MCM10 在卵巢癌中的表达及预后评估价值

盛月华，毛美亚，郑筱娇，杜勇明，柴景灏

卵巢癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，发病率居妇科恶性肿瘤第三位[1]。由于部位较深和起病隐匿，70%的卵巢癌患者被诊断时已经是晚期，并且出现远处转移。多数患者在2 年内复发，复发的卵巢癌缺乏有效的治疗选择。因此，卵巢癌的死亡率在妇科恶性肿瘤中高居榜首[2]。卵巢上皮性肿瘤是卵巢癌最常见的病理类型，占卵巢恶性肿瘤的80%～95%。因此，寻找有效的肿瘤标志物并研究其在卵巢癌发生发展中的作用，对阐明卵巢癌的病因机制、诊断、预防和治疗具有重要意义。目前，对基因表达图谱（GEO）中卵巢癌基因表达的研究较多，已筛选出数千种可能参与卵巢癌发展的差异表达基因[3]。本研究基于生物信息学方法分析微小染色体维持蛋白10（MCM10）在卵巢癌中的表达，分析其与临床预后的关系，为卵巢癌的诊断和治疗提供新的靶点，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源 使用GEPIA 数据库（gepia.cancerpku.cn）、人类蛋白质图谱（Human Protein Atlas，HPA）数据库（http://proteinatlas.org） 分析MCM10在卵巢癌及卵巢癌相关细胞株中的表达水平，分析卵巢癌中MCM2-MCM7 与MCM10 表达的相关性。利用在线网站Kmplot 数据库（http://kmplot.com） 分析在基因芯片中MCM10 基因的表达与卵巢癌预后的相关性。

1.2 方法 在线GEPIA数据库分析中，基于单基因分析卵巢癌组织和正常卵巢组织中MCM10 表达水平，选择“Expression DIY”，输入MCM10 基因名称，选择“OV”（卵巢癌）数据库，｜Log2FC ｜截断值设置为1.0，P 值设置为0.01；选择“Correlation”，分析MCM10 与其他MCMs 家族的相关性。在人类蛋白质图谱数据库中，输入MCM10 基因名称，选择“cell line”中的“Ovarian cancer”，分析MCM10 表达水平。在线Kmplot数据库中，通过运行R软件（4.1.3 版本）“limma”包和“survival”包分析MCM10 在卵巢癌队列中的表达水平及与总体生存率的关系。

1.3 统计方法 采用SPSS 26.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，采用t检验，采用Kaplan-Meier 法分析MCM10 的表达水平与卵巢癌患者的预后关系。P ＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MCM10 在卵巢癌中的表达情况 共纳入426例卵巢癌组织和88例正常卵巢组织，结果显示MCM10在卵巢癌中的表达高于正常卵巢组织（P＜0.05），见图1a；在卵巢癌不同分期中，IV期MCM10 表达低于II和III 期（均P ＜0.05），见图1b。MCM10 在卵巢癌细胞株HEY、A2780 和59M 中的表达水平位列前三，见图2。

图1 MCM10 在卵巢癌中的表达水平

图2 MCM10 在卵巢癌细胞系中的表达情况

2.2 MCM10 与MCMs 基因表达的相关性分析MCM10与MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6 和MCM7 表达均呈正相关（均P＜0.05），见封三彩图1。

图1 MCM10 与MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6 及MCM7 表达的相关性分析

2.3 MCM10 mRNA 表达与生存预后的关系MCM10三种不同探针（220651_s_at、222962_s_at和223570_at）均显示MCM10 高表达组的卵巢癌患者预后差（均P ＜0.05），见图3。

图3 MCM10 三种不同探针（220651_s_at、222962_s_at 和223570_at）与卵巢癌患者的预后分析

3 讨论

MCMs蛋白家族是具有相同结构域的一类高度保守的蛋白质，在细胞周期中发挥着重要作用，在人类中包含MCM1 ～10，其中MCM2 ～7 和MCM10参与DNA 复制[4]。MCM10 是重要的复制因子，在G1 期经复制起始后，MCM10 可装载至DNA 上，在S 期具有促进解旋酶激活和DNA 聚合酶加载的作用，从而促进DNA 延伸，参与蛋白质合成和维持基因组稳定性。有研究显示MCM10 参与癌症的发生发展过程，在乳腺癌[5]、神经胶质瘤[6]和食管癌[7]中MCM10 均发挥了重要作用。

MCM10 在细胞复制中可促进G0/G1 期，抑制细胞凋亡，从而与疾病恶化相关[8]。通过构建MCM10基因敲减卵巢癌细胞模型发现，MCM10 在卵巢癌中可促进细胞增殖和迁移，沉默MCM10 后可诱导产生活性氧；hsa-miR-877-3p具有通过靶向MCM10 调控卵巢癌细胞迁移和活性氧产生的作用[9]。本研究结果显示，在卵巢癌患者中MCM10 高表达，而且肿瘤分期不同，MCM10 表达存在差异，表现为在卵巢癌IV 期患者中MCM10 表达低于II 和III 期（均＜0.05）。在基因芯片研究中，MCM10 三个探针结果均显示MCM10 高表达水平患者预后不良，揭示MCM10 高表达是卵巢癌患者预后差的重要因素。有研究显示，MCM10 与B 细胞和CD8+T 细胞表达呈负相关，与CD4+T细胞和巨噬细胞表达呈正相关；这表明MCM10 在卵巢癌的免疫微环境中起关键作用[10]。因此，在卵巢癌中开展以MCM10 为靶点的药物研发具有重要的临床意义。

有研究表明MCMs 也参与多种恶性肿瘤的发生发展，miR-186-3p通过靶向调控MCM2 对宫颈癌的发生起促进作用[11]。MCM6 促进食管癌细胞增殖进而导致预后不良[12]。本研究结果显示卵巢癌中MCM10 基因表达与MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6 和MCM7 表达呈正相关，这揭示它们共同参与卵巢癌细胞的发生与发展，影响患者预后。MCM家族通过影响复制复合体的活化、DNA复制和合成等生物学行为过程参与卵巢癌的致病过程，甚至可能影响卵巢癌耐药性等。因此，进一步阐述MCMs在卵巢癌中的功能有望为卵巢癌的靶标治疗提供新的方向。

利益冲突 所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明 盛月华：论文撰写；毛美亚、郑筱娇、杜勇明、柴景灏：数据整理、统计学分析