漂苍术的炮制工艺研究及质量标准的控制
2023-11-03宋晓园赖佐发廖婷谢美珍吴晓勇
宋晓园,赖佐发,廖婷,谢美珍,吴晓勇
赣州市综合检验检测院,江西 赣州 341000
漂苍术收载在《江西省中药饮片炮制规范》(2008 年版)[1]中,是江西的特色中药饮片,其炮制工艺为:取苍术片,加米泔水浸漂1 d,捞出,用清水漂6 h,洗净,干燥。《中国药典》2020 年版一部[2]未收载漂苍术的炮制规格。《上海市中药饮片炮制规范》(2018 年版)[3]将药材除去杂质,用米泔水浸30 min,洗净,润透,切厚片,干燥,用蜜炙麸皮拌炒至棕黄色,筛去麸皮。《贵州省中药饮片炮制规范》(2005 年版)[4]取净苍术,用米泔水浸泡15~30 min,洗净,润透,切薄片,干燥,照麸炒法用文火炒至棕黄色。《浙江省中药炮制规范》(2015年版)[5]取原药,除去杂质,米泔水浸,取出,润软,切厚片,干燥,再照麸炒法,投入苍术片,炒至表面深黄色时取出,筛去麸皮,摊凉。部分地方的炮制规范相对于《中国药典》增加了“米泔水漂苍术”的炮制方法,但各地方标准炮制的方法均不一致。经文献研究[6-9]苍术米泔水漂制炮制后燥性降低,而健脾药效增强。根据江西省中药饮片炮制规范修订要求,参考文献[10-13]对其炮制工艺关键点的参数进行研究,并考察有效成分的变化。以挥发油、醇浸出物、苍术素为检测指标,用于炮制工艺的参数及质量标准的研究。
1 仪器与材料
1.1 仪器
Waters e2695 高效液相色谱仪[PDA 检测器,沃特世科技(上海)有限公司];Agilent1260 高效液相色谱仪(DAD 检测器,安捷伦科技公司);XS205DU 电子天平[梅特勒-托利多(瑞士)];S220-k 多参数测试仪[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司];202-OA 电热恒温干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);SX2-12-10G 箱式电阻炉(上海跃进医疗器械有限公司)。
1.2 试药
苍术对照药材(中国食品药品检定研究院,批号120983-202106);苍术素对照品(中国食品药品检定研究院,批号111924-201806,含量为99.5%);甲醇、乙腈为色谱纯(SIGMA-ALDRICH®),其他试剂均为分析纯(西陇科学股份有限公司),薄层板(青岛海洋化工有限公司制造),水为纯化水(FST-IV-20 超纯水机制备)。
1.3 样品
北苍术(批号:20211201、20211202、20211203)及相应炮制品漂苍术(批号:20220101、20220102、20220103)均由江西金品堂中药饮片有限公司提供;漂苍术(批号:220101)由江西百仁中药饮片公司提供;漂苍术(批号:202112090-1)由樟树市庆仁中药饮片有限公司提供;漂苍术(批号:20220201)由江西国都中药饮片有限公司提供。
2 方法与结果
2.1 炮制工艺研究
参考文献[6,11-12],漂制苍术用米泔水的配比为2∶100(kg/kg),使用当地的籼米配制米泔水,对现行炮制规范[1]中的加米泔水浸漂1d,用清水漂6 h,干燥温度等参数进行研究,参考《中国药典》[2]及文献[6,10,13],挥发油是苍术燥性的主要成分,醇浸出物具有一定的药理作用,苍术素是健脾的有效成分,故以挥发油、浸出物、苍术素为指标。
2.2 挥发油测定
参照《中国药典》2020 年版四部[14]通则2204挥发油测定法进行检测。样品需要粉碎通过二号筛,取样量约为30 g。
2.3 浸出物测定
参照《中国药典》2020 年版四部[14]通则2201浸出物测定法中醇溶性浸出物测定法热浸法,溶剂为稀乙醇进行检测,样品需要粉碎通过二号筛,取样量约为4 g。
2.4 苍术素测定
2.4.1 色谱条件与系统适用性色谱柱:Platisil ODS-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(79∶21);流速:1.0 mL/min;检测器:PDA;检测波长:340 nm;柱温:30 ℃;进样体积:10 μL。理论板数按苍术素峰计算不低于5 000。对照品及供试品图谱见图1。
图1 高效液相色谱图:A.苍术素对照品溶液;B.供试品溶液
