血清Apelin-13和网膜素-1表达与肾移植术后患者肾功能的相关性研究

李冰玉, 师 勇, 陈家会, 梁亚林, 唐 倩, 杨青彦

(河南省郑州市第七人民医院 肾移植肾脏病诊疗中心, 河南 郑州, 450000)

随着外科技术和免疫抑制技术的进步,肾移植已成为终末期肾病患者最有效的治疗选择[1]。肾移植并发症的临床表现通常不明显,常常导致诊断延迟,甚至到移植失败晚期或不可逆时才被发现[2]。因此,肾移植后肾功能损伤的早期预测对移植肾的长期存活至关重要。肾移植术后肾功能损伤通常与移植肾的缺血损伤和免疫损伤有密切联系[3]。Apelin-13是血管紧张素样孤儿G蛋白偶联受体的新内源性配体,在多种器官缺血再灌注损伤中发挥保护作用[4-5]。研究[6]显示, Apelin在急性肾损伤中对肾小管上皮线粒体发挥保护作用。网膜素-1(Omentin-1)是一种新发现的脂肪因子,在代谢综合征患者中表达呈显著降低趋势,其可改善2型糖尿病肾病小鼠的肾功能[7]。Apelin、Omentin-1均与肾功能损伤有密切联系,且在相关研究[8]中, Apelin、Omentin-1均参与非酒精性脂肪性肝病的炎症损伤,可作为其预测因子。然而,目前有关于Apelin-13、Omentin-1在肾移植术后肾功能损伤患者中的水平变化及相关研究相对较少。本研究通过检测肾移植患者术后血清Apelin-13、Omentin-1水平,探讨二者在肾功能损伤中的预测价值,旨在为患者的早期诊疗提供帮助。

1 对象与方法

1.1 研究对象

纳入本院2018年1月—2022年5月随诊的89例肾移植患者为肾移植组,其中肾小球肾炎10例, IgA肾病5例,慢性肾衰竭尿毒症74例; 男46例,女43例; 年龄22～68岁,平均(45.36±10.27)岁。根据肾移植术后1个月内患者是否发生急性肾功能损伤将其分为肾功能损伤组21例和非肾功能损伤组68例。同时随机抽取本院健康体检者87例纳入对照组,男47例,女40例; 年龄24～67岁,平均(45.52±11.63)岁。记录患者性别、年龄、糖尿病、收缩压、舒张压、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、供肾情况、热缺血时间、冷缺血时间等情况。本研究经医院医学伦理委员会批准,且均获得研究对象本人同意。

纳入标准: ① 肾功能损伤诊断符合全球肾脏病预后组织指南[9], 患者均为肾移植术后出现血肌酐升高、蛋白尿、血尿、无尿或少尿等肾功能异常症状,常规实验室检查无法明确诊断后进行肾活检显示肾小球发生细胞增殖、炎细胞浸润、硬化、坏死、特殊蛋白沉淀等; 肾间质发生炎细胞浸润及纤维化等; 肾小管发生上皮细胞变性坏死、脱落等; 血管发生坏死、增厚血栓形成等; ② 患者首次接受肾移植,临床资料齐全。排除标准: ① 有肝功能不全及恶性肿瘤者; ② 原发性心脑血管系统性疾病者; ③ 近3个月内服用降血脂药物者; ④合并糖尿病酮症或糖尿病酸中毒等合并症。原肾移植患者98例,根据上述标准排除9例,共纳入89例肾移植患者。

1.2 方法

对照组于体检时采集空腹静脉血10 mL, 肾移植组于术后第1天常规采集空腹静脉血10 mL, 离心收集血清(3 000 转/min, 15 min), 于-80 ℃超低温冰箱保存备用。

