鸡传染性法氏囊炎的流行特点及诊治

陈利平

两当县云屏畜牧兽医站,甘肃 两当 742400

0 引言

法氏囊是鸡的一个免疫器官。传染性法氏囊炎最主要的特征是引起免疫抑制,严重削弱鸡的身体免疫,所以感染该病的鸡抵抗力会非常低,容易感染大肠杆菌、球虫等,增加鸡的死亡率。因此对传染性法氏囊炎的流行特点以及诊治手段进行分析是十分必要的,能够更好地预防该病,提升治愈率,减少该病带来的经济损失,推动鸡养殖产业实现稳定发展。

1 鸡传染性法氏囊炎病原学

鸡传染性法氏囊炎的致病原是鸡传染性法氏囊炎病毒,这种病毒为双链RNA病毒,病毒粒子大小为55～75 nm,周围不存在囊膜,主要由核芯与外壳组成。鸡传染性法氏囊病毒形态不一,有的形状是卵圆形,有的形状是六边形。鸡传染性法氏囊炎病毒对外界的抵抗力较强,尤其是对乙醚、氯仿等有着较强的抵抗力,可以在酸性(pH=3)、中性(pH=7)、弱碱性(pH=7.5)条件下存活,在碱性条件下(pH=12)会失活。鸡传染性法氏囊炎病毒不耐高温,但对低温条件有着较强的耐受性。在-58 ℃条件下,鸡传染性法氏囊炎可以存活长达18个月。鸡传染性法氏囊炎病毒还可以抵抗紫外线照射,但在石炭酸溶液中,30 min可以灭活。

2 流行特点

鸡传染性法氏囊炎具有明显的季节性发病,尤其6、7月份是鸡传染性法氏囊炎的发病高峰期,此时的天气高温多雨,湿气较大,容易发病。鸡传染性法氏囊炎通常是突然发病,且短时间内大范围传播,一旦鸡群内出现了感染个例,1～2 d整个鸡群即可全部感染,第3天开始出现死亡病例,如果后续不及时进行治疗,死亡数量将会不断增加,5～7 d可达到死亡高峰。鸡传染性法氏囊炎除了会接触性传播,还会通过被污染的水、饲料、饲养工具等进行间接传播,或通过种蛋进行垂直传播,且小粉甲虫也是鸡传染性法氏囊炎的传播媒介。该病的发病日龄在不断增长,以往3～10日龄鸡具有较强的易感性,当前180日龄的鸡也会感染鸡传染性法氏囊炎[1]。以往各品种的鸡是鸡传染性法氏囊炎病毒的天然宿主,但近年来临床上也出现了鹅、鸭等禽类感染鸡传染性法氏囊炎或者携带致病病毒。鸡传染性法氏囊炎的非典型病例的数量在不断增加,并且这种疾病容易反复出现,即使对发病鸡注射抗体,依然会有复发的可能性。在同一个鸡场内,不同批次的鸡存在相继发病情况。

鸡传染性法氏囊炎带来的危害不仅体现在疾病本身,还会严重削弱鸡的身体免疫力,致使各种疫苗免疫应答遭受负面影响,严重时还会导致其他疾病疫苗免疫失败。因为该疾病具有较强的免疫抑制功能,所以导致鸡很容易继发感染其他疾病,增加病鸡的死亡率。

3 症状表现

鸡传染性法氏囊炎潜伏期为2～3 d,发病初期,病鸡精神沉郁,有自啄肛门的表现,食欲减退,身体消瘦,羽毛杂乱、失去光泽,病鸡喜卧、嗜睡。发病后期病鸡开始出现腹泻症状,排便呈水样,粪便颜色为黄色或者白色,一般间隔20～30 min排1次便。病鸡的颈部、身体出现不受控制的震颤,走路摇摇晃晃,头部下垂,眼睑闭合,随着排稀便次数的增加,病鸡会出现脱水症状,眼窝深陷,最终病鸡会因为身体衰弱或者继发感染其他疾病而死亡。急性感染鸡传染性法氏囊炎的病鸡,通常会突然发病,病鸡精神萎靡不振,食欲废绝,经常性缩颈,饮水量明显增加。急性发病的鸡在1～2 d后,就会死亡。

