新型鹅细小病毒病诊断及其综合防治措施

乔丹丹，刘婷隽，陈全刚，胡安康

（徐州医科大学实验动物中心，江苏 徐州 221004）

新型鹅细小病毒（Novel goose parvovirus，NGPV）在鸭群中感染率为10%～30%，死亡率为2%～6%[1]。NGPV 既可通过粪口途径水平传播，也可通过种鸭或种蛋垂直传播，耐过鸭易成为僵鸭或残鸭，病鸭体重仅为正常鸭体重的50%，淘汰率可达80%，使养殖成本增加、出栏率降低、不易销售，给我国养禽业造成了巨大经济损失。本文就NGPV 病的病因分析、流行病特点、临床症状和免疫防控进行综述，以期为NGPV 病诊断、检测、综合防控提供参考依据。

1 病因分析

1.1 病原学特征

NGPV 属细小病毒科、细小病毒亚科、依赖病毒属，是鹅细小病毒（GPV）经典株的一个进化分支，与GPV 的核苷酸同源性为92.2%～97.1%。但其感染宿主的类型、致病性、发病特征均有所不同，致病机制已发生较大变化[2]。在2015年至2016年期间，从中国不同地区分离出7 株NGPV 菌株，与经典GPV 相比，在NGPV的7 个分离株中发现5 个共有核苷酸突变，在6个NGPV 分离株中出现2 个核苷酸对缺失，在NGPV 的复制蛋白和衣壳蛋白中分别发现12 个和8 个同步氨基酸变化，这对病毒基因调控、宿主体液免疫反应有很重要的影响[3]。

1.2 电镜观察特征

电镜观察结果显示，NGPV 在电镜下也呈现出直径约20～25 nm 的病毒粒子，与GPV 类似，皆为球形[4]。

1.3 致病机理

NGPV 是一种无包膜的细小病毒，其DNA基因组为线形单链，长度约为5.1 kb，是GPV 的鸭源变异株[5]，包含两个开放阅读框（ORF1 和ORF2），其中ORF1 含有1 884 nt，编码628 aa的NS1 蛋白和452 aa 的NS2 蛋白[6]；ORF2 含有2 199 nt，包含编码733 aa 的结构蛋白VP1、588 aa 的VP2 和535 aa 的VP3[7]。VP1 包含了VP2 和VP3，VP1、VP2、VP3 公用一个终止密码子（TAA），但是起始密码子不同。VP2 和VP3 蛋白是VP1 的mRNA 经过可变拼接产生的。该病毒与MDPV 存在着一定的抗原相关性，它们的共同抗原主要在核衣壳蛋白VP3，而VP1和VP2 蛋白存在抗原性差异[8]。

1.4 病原理化特性

NGPV 对外界环境和消毒剂的抵抗力较强，在酸性、热性环境下的存活力较强，但对刺激性的消毒剂如氨水比较敏感，对紫外线也较敏感。对其他消毒剂，如0.04%甲醛和乙氧基乙烷有较强的抵抗力[9]。

2 流行特点

2.1 传播速度快，范围广

由 NGPV 引起的鸭短喙与侏儒综合征（SBDS），于20 世纪70年代首次在法国的骡鸭和番鸭群中被发现报道，随后于20 世纪90年代在台湾的骡鸭中被报道[10]。2000年在我国南方福建、台湾等地的养鸭地区零星发生，然后逐渐扩散。2015年3月，中国北方如山东、江苏、安徽各省的番鸭群中出现了SBDS。近年来，SBDS的传播速度非常迅速，在中国的各个鸭产区广泛存在，包括福建、山东、安徽、上海、河北、浙江、湖南和广东省[11]。尽管鸭群的发病率在10%～30%之间，死亡率通常低于10%，但是该病导致的患鸭发育不良、短喙、体重减轻、胫骨易骨折等症状对中国养鸭业造成了巨大的经济损失。

2.2 发病具有明显季节性

每年10月至次年的5月为本病高发期，NGPV 在低温环境中可存活数月及数年。该病毒对于阳光和温度敏感，夏季紫外线强，温度高，不利于NGPV 的存活，导致感染率减少。

2.3 可垂直传播，危害大

研究发现，NGPV 可以通过垂直传播感染雏鸭，这大大地增加了该病的危害性[12]。NGPV 能在鸭胚中增殖，并能导致鸭胚出现生长迟缓和胚体出血的症状[13]。

2.4 在水禽细小病毒群中谱系独特

Shilong Chen 研究表明，SBDSV M15 分离株对鹅细小病毒抗原呈阳性，但对番鸭细小病毒抗原不呈阳性。扩增348 bp（2604～2951 nt）的VP1 基因片段，其序列表明该病毒与匈牙利GPV株的亲缘关系最为密切，该株也是从患有SBDS疾病的骡鸭中分离出来的。通过给鸟类接种SBDSV M15，也繁殖了类似的疾病[14]。Vilmos Palya 试验研究表明，只有用从患SBDS 的番鸭上分离的NGPV 毒株，经口服途径感染1 日龄雏鸭，才能复现SBDS 症状。系统发育树显示，从骡鸭SBDS 分离的细小病毒属于鹅细小病毒相关水禽细小病毒群的一个独特谱系[15]。

