猪萎缩性鼻炎的诊断与防治

2023-12-24崔明哲

今日畜牧兽医 2023年10期

崔明哲

（承德市双滦区农业农村局 067000）

猪萎缩性鼻炎属于一种呼吸道传染病，虽然不会危及生命，但会对养猪业造成极为严重的经济损失，导致饲料的利用率降低，影响生猪体重增长，延迟出栏时间。为此，需加强AR 的诊断，并根据诊断结果，采取针对性的防治措施，降低该疾病的不良影响。故研究此项课题，具有十分重要的意义。

1 病原

AR 病原菌主要分为支气管败血波氏杆菌和产毒性巴氏杆菌，前者只对幼仔猪具有致病作用，而成年猪基本不产生病变，只是起到传染源的作用。但如果猪舍内的氨气浓度超标，或是携带其他真菌，都有可能加重病变。而后者能够感染各年龄猪，引发鼻甲骨萎缩病变。

2 流行病学与临床症状

AR 本身属于一种慢性传染病，由于病原体存在一定的差异性感染，发病的实际情况也不一致。比如：支气管败血波氏杆菌会造成3 周龄的猪发生鼻甲骨萎缩，而1 周龄内的猪在感染时则会产生严重病变，至于6 周龄以上的猪，则基本不会出现病变。同时感染猪还会伴随一定的肺炎，若感染数量较多，则猪群会集体呈现生长迟滞的问题。产毒性巴氏杆菌则会感染各年龄的猪，引发鼻甲骨萎缩。在发病猪群中，许多成年猪均未出现临床症状，但鼻腔内的带菌率极高，其主要传播方式以飞沫传播为主，被污染的工具、鞋子都可能成为传播源，一旦猪群感染，往往难以有效清除。

至于AR 的临床症状则表现为：病猪流鼻涕、吸气困难，鼻中流出黏性脓液，病猪会因鼻部发痒，而出现摇头、拱地等行为。同时由于病猪会产生结膜炎，会反映出一定的流泪症状，并在眼角处形成泪斑。若因支气管败血杆菌引发，则低龄猪的鼻甲骨萎缩现象会更加严重，至于大龄猪的病变则相对较轻。而感染产毒性巴氏杆菌的病毒，则会在临床表现上出现一定的颜面变形，究其原因在于病猪感染后鼻腔骨骼会发生萎缩，进而使覆盖其上的皮肤以及皮下组织产生歪斜，最终造成猪的上下门齿无法正常咬合。同时萎缩性鼻炎的病猪大多患有肺炎，虽然单纯的猪萎缩性鼻炎不会引发生猪的死亡，但因为患病猪都存在一定的钙代谢障碍，因此会造成生长迟滞，进一步降低机体的抵抗能力，容易造成呼吸道病，最终造成养猪业经济的严重损失。若在观察过程中发现有一定数量的猪出现生长迟滞，则要第一时间借助病原鉴定完成病原学诊断。

3 诊断

本文以某地方城市的生猪养殖场作为研究对象，该养殖场为了进一步扩大养殖规模，在2017 年引进了3 月龄的断奶仔猪，共计20 头。在仔猪到场后养殖人员并未做好严格的隔离工作，便将其混群养殖，直至在饲养的一周后，猪群中陆续出现食欲降低、流鼻涕等现象。在发病初期，养殖人员认为只是猪的一种应激反应，而随着病情的不断加重，养殖人员发现共有29 头猪发病，且死亡3 头之后，养殖人员第一时间将患病猪进行隔离处理，并上报兽医站，采用抗生素治疗，但均未起到明显的改善效果。直至兽医到场后发现养殖场的疫苗免疫工作不到位，且猪群饲养密度偏高，之后，兽医将病灶第一时间带回试验室诊断[1]。

3.1 病理学诊断

经过对死亡猪的病理剖检后发现，死亡猪大多瘦弱，猪的面部存在一定变形，鼻端向一侧弯曲，抬起猪尸体的下颚部可以发现，鼻中隔正直，且鼻夹骨卷曲引发不同程度的萎缩，鼻中隔的弯曲不对称，少数病仔猪会发生肺炎病变。

3.2 病原学诊断

第一，病料的采取与处理，需要实施活体采样，利用酒精棉球预先消毒病猪鼻孔，并避免鼻孔残留酒精，影响病原分离。之后使用棉头拭子取样，若无法立刻接种培养基，则要将其放在试管内，并放在冰瓶送检。至于尸体采样，可在剖检后观察鼻夹骨的病变，使用灭菌棉拭子完成采样。

