石菖蒲麸炒工艺研究

姚云峰 徐继业 张秀婷

1.山东省淄博市中医医院，山东 淄博 255300；2.齐鲁医药学院，山东 淄博 255300

石菖蒲为天南星科菖蒲属植物石菖蒲(Acorustatarinowii)的干燥根茎，又名山菖蒲、药菖蒲、菖蒲叶、水剑草等，气芬芳，性味辛、苦，归心、胃经，有开窍豁痰、醒神益智、化湿开胃等功效，可用于治疗神昏癫痫、健忘失眠、耳鸣耳聋、脘痞不饥、噤口下痢等[1]。石菖蒲化学成分主要包括苯丙素类、萜类等挥发性成分和生物碱类、黄酮类、有机酸等非挥发性成分[2]。

石菖蒲作为醒神益智、豁痰开窍要药，临床用药较为广泛，文献研究[3]发现石菖蒲在临床上主要用于治疗老年痴呆、痰厥、中风失语、癫痫等病。且在相关研究[4]统计中表明，在治疗老年痴呆症的中药方剂中，石菖蒲的使用频次最高。但目前对于石菖蒲的研究主要集中于挥发油类成分，该成分是石菖蒲化湿开胃的主要药效成分[5-9]；有研究[10]表明石菖蒲中含有的生物碱成分菖蒲碱等具有改善记忆的作用，推测可能是醒神益智的主要药效成分。但是目前对于其醒神益智药效成分研究较少，存在临床研究与科学基础探究脱节现象。

麸炒作为石菖蒲常用炮制方法，在炮制后其燥性(用药副作用)降低，挥发油含量发生变化[11]，但其炮制后的醒神益智功效研究未见报道，因此本实验以醒神益智主要药效成分总生物碱的含量变化为指标，进行麸炒石菖蒲工艺考察，以期阐述炮制前后石菖蒲的生物碱含量变化规律，并探究其最优炮制工艺。

1 仪器与材料

1.1 主要仪器 UV2550紫外分光光度计(日本岛津有限公司)；HH-2数显恒温水浴锅(常州普天仪器制造有限公司)；SHB-3A真空水泵(郑州杜甫仪器厂)；MP-CJ32Wok503双档调温炒锅(广东美的生活电器制造有限公司)；ND757分析天平(广东蓝德电子科技有限公司)。

1.2 试验材料 天南星科植物石菖蒲的生品(甘肃康乐药业有限公司)；麦麸(江西江中中药饮片有限公司)；雷氏铵盐(烟台远东精细化工有限公司)；95%无水乙醇(烟台远东精细化工有限公司)；丙酮(天津市科密欧化学试剂有限公司)。

2 方法与结果

2.1 总生物碱含量测定

2.1.1 雷氏铵盐制备 精密称取雷氏铵盐2.000 g，用蒸馏水溶解并定容于100 mL容量瓶中，即可制备成2%的雷氏铵盐溶液，做到现配现用。

2.1.2 供试品溶液的制备 取麦麸石菖蒲，粉碎过60目筛。称取50.0 g，加入95%浓度的乙醇回流提取2次，合并提取液蒸发浓缩至浸膏状。在浓缩物中加入0.1 moL/L 10 mL盐酸溶解。过滤，用0.1 moL/L的盐酸洗涤并定容至25 mL的容量瓶中。吸取定容溶液10 mL于锥形瓶中，加入0.1moL/L的盐酸10 mL，在缓缓滴加新鲜配置的浓度为2%的雷氏铵盐溶液10 mL，放置冰箱过夜，再布氏漏斗抽滤，沉淀用10 mL冰水分次洗涤至无色，抽干，所得沉淀用丙酮溶解再10 mL容量瓶中定容，得到总生物碱含量。

2.1.3 精密度试验 取石菖蒲粉末30.0 g，按照上述方法平行测量吸光度6次，计算RSD值(RSD<5%)。具体结果见表1。

表1 精密度试验

2.1.4 稳定性试验 精密量取各供试品溶液放置，每隔1 h测定1次吸光度，连续6 h，计算RSD值(RSD<5%)。具体结果见表2。

表2 稳定性试验

2.1.5 重复性试验 取石菖蒲粉末6份，每份50.0 g，按照上述方法测量吸光度，计算RSD值(RSD<5%)。具体结果见表3。

表3 重复性试验

2.1.6 总生物碱含量测定方法 本试验采用雷氏铵盐法进行沉淀浓缩，紫外可见分光光度法进行含量测定。即利用雷氏铵盐在酸性介质中可与大部分生物碱类药物定量地生成难溶于水的铬合物。把生物碱的硫氰酸铬铵盐沉淀溶于丙酮中，所得的紫红色溶液在波长510 nm处有最大吸收，可得到公式W=AMV/ε。石菖蒲中含量较多的菖蒲碱甲(C17H13NO3)的相对分子质量为279，ε=106.5，是硫氰酸铬铵在丙酮中的摩尔分子吸收系数；V是溶解沉淀所取丙酮的毫升量；测其吸收度A，测可得到对应的含量W(mg)，故公式变为W=279VA/106.5。以此公式可测吸光度A，计算出石菖蒲总生物碱的含量。

2.2 麸炒石菖蒲炮制工艺研究

2.2.1 预实验 以性状为考察指标，预实验考察温度，炒制时间，麦麸用量，发现温度200 ℃以上，时间60 s以上，石菖蒲饮片表面逐渐呈焦黄或焦黑色，内部颜色加深，呈碳化状。总结单因素考察的温度范围应为120～180 ℃，炒制时间应低于60 s。