2.5 与经典的GPV 存在明显的差异

陈浩等分离出我国第一株NGPV 全基因组分离株SDLC01 并进行了测序，与经典水禽细小病毒分离株和疫苗株进行了系统发育比较分析。结果显示，SDLC01 株与GPV、MDPV 分离株都不同，SDLC01 与GPV 分离株具有90.8%～94.6%的核苷酸同一性，与MDPV 分离株具有78.6%～81.6%的核苷酸同一性。SDLC01 与骡鸭分离株（菌株D146/02）高度相似，与欧洲GPV 分离株接近，但与亚洲GPV 分离株不同。与经典GPV和MDPV 分离株相比，SDLC01 在160～176 nt和306～322 nt 位置之间删除了两个主要片段。SDLC01 的病毒致病性和基因组特征表明，NGPV 是SBDS 的致病因子，属于一个独特的GPV 相关亚群。此外，该研究证明病鸭组织PCR检测结果阳性，且病毒能在鸭胚和鸭胚成纤维细胞中增殖[16]。除基因组的差异外，还存在宿主嗜性和临床症状的差异，GPV 主要流行于雏鹅和雏番鸭并引起腹泻和神经症状，NGPV 主要流行于雏樱桃谷鸭、番鸭、北京鸭群并引起SBDS，相比经典的GPV，NGPV 在感染宿主的致病性上存在明显的差异[17]。

2.6 与鸭圆环病毒共感染情况严重

近年来 NGPV 和鸭圆环病毒（ Duck circovirus, DUCV）的共同感染通常发生在SBDS的现场病例中[18]。研究人员建立了一种复合感染模型，并对2 种病毒的复制和致病性进行了评估，发现NGPV 和DUCV 之间存在协同作用。与单感染组相比，合并感染的致病性显著增强，合并感染对鸭子的生长发育影响更严重，并引起更严重的临床症状和病理变化。主要病变为肝、肾和十二指肠的变性、坏死、出血、淋巴细胞浸润，包括脾脏、胸腺、法氏囊在内的免疫器官萎缩，以及这些器官的骨髓和组织细胞损失。DUCV 和GPV 感染的特征性病变出现，但免疫器官的病变更为严重。肝脏和肾脏是主要的代谢器官，因此它们的病变更严重，病毒载量更高[19]。

3 临床症状

NGPV 可造成跛行、胫骨易折、上下喙萎缩导致舌头外露，使患鸭采食困难，体重减轻，大大降低患病鸭的经济价值[20]。最初感染NGPV 的雏鸭无明显症状，一周后出现呆滞、精神沉郁，两周后开始表现出短喙、生长变慢等特征性症状[21]。NGPV 发病症状与感染鸭的日龄有一定关联。

2～4 日龄。肉鸭出现腿软，站立不稳，走路时双腿分叉向外，呈八字脚，易摔倒。随后出现跛行，瘫痪，腹泻，病鸭仰面着地，挣扎着却无法站立，翻跟头，扭脖，不愿走动[22]。

10 日龄。肉鸭出现运动障碍，常见蹲坐式瘫痪，采食不便或无法采食，生长迟缓。

15 日龄。病鸭开始出现上下喙较短，舌头伸出较大，采食困难，体型消瘦，腿短且无力、羽毛蓬乱稀少，病鸭精神差，表现持续腹泻，有的形成僵鸭，死淘率加大[23]。

4 病理变化

病原体主要在肠道和舌上皮细胞进行复制。病毒增殖后会破坏病鸭的肠道黏膜，有研究表明，鸭源NGPV 感染会导致肠道屏障受损，免疫功能出现障碍，从而引起钙磷代谢失衡引起的一系列症状[24]。病鸭或死鸭的诊断性病理损伤未发现明显变化。

5 免疫防控

5.1 疫苗预防

目前 NGPV 还没有特异的商品化疫苗，Jiewen Zhou 等研制了一种SBDS 的候选灭活疫苗。接种此疫苗可显著抑制鸭体内NGPV 的复制，且该疫苗与油乳剂佐剂合用时，具有良好的免疫原性，为SBDS 的预防和控制提供了一个潜在的强大工具[25]。

5.2 增强雏鸭的抵抗力

加强环境管理，增强雏鸭的抵抗力[26]。供应清洁饮用水和营养饲料。

5.3 加强饲养管理

在寒冷的冬天，鸭舍须防冷保暖，适度通风，保持适宜湿度，做好养殖场的环境卫生，加强饲料营养，养殖密度不宜过大，减少应激。

5.4 进行无害化处理与及时消毒

出现上下喙萎缩、大舌头、跛行等特征性症状时要及时进行NGPV 的检测。在引种时做好病原检测，禁止到发病疫区引种。患病鸭及时处理隔离，可进行无害化处理与及时消毒，避免波及全群。

5.5 及时淘汰净化

养殖场内可能存在水平和垂直传播情况，感染鸭的不能留作种用。有条件的饲养场可以进行NGPV 病毒血清筛查，发现抗体阳性的鸭要及时淘汰处理掉。

6 小结

目前尚无针对NGPV 病的特效疗法，对该病的防治以小鹅瘟疫苗免疫和预防为主，因此仍迫切需要研制保护率高、免疫性好、成本低、生物安全风险小且副反应少的特异性疫苗，以提供有效的抗体，降低发病率。关于NGPV 的致病性及与经典毒株的差异性已经有许多报道，但是对于NGPV 发病机制及病毒演化变异过程还不清楚，相关研究及治疗防控方法还不明确，以后还需更进一步研究。本研究旨在分析NGPV 的发病因素、流行病学诊断、预防措施，以期为今后该病的研究及防控提供技术支撑。