4 病理剖检

对病死鸡进行剖检可以发现,病死鸡脱水情况严重,身体消瘦明显,腿部、胸部的肌肉存在出血情况,腺胃、肌胃交界处可以发现有条状的出血点,肾脏颜色苍白,明显肿大,肾小管与输尿管明显扩张,输尿管内有尿酸盐潴留,脾脏呈轻度肿胀,在脾脏表面可以发现有呈弥散性分布的坏死性病灶,病灶的颜色为灰色。病死鸡法氏囊病变最为明显,可以发现法氏囊内部的黏液增多,整体出现明显的水肿现象,并伴有出血情况,且表面覆盖有胶样渗出物,颜色为黄色。法氏囊体积与重量异常增大,与正常法氏囊相比,增大了约2倍[2]。

5 诊断

5.1 病毒分离鉴定

先获取病死鸡样本,样本来源可以是病死鸡的法氏囊、脾脏组织,在无菌条件下将样本进行磨碎处理,然后加入肉汤与灭菌生理盐水,二者比例为1：5,制作成悬液,随后对悬液进行离心沉淀,取上层清液后,加入1 000 IU/mL青霉素与1 000 IU/mL链霉素,间隔6 h后,取上层清液,然后通过绒毛尿囊膜,接种到10日龄鸡胚之中。一般情况下,接种标准毒株的鸡胚,会在3～5 d死亡,而鸡传染性法氏囊病毒的变异株,一般对鸡胚不具备致死性。对接种标准毒株的阳性对照鸡胚进行解剖后,可以发现鸡胚的个头较矮小,整体充血明显,在趾关节与大脑部位,可以发现有明显的出血斑点,鸡胚的肝脏坏死明显,肝脏的颜色较淡,类似熟肉样;对接种变异毒株阳性对照鸡胚进行剖检后,可以发现鸡胚大脑与腹部皮下存在明显的水肿情况,鸡胚的整体发育比较迟缓,鸡胚的颜色呈奶油色,肝脏常有胆汁着色,有的肝脏坏死比较明显,鸡胚的脾脏异常肿大,颜色没有明显的变化。在阴阳性对照成立的情况下,如果样品病变与阳性对照结果相同,则判定为样本鸡传染性法氏囊炎病毒疑似阳性,需要收集病料,采用其他方法进一步确诊。

5.2 血清学试验

采用血清学试验诊断方法对鸡传染性法氏囊炎进行诊断,优势在于特异性较强,阳性检出率较高。常用的血清型试验方法如下。

5.2.1 琼脂免疫扩散试验

该试验在无菌条件下对样本进行静脉采血,采血量为1 mL,然后分离血清进行检测。在检测时,采用单梅花孔方法进行打孔,在中央孔内,滴加标准阳性抗原,在外侧两孔内,滴加标准阳性血清,然后温育24 h,最后根据沉淀线的位置与形状,完成阳性、阴性以及可疑结果的判定。如果判定可疑结果,后续还需要复检。

5.2.2 直接免疫荧光试验

该试验采用法氏囊组织作为样本,对样本进行压片处理。先采用丙酮进行固定,再进行冲洗风干,并滴加荧光抗体,注意抗体需要经过稀释,在经过温浴、水洗风干处理后,采用显微镜进行观察。如果看到淋巴细胞呈现出“光轮”样结构,胞浆出现了特异性荧光,说明结果是阳性[3]。如果无荧光,说明结果是阴性。

5.2.3 酶联免疫吸附试验

该试验方法的优点是操作简便,可以实现批量检测。在实际检测时,可以从市场上购买商品化试剂盒,根据试剂盒说明进行检测操作,并做好最终的结果判定。

5.3 分子生物学方法

分子生物学检测诊断方法,包括RT-PCR、实时荧光RT-PCR法,可以采用病死鸡法氏囊组织作为检测样本。

5.3.1 RT-PCR扩增

在检测时,需要对鸡传染性法氏囊炎病毒的VP2和VP1基因A、B这2个片段进行扩增,同时在引物序列中,还需要引入合适的酶切位点,为测序带来方便。在检测诊断结果判定方面,如果A、B这2个片段同时被扩增,说明检测结果为阳性,如只出现一个片段阳性,另一个片段阴性,说明诊断结果可疑,需要对样品进行复测,后续复测如果A和B这2个片段任何一条阳性,则判阳性,否则为阴性。如果A、B这2个片段没有被扩增,说明检测结果也是阴性。

5.3.2 实时荧光RT-PCR扩增

在完成检测样本核酸提取工作后,可以直接从市场上购买商品化试剂盒进行检测,还可以选择自行合成引物与探针,在确定目的基因后,开展实时荧光PCR扩增检测。这种检测诊断方法比RT-PCR方法敏感性与特异性更强。