1.3 观察指标

采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清Apelin-13、Omentin-1水平,其采用的仪器为美国Thermo Fisher Scientific公司的LabServTMK3型酶标仪。采用粒子增强透射免疫比浊法测定胱抑素C水平; 采用酶法测定血肌酐水平; 采用紫外-谷氨酸脱氨酶法测定血尿素氮水平; 采用比浊法测定β2-微球蛋白、24 h尿蛋白水平; 检测仪器均为德国西门子公司的ADVIA2400全自动生化分析仪。采用符合中国人的校正eMDRD方程计算出估算肾小球滤过率(eGFR), eGFR[mL/(min·1.73 m2)]=186×(CX3Pcr)-1.154×0.742(女性)×1.233(中国人)×(年龄)-0.208(CX3Pcr为校正后的血肌酐,男性系数为1.000)。

1.4 统计学分析

2 结 果

2.1 肾移植组与对照组血清Apelin-13、Omentin-1水平及肾功能指标比较

肾移植组血肌酐、血尿素氮、胱抑素C、β2-微球蛋白、24 h尿蛋白水平高于对照组, Apelin-13、Omentin-1、eGFR水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 2组血清Apelin-13、Omentin-1水平及肾功能指标比较

2.2 肾功能损伤组与非肾功能损伤组一般资料比较

肾功能损伤组与非肾功能损伤组的性别、年龄、糖尿病、收缩压、舒张压、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、供肾情况、热缺血时间、冷缺血时间等资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 肾功能损伤组与非肾功能损伤组一般资料比较

2.3 肾功能损伤组与非肾功能损伤组血清Apelin-13、Omentin-1水平及肾功能指标比较

肾功能损伤组的血肌酐、血尿素氮、胱抑素C、β2-微球蛋白、24 h尿蛋白水平高于非肾功能损伤组, Apelin-13、Omentin-1、eGFR水平低于非肾功能损伤组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 肾功能损伤组与非肾功能损伤组血清Apelin-13、Omentin-1水平及肾功能指标比较

2.4 术后肾功能损伤的肾移植患者血清Apelin-13、Omentin-1水平与肾功能指标的相关性

Pearson相关性分析显示,术后肾功能损伤的肾移植患者血清Apelin-13、Omentin-1水平与血肌酐、血尿素氮、胱抑素C、β2-微球蛋白、24 h尿蛋白呈负相关,与eGFR呈正相关(P<0.05)。见表4。

表4 术后肾功能损伤的肾移植患者血清Apelin-13、Omentin-1水平与肾功能指标的相关性

2.5 血清Apelin-13、Omentin-1水平对肾移植患者术后肾功能损伤的预测价值

以血清Apelin-13、Omentin-1水平为检验变量,分析二者对肾移植患者术后肾功能损伤的预测价值,结果显示, Apelin-13、Omentin-1单独及联合预测肾移植患者术后肾功能损伤的AUC分别为0.784(95%CI: 0.693～0.876)、0.773(95%CI: 0.658～0.888)、0.841(95%CI: 0.758～0.924); Apelin-13、Omentin-1联合预测的AUC显著大于二者单独预测的AUC(Z=1.919、2.290,P<0.05), 敏感度分别为60.3%、66.2%、76.5%, 特异度分别为90.5%、85.7%、81.0%, Apelin-13、Omentin-1预测临界值分别为23.44、112.39 ng/mL。见图1。

图1 血清Apelin-13、Omentin-1水平预测肾移植患者术后肾功能损伤的ROC曲线

2.6 肾移植患者术后肾功能损伤的Logistic回归分析

以肾移植患者术后是否发生肾功能损伤(是=1; 否=0)为因变量,以Apelin-13、Omentin-1为自变量进行Logistic回归分析,结果显示, Apelin-13、Omentin-1是肾移植患者术后肾功能损伤的保护因素(P<0.05)。见表5。