2.4.2 溶液的配制对照品溶液的制备:取苍术素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL 含80.16 μg 的溶液。供试品溶液的制备:取样品粉末(过三号筛)约0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250 W,频率40 kHz)1 h,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2.4.3 线性关系考察精密量取“2.4.2”项下的苍术素对照品溶液适量,分别制成含苍术素2.004、5.010、10.02、20.04、40.08、80.16 µg/mL 的系列对照品溶液,各进样10 µL,以苍术素进样质量(µg)为横坐标X,峰面积为纵坐标Y,计算回归方程及相关系数。结果Y=132.51X-28.14,r=0.999 9,表明苍术素在0.020 04~0.801 6 µg 范围内,线性关系良好。
2.4.4 精密度考察取“2.4.2”项下对照品溶液适量,制得浓度为32.06 µg/mL 的溶液,重复进样6 次,测得峰面积的RSD 为0.18%,结果表明精密度良好。
2.4.5 稳定性考察取同一份供试品溶液,分别于制备后0、2、4、6、8、12、24 h 测定含量,测得峰面积RSD为0.93%,表明供试品溶液在24 h内具有良好的稳定性。
2.4.6 准确度考察采用加样回收试验,取漂苍术(批号20220101,含量为0.84%)6 份,每份约0.1 g,精密称定,分别加入苍术素对照品溶液(32.06 µg/mL)25 mL,按“2.4.2”项下供试品溶液的制备方法制备,测定,计算苍术素含量及RSD,结果表明准确度良好。见表1。
表1 回收率试验
2.4.7 耐用性考察(1)取同一份供试品溶液,用不同品牌的色谱柱[迪马Platisil ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm),月旭Xtimate(250 mm×4.6 mm,5 μm),岛津Inertsil ODS-3(250 mm×4.6 mm,5 μm)]分别进行测定,分离度均良好,测得含量RSD 为0.78%,表明不同品牌色谱柱对苍术素的含量无影响。
(2)取同一份供试品溶液,分别用Waterse2695及Agilent1260 高效液相色谱仪进行仪器比对,两台仪器检测结果的RSD 为0.33%,表明不同品牌色谱仪对苍术素的含量无影响。
2.5 结果
2.5.1 苍术素含量6 批漂苍术样品苍术素含量测定结果见表2,平均含量测定结果为0.73%。
表2 6批样品苍术素测定结果
2.5.2 北苍术炮制前后指标取江西金品堂中药饮片有限公司提供的北苍术及炮制后的漂苍术进行指标比较,结果见表3。
表3 北苍术及米泔水炮制后的漂苍术指标比较结果
药材通过米泔水漂制炮制后,挥发油、醇浸物含量降低;苍术素含量提高,转移率约为130%。
2.5.3 不同炮制条件下漂苍术指标取北苍术(20211201)采用不同炮制条件:加米泔水浸漂1 d、2 d;温度10 ℃、15 ℃、25 ℃;用清水漂6 h,12 h;干燥温度50 ℃、70 ℃;再按“2.3”“2.4”“2.5”项下方法测定,结果见表4。
表4 不同炮制条件各指标结果
漂制2 d,苍术素含量升高,但是在生产过程中温度过高,如夏天或水温过高,米泔水易腐败有馊味,会影响炮制品的品质。因此选择漂制1 d 且过程温度不易过高;清水漂洗时间影响不大,故选择6 h;干燥温度过高,挥发油量减少,且苍术素含量同时减少,故干燥温度应小于60 ℃。
3 讨论
3.1 苍术素含量测定提取条件的选择
对苍术素含量测定的供试品溶液提取方式进行考察,比较了超声1 h,超声2 h,水浴回流1 h,结果含量无明显差别,故选择超声处理1 h。
3.2 炮制工艺的选择
本研究炮制工艺的考察结果与《江西省中药饮片炮制规范》(2008 年版)所述炮制工艺一致,故保持原炮制工艺不变。但提示在生产过程中米泔水漂制过程及干燥过程均应注意温度,为炮制工艺的规范提供了依据。
3.3 含量测定增项
6 批次漂苍术样品按照《江西省中药饮片炮制规范》(2008 年版)检验,性状,显微鉴别,薄层鉴别,水分,总灰分均符合规定。本研究新增苍术素的高效液相色谱含量测定方法,6 批次漂苍术含量有差异,平均含量为0.73%,苍术炮制为漂苍术后苍术素的转移率约为130%。《中国药典》[2]苍术药材项下苍术素的含量限度为0.30%,由于此次研究样品批次较少,因此苍术素的含量限度初步定为0.40%,按此限度各批次漂苍术的含量均符合规定。新增苍术素含量测定方法为该品种的标准提高提供了依据,有利于加强饮片的质量控制。