2.2.2 单因素考察

2.2.2.1 麸炒温度考察 石菖蒲炮制品的制备：取4份生品，每份50 g，分别于120 ℃、140 ℃、160 ℃、180 ℃，各加入麦麸7.5 g，炒30 s，取出，放凉，筛去麦麸。测定总生物碱含量，确定麸炒温度。见表4。

表4 麸炒温度考察结果

麸炒温度对生物碱含量的影响，由上表可知。在120～140 ℃之间，含量逐渐升高。到达140 ℃时为最值，若继续提高温度，含量则逐渐降低。因此140 ℃为最佳麸炒温度。

2.2.2.2 麸炒时间考察 石菖蒲炮制品制备：取4份生品，每份50 g，各加入麦麸7.5 g，于140 ℃下分别炒20 s、30 s、40 s、50 s，取出，放凉，筛去麦麸。

表5 麸炒时间考察结果

麸炒时间对生物碱含量的影响，由上表可知。在20～30 s之间，含量逐渐升高。到达30 s时为最值，若继续提高时间，因炒制时间提高，石菖蒲炮制品逐渐变为炒焦，测其含量变化，得到其含量会随之降低。因此30 s为最佳麸炒时间。

2.2.2.3 麦麸用量考察 石菖蒲炮制品制备：取4份生品，每份50 g，分别加入麦麸5%、5%、15%、20%，于140 ℃炒30 s，取出，放凉，筛去麦麸。测定总生物碱含量，确定麦麸用量。见表6。

表6 麦麸用量考察结果

麦麸用量对生物碱含量的影响，由上表可知。在5%～15%之间，含量逐渐升高。到达7.5 g时为最值，若继续增加麦麸用量，发现其生物碱含量并无特大变化。因此15%为最佳麦麸用量。

2.2.3 正交试验 由单因素实验结果可知，麦麸用量、麸炒温度、麸炒时间对石菖蒲中生物碱的含量均有较大影响，故以麦麸用量、麸炒温度、麸炒时间为考察因素，以总生物碱含量为指标进行正交试验。其因素水平表见表7，正交实验表见表8。

表7 试验因素水平表

表8 麸炒石菖蒲正交试验设计表

表8(续)

按照L9(34)正交表进行实验，试验方法如下。

1号样品：麦麸用量10%，麸炒温度120 ℃，麸炒时间20 s。

2号样品：麦麸用量10%，麸炒温度140 ℃，麸炒时间30 s。

3号样品：麦麸用量10%，麸炒温度160 ℃，麸炒时间40 s。

4号样品：麸炒用量15%，麸炒温度120 ℃，麸炒时间40 s。

5号样品：麸炒用量15%，麸炒温度140 ℃，麸炒时间30 s。

6号样品：麸炒用量15%，麸炒温度160 ℃，麸炒时间20 s。

7号样品：麸炒用量20%，麸炒温度120 ℃，麸炒时间40 s。

8号样品：麸炒用量20%，麸炒温度140 ℃，麸炒时间20 s。

按表安排制备样品，称取每份石菖蒲50 g，按试验条件分别炒制，采用红外非接触测温仪、秒表，依次控制辅料用量、麸炒温度、麸炒时间，去麸，放凉，置密闭容器内备用。

从表7、表8结果可以得出：3个因素对试验结果的影响程度为B>C>A，依次为麸炒温度、麸炒时间、麦麸用量。本试验结果表明，最优提取工艺应为 A1B2C3，即10%麦麸用量，麸炒温度为140 ℃，麸炒时间应为40 s。

2.2.4 验证试验 从生品石菖蒲中各取3份，以上述最佳炮制工艺进行麸炒。对炮制品进行总生物碱含量测定。结果记录见表9。

表9 麸炒石菖蒲新工艺验证试验结果

按照最佳炮制工艺进行实验，测得麸炒石菖蒲中总生物碱含量6.448 mg、6.451 mg、6.449 mg。取平均值得出生物碱沉淀量为0.12 mg/g。具体炮制工艺图如图1。

图1 石菖蒲麸炒炮制工艺流程图

3 讨论

石菖蒲饮片主要有生用、酒制、麸炒3种临床常用规格，麸炒石菖蒲的炮制工艺研究较少。目前，《河南省中药饮片炮制规范》2005年版中收载的石菖蒲的炮制方法为麸炒炮制[12]，其炮制过程参考药典炮制通则。在2020版《中国药典》中炮制通则中记载麸炒过程为先将炒制容器加热，至撒入麸皮即刻烟起，随即投入待炮炙品，迅速翻动，炒至表面呈黄色或深黄色时，取出，筛去麸皮，放凉(除另有规定外，每100 kg待炮炙品，用麸皮10～15 kg)。因此，本实验在预实验的基础上，结合性状与影响因素，在炮制过程中考察炒制温度、时间及麦麸用量，优选麸炒工艺，将炮制工艺参数具体化，以提高麸炒石菖蒲的质量，确保临床疗效。

石菖蒲经过麸炒后生物碱含量增加，分析认为由于麦麸中主要成分为膳食纤维、植酸和酚酸等，推测可能在加热过程中会促进石菖蒲中生物碱成分的溶出。同时有文章[13]报道通过对苦参不同炮制品中生物碱含量检测，结果表明麸炒苦参后生物碱的含量增加。炮制可以增效、减毒、改变药性、增加新成分、扩大药用范围等。通过对石菖蒲炮制前后生物碱含量变化与炮制工艺的探究，不仅为石菖蒲炮制品的质量标准研究提供了依据，还可为进一步阐述其炮制机理、临床应用提供理论支撑。