6 治疗方法

发病鸡采用高免蛋黄液进行肌内注射治疗,用药剂量为1.5～2 mL/只,病重的鸡可次日重复注射1次。为防止出现细菌感染,可以在高免蛋黄液中加入青霉素4万IU、链霉素3万IU一起注射,可以提升鸡的抵抗力,治疗效果显著。或采用复方炔酮药物进行治疗,按体质量进行用药,用药量为按0.5 kg喂服1片药,灌服1次/d,连续用药3～5 d,可以起到良好治疗效果。或采用丙酸睾酮肌内注射治疗,3～7周龄的鸡用药5 mg/只,且仅注射1次。或采用速效管囊散药物进行治疗,按体质量用药0.25 g/kg,或将药物混入饲料中或直接口服,服药后8 h即可见效,连续用药3～5 d,能够起到良好的治疗效果。或采用盐酸吗啉胍药物进行治疗,可以选择8片(每片0.1 g)药物拌入1 kg鸡饲料,在此基础上,还可以在鸡的饮水中加入板蓝根冲剂15～20 g,供鸡半日饮用,连用3～5 d,可以起到良好的治疗效果。除了采用上述药物进行治疗外,还应注意在治疗期间为鸡提供充足的饮水,还可以在饮水中添加5%葡萄糖、0.1%维生素或水中加口服补液盐,目的是预防鸡脱水,提高鸡的抗病能力。为了减轻鸡的肾脏负担,还可以采用0.2%肾肿解毒药饮水,同时将饲料中蛋白质含量降低至15%左右,维持10～15 d,能够起到更好的治疗效果。

7 鸡传染性法氏囊炎预防

7.1 坚持自繁自养

由于鸡传染性法氏囊炎既可以水平传播,也可以垂直传播,且该疾病的病毒对外界有着较强的适应性,可以长时间在外界环境中存活,所以为了提升预防效果,在尚未发生鸡传染性法氏囊炎的鸡舍,应坚持自繁自养,杜绝外部鸡传染性法氏囊炎病毒的引入,降低养鸡损失。

7.2 做好卫生消毒工作

应加强卫生消毒工作,灭杀鸡舍内的细菌病毒。一方面,定期做好鸡舍卫生清洁工作,将鸡粪清除,运往外部高温发酵处理,可以实现肥料转化利用;另一方面,加强对鸡舍消毒工作,对尚未发生鸡传染性法氏囊炎的鸡舍,采用广谱消毒药喷洒即可。针对已经出现鸡传染性法氏囊炎的鸡舍,需要将鸡只全部出栏,然后对鸡舍进行全面消毒,并将饲养用具清洗干净,然后用2%～4%火碱喷洒1次。同时,整个鸡舍采用高锰酸钾15 g、甲醛30 mL进行熏蒸,密封48～72 h后,再打开门窗通风换气。在重新引入鸡前3 d,再采用广谱消毒药全面喷洒消毒1次,能够有效预防鸡只再次感染发病。

7.3 加强免疫预防

结合当地传染性法氏囊炎流行特点、饲养条件、鸡群状况等,制定合理的免疫程序。需要确定首免日龄,可以在琼脂双向扩散试验的帮助下,按照0.5%的比例进行采样,收集鸡群血清,然后采用标准法氏囊病毒抗原测母源抗体,确定首免日龄。如果1日龄抗体阳性率小于80%,应在10～15日龄进行首免。如果抗体阳性率在80%以上,可以在7～10日龄再采血复检1次。如果阳性率在50%以内,选择15～20日龄首免,若抗体阳性率高于50%,可于20～24日龄首免。在生产实践中,有的鸡首免后2～5 d,没有进行二次免疫接种,从而出现了感染发病情况。所以在第1次免疫接种后,注意间隔一段时间再进行第2次免疫。如果鸡的母源抗体偏低,再加上雏鸡接种免疫传染性法氏囊炎采用的是饮水法,很容易造成鸡群内抗体水平不一,不利于提升鸡群抗感染能力,因此在进行接种免疫预防时,可以适当提前免疫的时期,最好配用灭活疫苗,一对一进行免疫,选择的免疫疫苗为弱毒苗或中等毒力苗,针对有母源抗体的雏鸡,可以选择中等毒力的疫苗,反之,则需要选择弱毒疫苗,再进行二次免疫时,统一采用中等毒力的疫苗,能起到更好的免疫预防效果。

8 结束语

在鸡养殖过程中,鸡传染性法氏囊炎是一种常见的疫病,如果防治不及时,极易提高鸡的死亡率,从而带来严重的经济损失。因此,应加强对鸡传染性法氏囊炎的诊断、治疗与预防,早预防、早发现、早治疗,从而减少鸡传染性法氏囊炎造成的影响,提升养殖效益。