两种临床病理技术在胸腔积液良恶性鉴别诊断中的应用价值比较

叶健威，黄志娴

（惠州市第六人民医院病理科，广东 惠州 516200）

胸腔积液是胸膜腔内浆液在非自然状态下积聚产生的一种临床病理状态，主要表现为胸膜腔存在病理性液体聚积。感染性疾病、循环系统疾病、恶性肿瘤等是临床上诱发胸腔积液的主要因素，其中恶性肿瘤以肺腺癌、非小细胞肺癌、恶性间皮瘤为主，如诊疗不及时不仅会影响患者的身体健康，还可能危及其生命，因此早诊断早治疗非常关键[1]。以往临床多采用细胞涂片技术来鉴别胸腔积液的性质，但由于癌症和间皮性肿瘤细胞形态非常相似，因此容易出现漏诊误诊，诊断灵敏度有待提升，故临床需要寻找更为有效的检测技术[2]。液基细胞学技术是基于滤过膜或重力沉淀原理，通过特殊制片系统制作标准化、优良细胞学病理薄片的技术，大体可分为膜式细胞学技术和沉降式细胞学技术。目前液基细胞学技术已被广泛应用于妇科宫颈病变的筛查中，为宫颈疾病的早诊断早治疗提供了重要的病理学依据，并且随着技术的发展与普及正被逐渐应用于体液细胞学检查中[3]。本研究旨在比较沉降式液基细胞技术与细胞涂片技术在胸腔积液良恶性鉴别诊断中的应用价值，详细报道如下。

1 资料与方法

1·1 一般资料

选取我院2020 年4 月至2023 年5 月收治的90 例胸腔积液患者作为研究对象。入组患者的临床症状均符合胸腔积液的诊断标准，且经我院确诊为胸腔积液（良性胸腔积液患者经胸腔积液常规检查、超声心动图检查等，且临床治疗后胸腔积液可完全吸收，基于此综合分析其临床资料后确诊；恶性胸腔积液患者经胸腔积液脱落细胞学检查确诊）；患者自愿参与研究，依从性较好，可积极配合研究。其中恶性胸腔积液患者45 例：男25 例，女20 例，年龄20 ～71 岁，平均（44·25±5·69）岁；体质指数19 ～25 kg/m2，平均（22·30±2·40）kg/m2。良性胸腔积液患者45 例：男24 例，女21 例；年龄20 ～70 岁，平均（44·40±5·39）岁；体质指数19 ～24 kg/m2，平均（22·15±2·62）kg/m2。良、恶性胸腔积液患者的一般资料相比，差异无统计学意义（P＞0·05）。

1·2 方法

1·2·1 细胞涂片技术 入院次日清晨采集患者新鲜的胸腔积液50 mL，置于4 个尖底离心管中，以3000 r/min 的转速离心15 min，吸取上清液后，对剩余沉淀物进行抹片处理，并用显微试镜纸包裹、分离沉渣。用10%福尔马林固定沉渣至少30 min，进行脱水处理，然后用石蜡包埋法进行涂片包埋，最后以3 μm 的切片厚度标准对细胞块连续切片，并进行HE 染色。

1·2·2 沉降式液基细胞技术 沉降式液基细胞技术的胸腔积液采集、处理方法与细胞涂片技术一致。采用的仪器为广州江元jy3200 液基细胞学检测系统。在离心分离上清液后的沉淀物中加入20 ～30 mL 固定液，30 min 后以600 r/min 的转速离心10 min，分离并去掉上清液，在剩余沉淀物中加入10 mL缓冲液，并用涡旋振荡器混匀10 s。

用滤网进行过滤并将过滤后的液体置于12 mL 的离心管中，以600 r/min 的转速离心5 min，分离并去掉上清液后，将剩余沉淀物振荡混匀，上机操作。选择好所需的程序，操作完毕后将染好色的切片按梯度酒精进行脱水、透明、中性树胶封固处理。两种技术处理后的切片均由同一组病理医师（病理科2 名经验丰富的医师）独立阅片，并完成制片效果评价和良恶性诊断。

1·2·3 制片效果评价 由病理医师在显微镜下观察经两种制片技术制作的切片的染色清晰度、细胞数量、分布、结构、形态、背景等，并以此为依据进行制片效果评价。

1·2·4 细胞学诊断标准 根据细胞的异型性、种类、数量可以分为三级：未见恶性肿瘤细胞为Ⅰ级，可见疑似恶性肿瘤细胞为Ⅱ级，可见恶性肿瘤细胞为Ⅲ级。Ⅱ、Ⅲ级为阳性结果。

1·3 观察指标

观察并评价两种病理技术的制片质量。比较两种病理技术的诊断效能。

1·4 统计学方法

使用SPSS 22·0 软件对数据进行统计分析，计量资料以±s表示，采用t检验；计数资料以%表示，采用χ2检验；P＜0·05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2·1 两种病理技术的制片质量

