TIPE2、TNF-α、IL-1β在高血压脑出血患者的表达和意义

柳旭丽，徐 红，刘金香，王志强

（1.昌邑市人民医院特检科，山东 昌邑 261300；2.昌邑市人民医院检验科，山东 昌邑261300 3.潍坊市人民医院创伤骨科，山东 潍坊 261041）

高血压（hypertensive）是我国常见的慢性病。近几年随着饮食和生活习惯的改变，该病呈逐年增长的趋势[1，2]。高血压脑出血是发生在高血压患者的脑实质出血，是高血压患者常见的并发症，是我国常见的脑卒中疾病，病死率较高[3，4]。即使高血压脑出血患者存活，也会有不同程度的后遗症，严重影响其身心健康。免疫因素、炎症介质的失衡与高血压脑出血疾病的发生和继发性损伤有关。肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8-2（TIPE2，TNFAIP8L2）属于TNFAIP8家族成员，是一种负性免疫调控蛋白，参与维持机体的免疫稳态，使炎性细胞因子与抗炎因子保持平衡[5]。TIPE2在哮喘、冠心病、肿瘤等疾病的发生发展中起着重要的作用。近年研究发现，免疫系统和炎症因子的紊乱在高血压发生中有重要作用[6-9]。TNF-α、IL-1β与高血压的发生发展有关[10，11]。TNF-α有157个氨基酸主要参与细胞免疫，由Th1细胞分泌是炎症的中枢调节因子，参与维持机体免疫应答反应的正常过程[12，13]。IL-1β主要由巨噬细胞合成并分泌，是早期炎症反应主要的促炎因子，参与刺激T细胞和B细胞的增殖，促进炎症因子的生成[14-16]。目前，TIPE2联合TNF-α、IL-1β在高血压脑出血的报道甚少。基于此，本研究通过检测高血压脑出血患者血清中TIPE2、TNF-α、IL-1β表达水平的变化，探索TIPE2、TNF-α、IL-1β在高血压脑出血发生发展过程中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月-2020年12月在昌邑市人民医院就诊并经过临床诊断确诊的高血压脑出血患者45例作为观察组，另选选同期45例体检的健康志愿者作为对照组。观察组男24例，女21例；年龄38～75岁，平均年龄（57.98±9.35）岁；出血量20～75 ml，平均出血量（48.11±16.62）ml。对照组男22例，女23例；年龄40～72岁，平均年龄（60.58±7.88）岁。两组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。所有患者均对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：①观察组患者均经颅脑CT或MRI明确诊断且有高血压病史，并于24 h内住院治疗，行常规脱水、吸氧、止血治疗；②对照组患者均无高血压病史。排除标准：①非高血压脑出血；②合并脑疝、脑肿瘤；③有其他恶性肿瘤；④近期合并感染；⑤有高脂血症、糖尿病；⑥合并免疫系统疾病。

1.3 TIPE2、TNF-α、IL-1β检测 于高血压脑出血急性期（发病后7 d内）、恢复期（发病21 d后）抽取空腹外周静脉血5 ml，抽取健康志愿者空腹外周静脉血5 ml，3000 r/min离心15 min后取上清液做好标记，放入-80℃冰箱备用。检测TIPE2、TNF-α、IL-1β的表达水平时，自冰箱内取出血清，冰上解冻，然后2000 r/min，离心15 min，取上清液，按照说明书用双抗体夹心ABC-ELISA法检测。试剂盒购买于上海酶联生物科技有限公司。使用美国全自动酶联检测仪450 nm读取OD值，将OD值代入试剂盒标准曲线、公式计算样品的浓度。

1.4 观察指标 ①比较观察组脑出血急性期及恢复期与对照组血清TIPE2、TNF-α、IL-1β的表达水平；②将观察组患者分为TIPE2低表达组（≤65 pg/ml），TIPE2高表达组（＞65 pg/ml）；≤60岁，＞60岁；出血量≥40 ml，出血量＜40 ml；血清TNF-α低表达组（≤7 ng/L），TNF-α高表达组（＞7 ng/L）；IL-1β低表达组（≤4 pg/ml），IL-6高表达组（＞4 pg/ml），分析观察组TIPE2与TNF-α、IL-1β与常用临床指标的关系；③分析观察组TIPE2与TNF-α、IL-1β的关系。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件处理数据。计量资料用（）表示，组间比较采用t检验；计数资料采用[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验；TIPE2与TNF-α、IL-1β的关系采用Pearson相关性分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组TIPE2、TNF-α、IL-1β表达水平比较 观察组患者治疗后4例死亡。观察组急性期血清TIPE2表达水平低于对照组，TNF-α、IL-1β表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组急性期血清TIPE2表达水平低于恢复期，TNF-α、IL-1β表达水平高于恢复期，差异有统计学意义（P＜0.05）见表1。

表1 TIPE2、TNF-α、IL-1β表达水平比较（）

表1 TIPE2、TNF-α、IL-1β表达水平比较（）

注：t1，P1表示对照组与观察组急性期比较；t2，P2表示观察组急性期与观察组恢复期比较

2.2 观察组TIPE2、TNF-α、IL-1β表达与临床指标的关系 观察组血清TIPE2、TNF-α、IL-1β表达水平分别与年龄、性别无关（P＞0.05），与出血量有关（P＜0.05），见表2。

