斑节对虾无水保活长途运输技术

2023-11-12欧志杰叶成凯陈昆平张德茂边芳芳苏晓盈

科学养鱼 2023年10期

关键词：斑节歧化酶超氧化物

欧志杰，叶成凯，陈昆平，张德茂，边芳芳，苏晓盈

（广东茂名农林科技职业学院，广东茂名 525000）

本文以茂名市的渔业资源为基础，在实验室条件下对广东茂名重要海虾品种斑节对虾进行无水低温长途运输初步探究，实验结果可为斑节对虾无水保活长途运输的进一步探究和实际应用提供一定的参考。

一、材料与方法

1.实验用虾

斑节对虾从市场购买，购买时挑选体质健壮、无病无伤、游动活泼的个体(避免购买软壳虾或正蜕壳的对虾)作为实验用虾。斑节对虾平均体长(13.5±0.5)厘米，平均体重(31.5±1.5)克。

2.仪器设备

医用低温冰箱、冰柜；迈瑞MR-96A 酶标仪；帆布池(1 米×1 米×0.6 米)；保温泡沫箱(外：34 厘米×22 厘米×18 厘米，内：30 厘米×18 厘米×14.5 厘米，壁厚2 厘米)；泡沫缓冲隔板；木屑(使用前在-15℃的低温冰箱冷藏过夜)；水盆。

3.实验方法

(1)暂养。斑节对虾放在用海水晶勾兑成浓度为15的淡盐水中暂养2天。

(2)生态冰温的确定。将挑选好的鲜活斑节对虾放在水盆中，充氧，放入碎冰块，慢慢将水温从常温分别降至6、8、10、12、14℃低温下，刚开始按3～4℃/时的梯度从常温降到14℃，此后按1～2℃/时的梯度降至预定温度。观察并记录其行为变化和苏醒时间。休眠的判断标准为斑节对虾被放进低温清水中到虾体失去平衡，苏醒时间为从失去平衡到放入清水后能看到正常游动的时间。

(3)无水保活运输模拟。将鲜活斑节对虾随机分为5组，每组设3个平行。放入对应生态冰温的低温清水中，使其完全进入休眠状态。然后先将一层木屑放入泡沫箱中垫底，把休眠状态的虾放入泡沫盒内(密度以将箱底刚好铺满为准)，虾上再覆盖一层木屑，每层填充木屑约2 厘米，依次操作，最后再盖上木屑，以使箱内的虾不能活动为止。为维持箱体温度恒定，箱内还要加入相同数量的完好冰袋，并以泡沫隔板缓冲，避免冰块直接接触导致虾体长久冻伤死亡。最后将泡沫箱盖内侧封上冰袋，然后将盖盖严，用胶带封住箱缝，分别置于10、12、14、16℃和常温5个温度梯度中模拟运输2、4、6、8、10 小时，待达到预定运输时间，取出20尾斑节对虾放入充氧清水(水温同运输温度)中，让水温自然上升，计算斑节对虾的存活率。最后实验数据用SPSS 19.0软件进行差异显著性检验，显著性水平为0.05。

(4)无水低温运输胁迫下氧化产物和抗氧化酶活性的测定。斑节对虾在生态冰温的冰水中处理后，进入休眠状态，然后在10℃的温度下模拟运输。分别在处理前鲜活时、冷处理后，及运输2、4、6、8、10小时取斑节对虾的肝胰脏，测定其氧化产物丙二醛的含量以及超氧化物歧化酶的活性。所测定的数据均表示为平均值±标准差(SD)，每组有3个平行，进行差异显著性检验。

二、结果与分析

1.生态冰温的确定

斑节对虾放入不同温度的冷水中表现出来的状态不尽相同，放在6℃和8℃冷水中的斑节对虾基本死亡无法苏醒过来；放在10℃和12℃冷水中的斑节对虾大部分个体能从休眠状态中苏醒过来，且放在10℃冷水中的斑节对虾的苏醒时间要比12℃冷水中的时间要短。而放在14℃冷水中的斑节对虾，大部分个体始终无法进入休眠状态。因此本文认为10℃是斑节对虾最佳的生态冰温。

2.模拟运输斑节对虾的存活率

结果详见表1。

表1 模拟运输斑节对虾的存活率%

由表1可知，以木屑作为运输的填充介质，相同的运输时间，如果运输温度越接近生态冰温，斑节对虾的存活率会更高。此外，相同的运输温度下，运输时间越长，斑节对虾的存活率越低。在10℃的运输条件下、运输时间6小时以内，斑节对虾存活率均能超过80%，然而运输8 小时时，斑节对虾的存活率出现明显下降，不足60%。

3.在无水低温运输胁迫下氧化产物丙二醛含量的变化

丙二醛含量的变化见图1，由结果可知，斑节对虾在冷处理后，其体内肝胰脏的丙二醛含量相比于鲜活时出现了增加，但两者差异不显著(P≥0.05)。在低温运输下，斑节对虾肝胰脏的丙二醛含量显著增加，在运输6小时以内，随着运输时间的增加，其体内的丙二醛含量也逐渐增加，直至6 小时时出现了最高值，达到264 纳摩尔/毫克蛋白。而随着运输时间的进一步加长，斑节对虾体内的丙二醛水平出现了显著的下降，在运输10 小时时只有156纳摩尔/毫克蛋白。

图1 斑节对虾无水低温运输胁迫下肝胰脏丙二醛含量的变化

4.在无水低温运输胁迫下超氧化物歧化酶活性的变化

超氧化物歧化酶活性的变化见图2，由结果可知，斑节对虾在冷处理后，其体内肝胰脏的超氧化物歧化酶活性相比于鲜活时出现了显著增加(P＜0.05)。在运输6 小时以内，随着运输时间的增加，其体内的超氧化物歧化酶活性也显著增加，在运输6小时时出现了最大值，达到473活力单位/毫克蛋白。而随着运输时间的加长，斑节对虾体内的超氧化物歧化酶活性也出现了显著的下降，在运输10 小时时只有314 活力单位/毫克蛋白。

图2 斑节对虾无水低温胁迫下肝胰脏超氧化物歧化酶活性的变化

三、讨论

通过试验可发现，相同运输时间下，运输温度越高，斑节对虾存活率越低。分析其原因，可能是环境温度高，导致斑节对虾的活动能力增强，进而引起新陈代谢和呼吸耗氧的增高，使存活率降低。此外，相同的运输时间下，斑节对虾如果在10℃和12℃进行运输，存活率会显著高于其他设定的温度。出现该结果的原因可能是10℃和12℃处在斑节对虾的生态冰温区内，可以使其处于休眠状态，从而减少其新陈代谢。除了运输温度对斑节对虾的存活产生显著影响外，运输时间也非常重要。相同的运输温度下，随着运输时间的加长，斑节对虾的存活率也会随之降低。

通过试验测定可知，斑节对虾在10℃的无水低温运输胁迫下，其肝胰脏的丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性也发生了变化，在运输6 小时以内，随着运输时间的增加，体内的丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性也逐渐增加，直至6小时时出现了最高值，然而随着运输时间的进一步加长，斑节对虾体内的丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性出现了显著下降。这可能是由于随着运输时间的推移，斑节对虾受到的环境胁迫应激也越强，产生的氧化产物也更多，也引起抗氧化系统的增强。然而，随着运输时间的进一步延长，斑节对虾对于环境也逐渐适应，因此，氧化产物和抗氧化酶的活性出现显著的下降。