中性粒细胞载脂蛋白、D-二聚体在儿童重症细菌性脓毒症早期诊断中的临床应用价值研究

黄钜振 廖友明 利汉其 白翠芬

脓毒症属于机体器官功能性障碍综合征, 按照病情的严重程度可分为脓毒症、严重脓毒症、脓毒性休克,是儿童常见的危险系数较高的疾病［1］。有学者研究表明, 脓毒症患儿病死率在4%～50%, 而对于严重脓毒症、脓毒性休克患儿病死率＞30%, 且死亡患儿多发生于治疗早期［2］。另一方面, 脓毒症的感染病原体主要包含细菌与病毒, 不同病原体感染的治疗方法存在差异, 早期的干预治疗与患儿最终结局密切相关［3］。因此, 脓毒症的早期鉴别诊断极为重要, 可降低患儿病死率, 减轻患儿器官功能损伤。目前临床脓毒症的早期鉴别诊断主要以3 个炎症指标CRP、PCT、WBC 为主, 其中CRP 敏感度较高, 但特异度较低, PCT 敏感度、特异度均不高, CRP 反应较慢［4］。HNL 是近年新兴的炎症指标, 在正常人体中呈现出低表达, 经病毒感染后呈小幅度上升, 经细菌感染后呈大幅度上升［5］。D-D 是交联纤维蛋白经纤溶酶溶解而形成的降解产物, 可反映继发性纤维蛋白溶解功能［6］。目前, 我国对于HNL 的应用研究较少, D-D 在临床中主要用于肺栓塞等纤溶系统疾病, 基于此, 本院探讨了HNL、D-D 在儿童重症细菌性脓毒症早期诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2023 年1～9 月本院收治的30 例重症细菌性脓毒症患儿作为研究组, 另选同期30 例普通细菌性脓毒症患儿作为对照A 组, 30 例普通细菌感染患儿作为对照B 组。研究组、对照A 组纳入标准：①根据2020 版儿童脓毒性休克和脓毒症相关器官功能性障碍管理指南［7］诊断为重症细菌性脓毒症或普通细菌感染患儿。研究组、对照A 组排除标准：①合并恶性肿瘤患儿；②有严重心肝肾功能不全、自身免疫系统疾患及结缔组织病；③14 d 内有手术史患儿；④严重创伤及应激状态患儿及因各种因素不能配合研究患儿；⑤合并先天畸形患儿。对照B 组纳入标准：①患儿性别、年龄等一般资料与研究组患儿比较无统计学意义；②随机选取呼吸系统、消化系统等常见普通细菌感染患儿。对照B 组排除标准：①合并脓毒症、重症脓毒症患儿。其中研究组男性18 例, 女性12 例；年龄最小8 个月, 最大6 岁, 平均年龄(3.15±0.71)岁。对照A 组男性16 例, 女性14 例；年龄最小6 个月,最大6 岁, 平均年龄(3.01±0.67)岁。对照B 组男性17 例, 女性13 例；年龄最小6 个月, 最大6 岁, 平均年龄(3.23±0.78)岁。经比较, 三组患儿一般资料无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 所有患儿入院后收集其静脉血、适量, 静置30 min, 2000 r/min 离心15 min, 如上层浑浊继续离心10 min, 取上层清液保存于-80℃冰箱中。使用迈锐流水线M6000(免疫透射比浊法)检测研究对象的CRP、PCT 水平, 使用迈瑞血球流水线CAL-8000(量子点免疫荧光层析法)检测研究对象的WBC 水平, 使用迈锐流水线M6000(IFCC法)检测研究对象的AST、ALT水平,使用迈锐流水线M6000(紫外-谷氨酸脱氧酶法)检测研究对象的BUN 水平, 使用迈锐流水线M6000(脱氧酸氧化酶法)检测研究对象的血清Cr 水平, 使用安图实验仪器PHOMO 型酶标仪(酶免疫分析法)检测研究对象的HNL 水平, 使用德国CS-5100 型自动凝固分析仪及其配套试剂(免疫比浊法)检测研究对象的D-D水平。

1.3 观察指标 比较三组患儿的HNL、D-D、CRP、PCT、WBC、AST、ALT、BUN、Cr 水平。

1.4 统计学方法 采用SPSS23.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 两组间比较采用t 检验, 多组间比较采用方差分析(F 检验)；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患儿的HNL、D-D、CRP、PCT、WBC 比较三组患儿的WBC 水平比较无统计学差异(P＞0.05)；对照A 组患儿的CRP 水平与对照B 组患儿比较无统计学差异(P＞0.05)；研究组患儿的HNL、D-D、CRP、PCT 水平均高于对照A 组与对照B 组, 对照A 组患儿的HNL、D-D、PCT 水平均高于对照B 组, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 三组患儿的HNL、D-D、CRP、PCT、WBC 比较( x-±s)