表2 观察组TIPE2、TNF-α、IL-1β表达与临床指标的关系（n）

2.3 观察组血清TIPE2与TNF-α、IL-1β表达的关系 观察组血清TIPE2的表达与TNF-α、IL-1β的表达相关，见表3。进一步分析发现，TIPE2表达与TNF-α（r=-0.325，P=0.015），IL-1β（r=-0.278，P=0.032）的表达均呈负相关，见图1。

图1 TIPE2表达与TNF-α、IL-1β的关系

表3 观察组血清TIPE2与TNF-α、IL-1β表达的关系（n）

3 讨论

高血压脑出血多发生于50～70岁中年人，男性多见，主要因为血压长期在较高的水平，损坏动脉壁的弹性，损伤血管内皮细胞，容易破裂。高血压脑出血病情进展比较快，致死率、致残率较高，严重威胁居民的身心健康[17]。脑出血造成的病理损伤，主要是因为血肿对周围脑组织的压迫，从而损伤脑实质[1，17，18]。总之，脑出血引起的脑损伤是一个非常复杂的过程，而导致患者预后不良的原因与脑出血引发的脑损伤有主要关系[19]。近几年，研究发现免疫因素、细胞因子和炎症介质与脑出血继发脑损伤有一定的关系。

肿瘤坏死因子（TNF）-α诱导蛋白8（TNFAIP8/TIPE）家族是最近发现的一个蛋白质家族，有4个成员：TNFAIP8、TIPE1、TIPE2和TIPE3。TIPE家族的所有成员都拥有一个共同的TIPE2同源性（TH）结构域，该结构域可以与一系列磷脂相互作用，从而调节磷脂酰肌醇信号传导。TIPE家族的蛋白质主要起调节靶向信号通路蛋白磷酸化的作用。TIPE2在人类造血和非造血细胞类型中均表达，可结合和激活caspase8并促进凋亡。此外，TIPE2主要抑制T细胞受体（TCR）和Toll样受体（TLR）的激活，调节下游信号通路从而维持免疫稳态并抑制肿瘤和炎症[5]。研究表明，TIPE2显著抑制小鼠巨噬细胞中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和IL-6、IL-1β的表达。TIPE2在系统性红斑狼疮、冠心病和慢性乙型肝炎中异常表达，并参与这些疾病的进展[20，21]。

TNF-α最初被认为是一种引起肿瘤坏死的因子，但最近已被确定能够参与自身免疫性疾病的发生发展。TNF-α与两种不同的受体结合，启动信号转导途径。这些途径的激活导致各种细胞反应，包括细胞存活、分化和增殖。并且，TNF-α信号的激活与慢性炎症相关，并最终可能导致自身免疫性疾病等病理并发症的发展。TNF-α水平升高与多种疾病的发生发展有关，例如癌症、糖尿病、高血压、冠心病等。

白细胞介素-1（IL-1）家族由11种独特的已知配体和拮抗受体组成，它们参与诱导局部和全身炎症或诱导抗炎反应。IL-1α和IL-1β是最早发现的白细胞介素，并通过白细胞介素1受体1（IL-1R1）的信号传导发挥类似的促炎症反应。IL-1R1信号的生物学效应由白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1Ra）内源性调节，其与IL-1α和IL-1β竞争IL-1R1结合。IL-1β是一种关键的促炎细胞因子，参与调节宿主的免疫反应。IL-1β在前述研究中表明，在高血压脑出血、关节炎、哮喘等疾病中出现异常表达[11，14]。

本研究发现，高血压脑出血患者血清中TIPE2的表达低于健康人，TNF-α、IL-1β的表达高于健康人，并且这些指标在高血压脑出血患者急性期与恢复期的表达也存在差异。说明TIPE2与TNF-α、IL-1β参与了高血压脑出血的发生发展，TIPE2作为维持机体免疫平衡的因子，其异常表达说明高血压患者存在免疫系统的紊乱。免疫平衡的紊乱引发的炎症介质的异常表达在高血压脑出血发展中起到了一定的作用。本研究还发现，TIPE2与TNF-α、IL-1β的异常表达在高血压脑出血患者中与年龄、性别无关，与出血量有关，TIPE2的表达与TNF-α、IL-1β的表达变化有关，并且TIPE2的表达分别与TNF-α、IL-1β的表达呈负相关。说明TIPE2维持免疫平衡紊乱会影响TNF-α、IL-1β炎症因子的表达，TIPE2与TNF-α、IL-1β参与免疫平衡相关。高血压患者体内存在微炎症的状态，炎症因子的激活可能是高血压患者器官功能损伤的重要因素。但是TIPE2与TNF-α、IL-1β介导参与的免疫平衡之间的具体机制需要在今后的研究中继续去探讨。

综上所述，TIPE2在高血压脑出血患者中的表达降低，TNF-α、IL-1β表达升高，且TIPE2的表达与TNF-α、IL-1β呈负相关。