血脑屏障通透性、神经元增殖和凋亡等过程来起到影响AIS的作用[21-22]。

综上所述,AIS患者的血清Hcy和LncRNA MEG3及抗-MPO抗体水平较高,且均与患者的神经功能缺损程度和脑梗死面积呈正相关,可用于早期诊断AIS和评估病情的严重程度。本研究纳入患者数量较少,且均为本院区患者,结论的可推广性不强;此外,本研究中未能明确血清抗-MPO抗体、Hcy及LncRNA MEG33在脑卒中患者不同阶段的变化情况和作用机制,仍需进一步多中心的研究以提高结论的准确性。