巨细胞病毒活动性感染患儿NK细胞及GGT水平与HCMV DNA的相关性

张瑜 郭轲 刘道路

人巨细胞病毒(HCMV)主要在人体内传播,大部分人群都存在HCMV感染,但多呈潜伏性感染,几乎没有临床症状,也基本不会发生长期携带、反复感染的情况[1]。当合并免疫抑制疾病或免疫力下降时,自然杀伤(NK)细胞功能减弱,可能引发HCMV活动性感染[2]。HCMV可存在于血液、尿液、唾液腺、乳汁等中,婴幼儿感染HCMV主要是通过母婴传播、哺乳等途径[3]。HCMV活动性感染患儿可能会出现呼吸道感染、腹泻、心肌损伤、疱疹性咽峡炎等症状,损害肝胆、中枢神经、呼吸系统等,而肝脏是其主要靶器官[4]。本研究旨在探讨HCMV活动性感染患儿NK细胞及γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平与HCMV-核酸(DNA)的相关性。

资料与方法

一、纳入标准

(一)巨细胞病毒活动性感染参照相关标准进行诊断[5];(二)均为1岁以下的婴儿;(三)患儿家属签署知情同意书。

二、排除标准

(一)合并自身免疫性疾病;(二)其它病毒感染,如流感、肝炎、疱疹、风疹等病毒感染;(三)有遗传代谢性疾病;(四)近期服用过影响肝功能的药物。

三、一般资料

选取2021年6月—2022年6月濉溪县医院收治的150例HCMV活动性感染患儿纳入研究对象,根据HCMV DNA水平将患儿分为低载量组(n=52)、中载量组(n=64)、高载量组(n=34),另外选取我院同期50名健康婴儿作为对照组。在研究开始前上报至我院医学伦理委员会,经开会讨论后批准实施(2021-21号)。

四、方法

比较低载量、中载量、高载量HCMV活动性感染患儿及健康婴儿的一般资料。入院后采集所有婴儿空腹静脉血,检测天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、GGT,检测仪器为盛世东唐DT480全自动生化分析仪,试剂盒由阿里生物技术泰州有限公司提供;采用厦泰生物Cytek Aurora流式细胞仪检测NK细胞百分比;收集婴儿新鲜尿液,采用实时荧光定量PCR技术检测HCMV DNA载量。

五、统计学方法

结 果

一、4组一般资料比较

4组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 4组一般资料比较[n(%),±s]

二、4组肝功能指标及NK细胞比较

4组AST、ALT、ALP、TBA比较无明显差异(P>0.05);GGT、NK随HCMV DNA载量升高而上升(P<0.05)。见表2。

表2 4组肝功能指标及NK细胞比较(±s)

三、肝功能指标及NK细胞与HCMV DNA的相关性分析

经相关性分析,AST、ALT、ALP、TBA与HCMV DNA无明显相关性(P>0.05);NK细胞、GGT与HCMV DNA呈正相关(P<0.05)。见表3。

表3 肝功能指标及NK细胞与HCMV DNA的相关性分析

讨 论

HCMV具有亲肝特性,HCMV感染可促使花生四烯酸分泌,经环氧合酶催化生成反应性氧物质,激活非活性状态的核因子-κΒ,并促进其与免疫、炎症相关的病毒、基因表达,导致炎症反应发生,损害肝细胞[6]。病毒复制活跃程度可通过HCMV DNA载量这一指标体现,HCMV DNA异常升高是病毒活动期的体现[7]。本研究结果显示,HCMV活动性感染患儿肝功能指标均有一定程度的升高,提示HCMV活动性感染患儿存在肝功能损伤,进一步探讨肝功能指标与HCMV DNA的相关性发现,AST、ALT、ALP、TBA与HCMV DNA无明显相关性,表明肝损伤程度与HCMV复制的活跃程度不相关,与李迪等[8]的研究结果较为一致。GGT反映的是患儿的胆汁淤积情况,较为灵敏,也可以用于HCMV活动性感染患儿预后的判断[9]。GGT与HCMV DNA呈正相关,谢而付等[10]的研究也得出了相似的结果,这可能是因为HCMV侵犯网状内皮系统后,肝细胞、胆管内皮细胞发生变性水肿,使胆道被阻塞,GGT无法经胆道排泄出体内,逆流进入血液中,从而使血液GGT水平上升。

HCMV的发病与免疫功能相关,机体免疫系统不成熟时,HCMV容易被激活,引起HCMV感染,婴幼儿免疫力较低,体内NK细胞数较正常人明显偏低,因此发生HCMV活动性感染的风险较高。NK细胞在细胞免疫和抗HCMV感染中具有重要作用,NK细胞可以检测主要组织相容性复合物Ⅰ类的下调,对于细胞因子的表达也有促进作用,产生穿孔素、蛋白酶颗粒B等细胞毒性颗粒来清除产生感染的细胞,终止HCMV感染。HCMV感染反过来又可以影响NK细胞的功能,且有研究显示[11],HCMV特有的免疫逃避机制对免疫应答有抑制作用,机体内的病毒不能被完全清除,形成HCMV潜伏感染。HCMV与Toll样受体3有一定的关系,可能通过激活这一通路使炎症反应加重,并引起免疫应答,这可能是HCMV影响免疫功能的一个新的方向[12]。本研究中,4组NK细胞水平存在显著差异,且NK细胞与HCMV DNA呈正相关,与陈友华等[13]的研究结果有一定不同,该研究显示,正常对照组、HCMV DNA阴性及阳性组NK细胞比较均无明显差异,病毒载量与疾病严重程度相关,分析原因可能是与病例的选择及分组方式有关。

综上所述,HCMV活动性感染患儿存在肝损伤及免疫抑制,但HCMV复制活跃程度与肝损伤程度无关,与免疫功能有关。

利益冲突声明：所有作者均声明不存在利益冲突。