中晚期妊娠合并CIN患者HPV感染状况、外周血T细胞亚群细胞水平变化及临床意义

雷盼盼，刘妮

渭南市妇幼保健院妇科，陕西 渭南 714000

宫颈癌是较为常见的一种恶性肿瘤，发生率仅次于结直肠癌与乳腺癌，严重威胁女性的健康及生存质量[1]。宫颈上皮内瘤变(CIN)是同浸润性宫颈癌息息相关的一组癌前病变总称，其主要包括宫颈原位癌与非典型增生，可反映宫颈癌的持续发展过程[2]。分子生物学相关研究显示，人乳头瘤病毒(human papilloma viruses，HPV)与CIN 一样，同宫颈浸润癌息息相关，超过60%的宫颈癌中可以发现HPV DNA，也能够在宫颈浸润癌内发现蛋白质产物及HPV DNA 的转录，于浸润癌及高级别CIN中，HPV DNA 在人类基因组内整合，而不是在完整的病毒衣壳中[3-4]。因为女性在妊娠状态下，其激素水平会发生明显变化，进而影响人体免疫功能及生殖道环境，加之感染大多具有隐匿性及潜伏性，导致其临床症状特异性不足，极易被忽视[5]。基于此，本研究将探讨中晚期妊娠合并CIN患者的HPV感染状况、外周血T细胞亚群细胞水平变化及临床意义，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2020 年7 月至2021年12月渭南市妇幼保健院诊治的60 例中晚期妊娠合并CIN 孕妇(观察组)的临床资料。纳入标准：(1)依据《子宫颈癌诊断》中的CIN 相关标准[6]实施分类；(2)孕周＞13周；(3)年龄＞22岁；(4)临床资料完整。排除标准：(1)属于辅助生殖技术干预的非自然妊娠；(2)畸形胎儿；(3)有阴道手术、子宫颈手术史；(4)胎盘前置；(5)伴有艾滋病、梅毒或其他病毒感染；(6)伴有严重精神疾病。60 例孕妇年龄25～37 岁，平均(26.97±6.03)岁；孕周13～37 周；平均(26.11±2.74)周；CINⅠ期28、Ⅱ期20例、Ⅲ期12例。另选择同期产检的60例健康中晚期孕妇作为对照组，年龄24～35 岁，平均(27.15±5.91)岁；孕周13～36 周；平均(26.34±3.01)周。两组孕妇的年龄、孕周比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 研究方法 (1)CIN确诊：借助阴道镜行宫颈活检病理确诊为CIN，间隔8～12周进行一次活检或阴道镜，选择阴道镜结果最严重的一次作为最终依据，接受阴道镜下对相关组织活检病理检查的孕妇，均按照世界卫生组织规定的疾病分类标准[7]进行判断。(2)HPV检测：选择锥形专用采集刷，从孕妇宫颈口处的鳞柱上皮交界部位采集标本，之后立即置入专用标本储存管中。选择美国Digene 公司的HC-Ⅱ方式对高危型HPV 进行检测，能测定出高危型HPV16、31、33、18、35、39、51、52、45、56、58、68、59等13种。所有操作均按照试剂说明书严格操作，检测结果用RLU/CO定量数值进行报告，若RLU/CO 超过1 就说明高危型HPV 阳性。(3)HPV DNA 载量检测：阴道镜检查所有入组孕妇，取宫颈可疑病变进行活检的同时检测HPV DNA 载量，产后6 个月复查阴道镜，取宫颈可疑病变进行活检的同时检测HPV DNA载量。如果中晚期妊娠合并CIN 孕妇发展为宫颈癌需要及时干预或终止妊娠。(4)免疫功能检测：收集所有入组孕妇产前及产后6 个月外周血5 mL，选择流式细胞仪对T细胞亚群(包括CD4、CD8)数量进行检测。

1.3 观察指标 (1)比较两组孕妇产前HPV 阳性状况；(2)比较观察组CIN 分级不同孕妇产前与产后6 个月的HPV 感染、HPV DNA 载量；(3)比较两组孕妇产前与产后6 个月的免疫功能指标；(4)比较观察组CIN 分级不同孕妇产前与产后6 个月的免疫功能指标。

1.4 统计学方法 应用SPSS20.0统计软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示，三组间比较采用F检验，两两比较采用LSD-t检验，计数资料比较采用χ2检验。以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组孕妇产前的HPV 阳性率比较 产前，观察组孕妇的单一感染、多重感染、HPV 阳性率明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 两组孕妇产前的HPV阳性状况比较[例(%)]Table 1 Comparison of prenatal HPV positive status between the two groups[n(%)]

2.2 观察组CIN分级不同孕妇产前与产后6个月的HPV 感染、HPV DNA 载量比较 产前，CINⅢ级孕妇的HPV 感染率明显高于Ⅰ级、Ⅱ级，差异有统计学意义(P＜0.05)，三级孕妇的HPV DNA载量比较差异无统计学意义(P＞0.05)；产后6 个月，CINⅢ级孕妇HPV转阴率明显低于Ⅰ级、Ⅱ级，HPV DNA载量明显高于Ⅰ级、Ⅱ级，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 观察组不同CIN分级孕妇产前与产后6个月的HPV感染、HPV DNA载量比较[例(%)，±s]Table 2 Comparison of HPV infection and HPV DNA load in pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

表2 观察组不同CIN分级孕妇产前与产后6个月的HPV感染、HPV DNA载量比较[例(%)，±s]Table 2 Comparison of HPV infection and HPV DNA load in pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

注：与本组产前比较，aP＜0.05。Note:Compared with that at the prenatal stages,aP＜0.05.