通过显微镜下观察，可见沉降式液基细胞技术的制片质量优于细胞涂片技术，其细胞分布均匀，形态能保持原样，背景清晰，镜下观察更方便。详见表1、图1。

表1 两种病理技术的制片质量

2·2 两种病理技术的诊断效能

45 例恶性胸腔积液患者细胞涂片技术检查的阳性率为51·11%，沉降式液基细胞技术检查的阳性率为88·89%；45 例良性胸腔积液患者细胞涂片技术检查的阴性率为73·33%，沉降式液基细胞技术检查的阴性率为84·44%；沉降式液基细胞技术鉴别胸腔积液良恶性的准确率高于细胞涂片技术（86·67% vs 62·22%，P＜0·05）。详见表2。

表2 两种病理技术的诊断效能[例（%）]

3 讨论

胸腔积液是由癌栓、癌细胞阻塞血管、淋巴管等导致组织液回流障碍而引发的疾病，多为转移性腺癌及胸膜间皮瘤等的并发症[4]。胸腔积液分为良性和恶性两种，对其采样并进行临床病理检查可以鉴别胸腔积液的性质，为临床治疗方案的制定提供参考。临床病理技术是为了探讨疾病病因、病理、机制变化而创立的疾病诊断技术，主要包括细胞分子病理学技术、细胞学技术、免疫组化技术等[5]。细胞涂片技术是目前临床常用的病理技术，其操作简便，可以进行细胞学形态特征观察，但其对结构相似细胞的分辨性能较差。以往临床上多用细胞涂片技术鉴别胸腔积液的性质，但其诊断准确性有限，仅有60%左右[6]。本次研究结果也显示细胞涂片技术鉴别胸腔积液良恶性的准确率为62·22%，与该数据相符。如果临床单纯依靠细胞涂片技术的诊断结果制定治疗方案，就会存在较大的风险。同时，如果是恶性胸腔肿瘤并发胸腔积液，其间皮细胞、肿瘤细胞形态非常相似，细胞涂片技术和HE 染色后，很难有效区分胸腔积液的性质，一旦漏诊误诊将直接影响诊疗结果[7-8]。因此，寻找更为有效的诊断鉴别方法十分关键。

作为集制片、染色于一体的全自动液基细胞学设备，沉降式液基细胞系统有专门配置的密度梯度试剂，可以有效分离标本中的诊断和干扰成分（血液、黏液、杂质等），并通过程控离心将核浆比重的恶性细胞分离至最底层，使具有诊断意义的细胞富集，保证背景干净、有效细胞分布均匀，提高细胞涂片质量[9]。同时，沉降式液基细胞系统中配置的固定剂可以及时快速固定标本中的细胞，防止有效细胞自溶，并且经固定剂固定保存的细胞可以保持标本采集时的原始形态，染色更加鲜艳，核浆对比更清晰，能够满足有诊断意义的细胞数量和质量的要求。此外，沉降式液基细胞制片系统使用统计的标准化、自动化处理程序，制片过程不受人为因素干扰，效率更高，质量更好。相比之下，细胞涂片技术由于前期处理不充分，干扰成分较多，细胞分布不均，且易出现细胞重叠、散开等问题，切片质量相对较低。涂片厚薄如果控制不均或数量有差别，还会产生高背景着色，影响临床鉴别，易出现假阳性，导致误诊[10]。本研究将分别采用细胞涂片技术和沉降式液基细胞技术处理的切片置于显微镜下观察，发现沉降式液基细胞技术的制片质量优于细胞涂片技术，其细胞分布均匀，形态能保持原样，背景清晰，镜下观察更方便，与上述说法一致。细胞涂片质量的高低会直接影响良恶性细胞的检出率。采用沉降式液基细胞技术制作的切片有效细胞富集，分布均匀，核仁明显，核浆清晰，立体感强，更有助于结果判读[11-12]。而细胞涂片技术制作的切片背景杂质较多，细胞相对较少，分布不均，胞核模糊，核仁难辨，不利于结果的判读[13-19]。本研究结果显示，沉降式液基细胞技术鉴别胸腔积液良恶性的准确率高于细胞涂片技术（86·67% vs 62·22%，P＜0·05）。提示沉降式液基细胞技术诊断胸腔积液良恶性的效能更高。叶蓉[12]的研究显示，应用液基细胞学检测技术检测胸腔积液性质的检出率为86·76%，高于常规制片技术的检出率（P＜0·05），这与本研究结果一致。

综上所述，沉降式液基细胞技术的制片质量高于细胞涂片技术，能提高胸腔积液良恶性鉴别诊断的准确性，值得临床应用。但本研究也存在不足，如纳入的研究样本较少，结果可能存在误差，无法为临床提供更为详实的数据参考，后期可增加样本量继续进行研究。此外，本研究观察的指标有限，仅比较了两种检查方式诊断胸腔积液良恶性的准确率，未比较两者的敏感度和特异性，后期需要继续进行深入研究，为胸腔积液的临床诊疗提供更有效的参考。