2.2 三组患儿的AST、ALT、BUN、Cr 比较 研究组患儿的AST、ALT、BUN、Cr 水平均高于对照A 组与对照B 组, 对照A 组患儿的AST 水平高于对照B 组,差异有统计学意义(P＜0.05)；对照A 组患儿的ALT、BUN、Cr 水平与对照B 组患儿比较无统计学差异(P＞0.05)。见表2。

表2 三组患儿的AST、ALT、BUN、Cr 比较( ±s)

表2 三组患儿的AST、ALT、BUN、Cr 比较( ±s)

注：与研究组比较, aP＜0.05；与对照A 组比较, bP＜0.05

组别例数AST(U/L)ALT(U/L)BUN(mmol/L)Cr(μmol/L)研究组3093.82±8.56193.67±11.5015.75±4.06179.26±16.35对照A 组30 42.58±6.91a 34.78±4.13a 4.48±1.47a 77.40±11.76a对照B 组30 29.77±3.72ab 32.39±4.89a 3.71±1.28a 75.57±6.24a F 766.5674439.148201.5741575.232 P 0.0000.0000.0000.000

3 讨论

脓毒症是常见的儿童危重症疾病, 绝大多数为细菌病原体感染, 其中重症脓毒症患儿死亡率较高, 早期诊断、治疗是病情进展至严重脓毒症、脓毒症休克并导致死亡的重要因素之一［8］。有学者研究表明, 血清HNL 可作为辅助诊断儿童细菌感染生物标志物, HNL鉴别细菌感染的灵敏度、特异度均优于CRP、PCT 等传统指标［9］。D-D 对普通感染的灵敏度、特异度较低,但当发生脓毒症等严重感染时D-D 会升高, 且与患者的病情严重程度呈正相关, 但对于细菌感染鉴别的灵敏度、特异度较低。基于此, 本研究探讨了重症脓毒症、普通脓毒症以及普通感染非脓毒症患者的HNL、D-D水平, 以探讨HNL、D-D 对于鉴别细菌性脓毒症及病情严重程度的应用。

本研究结果显示, 三组患儿HNL、D-D 比较有显著差异(P＜0.05), 且病情越严重, HNL、D-D 水平越高, 这提示了HNL、D-D 对于鉴别细菌性脓毒症及病情严重程度有一定辅助作用。HNL 主要在人体中性粒细胞中表达, 属于铁载体结合蛋白, 而细菌进入人体后需要铁离子维持, 因此细菌进入人体后免疫系统会刺激HNL 分泌, 从而减少铁载体, 抑制细菌在人体中生长［10］。Leticia 等［11］学者研究表明, 在人类与非人类的样本中, 细菌和非细菌感染宿主HNL 均存在较大差异, HNL 对于细菌诊断鉴别具有较高性能。目前,临床缺乏公认的HNL 正常范围, 在一份126 例健康儿童的研究中, 1～8 岁儿童的HNL 平均水平为(40.8±13.6)ng/ml, 这一数据显著低于本研究中三组患儿, 再次证实机体遭受细菌入侵后, HNL 会异常升高［12］。D-D是纤维蛋白纤溶产物, 主要反映凝血状态, D-D 升高表明机体凝血系统被激活, 循环血液中成分淤积, 因此D-D 常用于评估心血管类疾病［13］。但在严重感染情况下, 人体凝血、纤溶紊乱, 亦可能导致血液循环受阻。对于脓毒症患儿, 机体的炎症反应机制会对血管内皮细胞造成损伤, 引起组织因子释放, 导致人体凝血、纤溶紊乱, 因而D-D 升高［14］。周利娟等［15］学者研究表明, 随着脓毒症病情严重程度的增加, 微循环受阻现象逐渐加剧, D-D 随之升高, 与本研究结果(研究组患儿的D-D 水平显著高于对照A 组)相同。

综上所述, HNL、D-D 有助于重症细菌性脓毒症、普通细菌性脓毒症、普通细菌感染患儿的早期鉴别诊断。另一方面本次研究也存在不足之处：①本次研究涉及的样本量太少, 研究结果可能具有偶然性；②本究仅涉及患儿入院后的指标考察, 未涉及患儿预后指标考察。后续应扩大样本量并进一步探讨HNL、D-D 与脓毒症患儿预后的关系。