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2.3 两组孕妇产前与产后6 个月的免疫功能指标比较 产前及产后6 个月，观察组孕妇的CD4 水平明显低于对照组，CD8 水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 两组孕妇产前与产后6个月的免疫功能指标比较(±s)Table 3 Comparison of immune function indexes between two groups of pregnant women at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

表3 两组孕妇产前与产后6个月的免疫功能指标比较(±s)Table 3 Comparison of immune function indexes between two groups of pregnant women at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

注：与本组产前比较，aP＜0.05。Note:Compared with that at the prenatal stages,aP＜0.05.

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2.4 观察组不同CIN分级孕妇产前与产后6个月的免疫功能指标比较 产前及产后6 个月，不同CIN分级CD8 水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)；产前及产后6 个月，CINⅢ级孕妇的CD4 水平明显低于Ⅰ级、Ⅱ级，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表4。

表4 观察组不同CIN 分级孕妇产前与产后6 个月的免疫功能指标比较(±s)Table 4 Comparison on immune function indexes among pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery(±s)

表4 观察组不同CIN 分级孕妇产前与产后6 个月的免疫功能指标比较(±s)Table 4 Comparison on immune function indexes among pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery(±s)

注：与本组产前比较，aP＜0.05。Note:Compared with that at the prenatal stages,aP＜0.05.

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3 讨论

随着妇科肿瘤发生率的不断提升，其越来越对女性的生命安全及生存质量造成严重影响。宫颈癌属于较为常见的一种恶性肿瘤，按照相关文献显示，国内每年有13万左右的新发宫颈癌病人[8]。CIN指的是子宫颈发展到癌的宫颈上皮组织出现的变化，主要分为CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级。相关文献显示，同HPV有关的肿瘤正在逐步增长，在HPV 引发的各种肿瘤中，宫颈癌发生率最高[9]。HPV属于双链结构的一种DNA病毒，表现为噬上皮特性，广泛分布于动物及人类中，且特异性较高，它的DNA 宿于人体细胞染色体中，会阻碍细胞凋亡及修复[10-11]。因为女性的激素水平在妊娠期会发生巨大变化，对人体免疫功能及生殖道环境产生严重影响，且感染之后具有隐匿性及潜伏性，其症状并不明显，通常不被重视。

本次研究将中晚期妊娠合并CIN 患者纳入研究对象，分析HPV阳性状况，结果显示，合并CIN 孕妇的HPV 阳性率明显高于健康孕妇。夏亚莉[12]的研究结果显示，中晚期妊娠合并CIN者高危型HPV阳性率为84.2%，这与本研究的80%相近。相关文献也显示，伴随宫颈病变级别的增加，高危型HPV阳性率也会逐渐提升[13]。本研究还显示，伴随CIN分级的增加，HPV感染率逐渐上升，产后6 个月自然阴转率逐渐下降，且HPV DNA 载量逐渐上升，说明伴随CIN分级的增加，高危HPV 感染率增加、产后转阴率下降，这主要是由于长时间感染极易导致合并感染。所以，检测HPV感染及HPV DNA 载量可协助判断病情诊断与预后。

机体免疫功能属于动态平衡的一个过程，其中，T细胞亚群能够间接的反映人体免疫功能状态[14-15]。本次研究显示，产前及产后6 个月，合并CIN 孕妇的CD4 水平明显低于健康孕妇，CD8 水平明显高于健康孕妇，说明合并CIN 孕妇的免疫功能降低，发生HPV感染的概率较大。产后6 个月，合并CIN 孕妇的CD4水平同产前比较差异无统计学意义，CD8 水平明显低于产前，提示产后6 个月合并CIN 孕妇的免疫功能正在恢复。本研究进一步研究了CIN 分级不同孕妇的免疫功能，结果显示产前CIN 孕妇的CD4 随着CIN分级的增加而下降，产后6 个月，相较于产前CD4 依然较低，而CINⅢ级孕妇的产前与产后6 个月CD4、CD8 水平无明显差异，提示产后6 个月CINⅢ级孕妇免疫功能同产前比较无变化，但HPV 感染依然存在，临床需重视。

综上所述，中晚期妊娠合并CIN患者HPV阳性率明显高于健康同期妊娠孕妇，免疫功能明显较差，且HPV感染、免疫功能同CIN发展存在一定相关性。