野生松杉灵芝驯化栽培试验

亢学平 温嘉伟 于娅 王鹏 张维东 杨大海 王娜 蒋思佳 张阳

摘 要：对采自长白山二道地区的两株野生松杉灵芝（Ganoderma  tsugae  Murr.）進行驯化栽培试验，结果表明：两株松杉灵芝菌丝生长速度快，长势好，菌丝颜色黄色，抗杂能力强；子实体形成较快，形态好，适合作为育种材料。

关键词：松杉灵芝；组织分离；驯化栽培

松杉灵芝（Ganoderma  tsugae  Murr.）是一种名贵的药材，具有增加免疫力、保肝解毒、改善心血管、抗衰老、美容等功效。随着人们对松杉灵芝研究的深入，松杉灵芝的药用价值被公众广泛认知，市场供不应求，野生松杉灵芝的产量已经远远不能满足人们生产和生活需求。因此，开展松杉灵芝的仿野生栽培有巨大的市场潜力和社会效益[1，2]。本研究在对东北地区野生食药用菌资源调查中发现两株松杉灵芝，通过菌种分离及驯化栽培，成功获得子实体，为松杉灵芝育种研究提供基础材料。

1 材料和方法

1.1 试验材料

野生松杉灵芝子实体于2020年8月，采集自吉林省长白山二道白河山区（海拔630～680m），子实体呈扇形、半圆形，边缘白色，盖面中间红褐色至紫红色（图1）。经组织分离、提纯获得纯菌种，编号分别为SL1、SL2。

1.2 培养基配方

母种培养基配方：马铃薯100g，硬杂木木屑30g分开加水煮沸20min，纱布过滤，混合后的滤液加水定容至1000mL，加入葡萄糖20g，琼脂粉15g，KH2PO43g，MgSO41.5g。

原种培养基配方：选用阔叶硬杂木木屑83%、麸皮15%、蔗糖1%、生石膏1%，含水量60%。

栽培种配方：选用阔叶硬杂木木屑83%，麸皮15%，石膏1%，蔗糖1%，含水量60%～65%[3]。

1.3 试验方法

1.3.1 组织分离：将野生松杉灵芝子实体组织块放入母种斜面试管培养基上，置于26℃恒温培养箱培养3～5天后，检查杂菌污染情况，挑出菌丝生长致密、健壮的菌丝生长尖端接种到试管培养基中培养，获得纯菌种。

1.3.2 菌种制作：按照1.2的培养基配方，进行高压灭菌，冷却后进行接种，接种温度22℃～26℃予以培养，接菌后5～7d检查菌丝萌发及杂菌污染情况。

1.3.3 出芝管理：将菌包倒放，在其顶端5cm处开长5～8cm，宽1～1.5cm的口。覆盖塑料薄膜和遮阳网，保持棚内的空气湿度为70%～80%，温度20℃左右均可，经10～15d开口处出现芝蕾，长到2～3cm时，直接向芝蕾表面喷洒雾水，棚内湿度可以保持在90%～95%，温度要求25℃～30℃，散射光，CO2浓度调节到0.1%以下。

1.4 测试指标

记录母种萌发时间、菌丝生长速度、长势、菌丝体颜色、菌种长满时间、菌袋颜色和污染率。

2 结果分析

2.1 菌丝生长

将接种后的试管置于培养箱内，25℃培养，每隔2天观察1次，并记录接种数量、记录菌丝长满试管的时间，污染情况，成活率，结果见表3；观察菌丝的粗度（粗、较粗、细）、生长势（强、较强、弱）、疏密程度（密、较密、疏）培养结果显示，接种3天后菌种萌发，在试管中菌丝平均生长速度为0.8cm/d，原种和栽培种满瓶和满袋时间分别为35天和60天。

2.2 出菇情况

在出菇期间，栽培袋开口后3～5天，开口处菌丝恢复，7天后长出原基，随着原基膨大，分化形成子实体。通过对子实体农艺性状观测，菌盖大小和芝体形态与野生者相似，为扇形；菌盖表面边缘颜色浅，向内颜色变深；菌孔深褐色。子实体的形成照片见图2。3 结论与讨论

本试验采用东北地区的棚式代料地摆栽培方法及层架式摆放，成功获得了子实体。温室大棚内栽培出芝时发现，子实体的形成受温度和湿度影响较大，温度23℃～25℃，空气相对湿度90%～95%时，子实体生长较快。驯化的松杉灵芝菌株菌丝长势强、生长速度快，生育期短，菌盖红褐色，扇形，平均单袋干重高，分别为 35g/袋和33g/袋，为优良菌种的选育提供依据，对长白山珍贵种源保护及开发利用具有重要意义。

参考文献

[1] 梁秀凤，庞启亮，梁延海.松杉灵芝林下栽培技术[J].现代农业科技，2017，（7）：96.

[2] 孙巍巍，包海鹰.松杉灵芝提取物体外抗氧化活性的研究[J].中国食用菌，2010，29（6）：39-41，51.

[3] 胡志强，王鑫，王旭.松杉灵芝母种培养基筛选及菌株对比试验[J].中国林副特产，2019，12（6）：36-38.