第二，细菌的分离培养，需要在含有新霉素的马丁琼脂平板上使用拭子完成。在细菌培养时采用的马丁琼脂平板，需要在37℃的环境下培养24 h 左右，并根据荧光结构挑选可疑菌落，完成移植鉴定。通常来说，巴氏杆菌的菌落直径大约在2 mm，表现为光滑、透明、菌落呈黏液状。在灯光较暗的室内使用显微镜扩大观察后发现，菌落具有特征性的灰红色光泽，即F0 类似菌落。

第三，特性鉴定，首先要鉴定支气管波氏杆菌，需要将分离的单个菌落划线接种在琼脂平板上，并在37℃的环境下培养45 h，之后才可完成下一步鉴定。支气管波氏杆菌本身属于球杆菌，在氧化后会表现为阴性。并且采用的接种糖管要在37℃的潮湿环境下培养5 d 左右，记录相关变化，才可开展MP 试验、定级试验，此类试验结果均为阴性。至于尿素酶试验则表现为阳性。而支气管波氏杆菌本身具备一定的运动性，在平板表面出现一定的膜状扩散生长，但在0.1%左右的琼脂半固体板上则只会在表层生长，不会出现扩散生长。根据菌相鉴定结果显示，支气管波氏杆菌的菌落相对较小，呈乳白色，不透明，使用铂金圈进行勾取时，会发现质地相对柔软，容易制成菌悬液，且菌落附近存在一定的溶血环。其次要进行巴氏杆菌的鉴定，该杆菌主要表现为阴性，杆菌两极染色，无运动性，对于可疑菌落可预先依照三糖铁半固体培养的生长特性，完成筛检之后再开展其他鉴定。将单个菌落以接种针的形式插入管底，由原位抽出，并在37℃的环境下培养18 h 左右。此类杆菌的特性主要表现为沿穿刺线生长，红色无菌膜，不变黑，对蔗糖、木糖不产酸。VP 试验、尿素酶试验以及明胶液化试验均表现为阴性，至于硝酸盐还原试验则表现为阳性。之后对其进行皮肤坏死能力检查，采用350 g 的健康豚鼠，在背部注射，但要注意不可损伤皮肤，利用1 mL 的注射器在皮内注射0.1 mL 的培养物，注射点需要与背中线保持1.5 cm 左右的间隔。设阳性参考株作对照，并在大腿肌肉注射1 mL 硫酸庆大霉素。在注射完成后，需进行72 h 的观察测量，经观察后发现，坏死区的直径为1 cm，仅红肿表现为阴性[2]。还要再次对多杀性杆菌的荚膜型完成鉴定，对于A 型菌株以及D 型菌株需分别采用透明质酸形成试验以及吖啶黄试验。前者的试验需要在马丁琼脂平板上进行，以直径2 mm 划出金黄色葡萄球菌，之后，在线的两侧取垂直方向，接种过夜培养物。设荚膜A 型、D 型巴氏杆菌作为参照物，在37℃的环境下培养20 h。其中A 型株的生长线主要在葡萄球菌线区附近，存在一定的生长抑制现象。至于D 型菌株则无明显的生长抑制现象。最后还要将多杀性巴氏杆菌在马丁琼脂板上完成24 h培养，刮取菌苔，使其悬浮在生理盐水中，取0.5 mL 细菌悬液与0.1%的吖啶黄蒸馏水混匀静置，发现D 型杆菌会在5 min 后产生自凝现象，伴随大量絮状物，使上液呈现透明，至于其他细菌则不会出现颗粒沉淀，表现为上液浑浊[3]。

3.3 血清学诊断

猪萎缩性鼻炎的血清学诊断现阶段只适用于多杀性杆菌感染诊断，至于支气管败血杆菌的诊断，则因为感染母猪可以将抗体传给仔猪，因此具体的血清诊断方法只适用未注射疫苗的仔猪。

先要做好试管凝集试验，从生物制品厂购买抗原以及阳性对照血清。至于被检血清则可从猪的耳静脉采取、制备，保证无蛋白凝固、无腐败气味。至于稀释液则要采取酸碱值为7 的磷酸盐溶液，具体配制方法为：称取1.2 g 磷酸钠，6.8 g 氯化钠，加蒸馏水至1000 mL，完成加热溶解。之后用滤纸过滤，实现高压灭菌。具体的试管凝集试验操作顺序为：完成被检血清以及阴性对照血清与阳性对照血清的比对，在56℃的水浴箱中进行30 min 左右的灭能，要求血清均采用口径为10 mm的小试管进行存储。加入缓冲盐溶液，在第一管中添加0.8 mL，其余各管均加入0.5 mL，并在滴管中实现血清的稀释均匀，将其移入第二管。重复相应操作，直至最后一管，弃去0.5 mL，保留稀释血清0.5 mL。通常来说，被检血清需要稀释到1︰80；加抗原，需要在各管中加入0.5 mL 的抗原，振荡混匀，将其放置在37℃的温箱中。之后将其放置在室温下，静置2 h 观察结果。在进行结果判定时，若液体透明，管内覆盖沉淀物，则证明菌体被完全凝集。若菌体略显浑浊，存在一定的凝集物沉淀，则证明有80%的菌体被凝集。若液体适度浑浊，管内有少量凝集沉淀物质，证明50%的菌体被凝集。若液体透明度不明显，则证明只有25%的菌体被凝结。若液体无任何沉淀物，则证明无菌体凝集。当抗原缓冲液对照管发生阴性反应，且阳性血清对照管存在一定滴度时，证明被检血清稀释度超过10，有50%的菌体被凝集。此时可判定为支气管波氏杆菌阴性反应血清[4]。