表5 肾移植患者术后肾功能损伤的Logistic回归分析

3 讨 论

肾移植可恢复肾脏疾病患者大部分代谢及内分泌功能,目前患者近期存活率已有显著提升[10]。与透析相比,肾移植患者的生活质量、经济节约及存活率方面均有所改善[11]。目前,临床中常采用胱抑素C、血肌酐、血尿素等指标评价肾移植术后患者移植肾的功能状态,但上述指标存在特异度和敏感度相对较低等缺陷,且部分指标水平变化可能在肾脏功能出现严重受损时才较为明显,可能会影响患者的病情评价[12-13]。因此,临床中亟待寻找与肾移植术后肾功能损伤有关的高特异度和敏感度的早期预测标志物。

缺血再灌注损伤是器官移植过程中发生的一种主要且不可避免的并发症,在肾移植领域,肾缺血再灌注损伤仍然是急性肾功能损伤的主要原因,可导致住院病死率和长期预后不良的风险增加[14-15]。研究[16]显示, Apelin可提高肾缺血再灌注损伤后降低的下游基因水平,改善肾功能和组织结构的损伤,阻碍细胞凋亡,并降低炎症因子和氧化应激水平。研究[17]表明, Apelin-13可显著减少大鼠中肾缺血再灌注损伤诱导的肾小管损伤、肾细胞凋亡,并使损伤诱导的肾脏功能障碍正常化,是治疗急性肾功能损伤的候选物。本研究结果发现,肾移植术后发生肾功能损伤患者血清Apelin-13水平降低,提示Apelin-13水平降低可能与肾功能损伤的发生发展有关,分析肾移植术后部分患者体内缺血再灌注等病理损伤加重,造成血清Apelin-13水平降低,使得Apelin-13阻碍细胞凋亡、炎症以及氧化应激的作用减弱,进而造成患者肾功能和组织结构损伤,推动肾功能损伤进展。Omentin-1是一种新发现的脂肪因子,其参与抗氧化和抗凋亡等过程,与糖尿病肾病有密切联系[18]。研究[19]发现,肾移植患者Omentin-1显著低于血液透析患者。本研究中,发生肾功能损伤的肾移植患者血清Omentin-1水平较低,且与胱抑素C、血肌酐、血尿素等肾功能常见指标显著相关,提示Omentin-1可一定程度反映肾脏功能,有可能作为肾移植患者肾功能损伤的标志物。研究[20]表明, Omentin-1可能通过抑制肾小球系膜细胞中的微炎症,进而起到保护肾的作用。结合相关研究分析本研究中部分肾移植患者术后血清Omentin-1水平下降,可能造成肾小球系膜细胞中的炎症水平上升,最终发生肾功能损伤。此外, ROC曲线分析结果及多因素结果均表明,本研究中Apelin-13、Omentin-1在预测肾移植患者术后早期肾功能损伤中有重要作用,二者预测AUC均大于0.7,提示二者均可作为术后早期肾功能损伤的预测因子,二者联合后的预测价值显著升高,临床中可根据肾移植患者术后血清Apelin-13、Omentin-1检测水平,及时对其肾功能损伤做出早期评估,当Apelin-13高于23.44 ng/mL、Omentin-1高于112.39 ng/mL时,肾功能损伤发生风险较高,应密切关注患者的术后情况。

综上所述,肾移植术后发生肾功能损伤患者血清中Apelin-13、Omentin-1均呈低表达,与肾移植术后病情进展可能密切相关,其有作为肾移植术后肾功能损伤预测指标的潜力。由于本研究纳入样本数量有限,多因素分析未能全面分析; 此外,受病例数限制,本研究并未对肾损伤程度进行分级研究,且肾移植患者术后的恢复分为肾功能即刻恢复、肾功能缓慢恢复、肾功能延迟恢复,不同人群的肾功能变化存在差异,本研究未能进行分组研究,统计学结果可能存在偏倚; 本研究仅以活检结果作为“金标准”进行ROC曲线分析,而未对两指标与其他肾损伤指标进行比较分析,使得研究结果存在一定的局限性,今后可进行大样本研究验证,同时可进一步通过基础研究探讨Apelin-13、Omentin-1在肾功能损伤中发挥的具体作用机制。