此外，要进行平板凝集试验，具体操作方式为：不对被检血清以及对照血清进行稀释，也无需完成加热灭能。需要在洁净的玻璃板上划分多个小格，之后，用1 mL 移液管加0.03 mL 的血清，并混合抗原血原液，摇动玻璃板，使两者充分混合，并在室温条件下放置2 min 左右。若室温环境不足20℃，则要适当延长静置时间。在此过程中要注意，每次平板凝集试验需要设定对照组，在结果判定时若规定时间内液滴出现颗粒状凝结物，则证明100%菌体被凝聚。若液体接近透明，则证明近80%的菌体被凝集。若液滴中的颗粒状基块显示较为迟缓，则证明只有50%的群体被凝集。如果液滴中液体浑浊，则证明有25%的菌体被凝结。若液滴无凝集颗粒，证明菌体无任何凝集[5]。

4 防治

4.1 免疫接种

根据实际调查显示，免疫接种是现阶段实现AR 控制的最佳手段，利用免疫母猪，可以使仔猪获得更好的被动保护，避免出现早期感染问题。通常来说，免疫的最佳时间取决于地方的流行程度，对于普通成年母猪来说，需要在耳后肌肉注射灭活苗2 mL。至于未接种疫苗的种猪则要在隔离180 d 后，完成两次免疫接种。现阶段，我国主要采取的AR 疫苗以Bb+Pm-D 型毒素疫苗、D 型类毒素疫苗为主。根据不同国家的大量试验显示，只有最纯化的类毒素才能有效刺激机体形成抗毒素，因此Bb+Pm-D 型毒素疫苗的效果最佳。

4.2 做好猪群管理

各猪场都需做好猪场的卫生防疫工作，适当调整猪群的饲养密度以及饲养方式，最大程度减少空气内的有害气体，改善猪舍的通风条件，保持猪舍干净整洁，控制好应激因素，并定期进行喷洒消毒液，降低发病概率。同时还要做好人员的学习教育，要求养殖人员掌握先进的防治知识，保证各项治理措施的有效落实。

4.3 坚持自繁自养

之所以频繁出现疫病，其本质原因在于猪只的频繁移运，因此猪场应坚持少进出的原则，坚决禁止从疫区引进生猪，并确保引入的种猪无疫病，直至隔离30 d后才可合群饲养。

4.4 实施药物预防

为了更好地预防AR，需要做好母仔链的传染控制，要求母猪在妊娠的最后一个月内在饲料中适当添加预防性药物，比如金霉素、泰乐菌素、弗兰尼考等。一般情况下，每吨饲料中的预防性药物量可设定为：强力霉素150 g，磺胺二甲嘧啶100 g，阿莫西林100 g，直至母猪产后的两周都应做到持续使用。3 周内的仔猪，则要坚持每周注射一次强力霉素。至于育成猪，同样可利用抗生素进行预防，持续时间大致在4 周左右，并依照国家的相关安全标准，按时停药。

4.5 AR 净化

现阶段，世界各国均启动了AR 根除计划，用以实现AR 的控制与净化。借助无特定病原猪生产技术，提高猪群的生产性能。但此类技术相对复杂，成本较高，容易使健康猪群二次感染，因此需要建立适合的生产体系，并进一步改进原有技术。而隔离早期断奶技术能够彻底切断母源性疾病，但由于操作相对简易，因此需要结合一定的防疫措施。虽然该方法存在极高的可行性，但仍值得进一步探究。在具体的实施过程中需要做好养猪场的病原学调查以及血清学调查，以此制定根除计划，并对阳性猪群实施病原菌的分离鉴定，确定适合的敏感药物。至于在治疗阶段则要严格限制猪只流动，加强猪场净化，注意敏感药物的更换，降低猪群的耐药性。