六种不同配方人工驯化栽培白囊耙齿菌比较试验

李健刘义勇胡志强杜忠伟王旭王鑫

(1.延边朝鲜族自治州农业科学院/国家食用菌产业技术体系延吉综合试验站，吉林 龙井 133400；2.梨树县森林病虫害防治中心，吉林 四平 136500)

白囊耙齿菌(Irpexlacteus)又称白耙齿菌、白囊孔菌，分类学上隶属于担子菌亚门(Basid-iomycetes)层菌纲(Hymenomycetes)非褶菌目(A-phyllophorales)多孔菌科(Polyporaceae)耙齿菌属(Irpex Fr.)[1]。白囊耙齿菌在我国吉林、黑龙江、河北、江西、山西、四川、云南、西藏等地均有分布[2]。白囊耙齿菌是一种常见的木腐真菌，主要生长在枯枝立木、阔叶树倒木上，子实体上有密集的绒毛，形态有时平伏至反卷，有时覆瓦状叠生边缘翻卷形成屋檐状的菌盖，新鲜时乳白色至微黄色，有韧性软革质，具有独特的淡香味，干时变为浅黄色至浅咖色，收缩硬革质，香味消失[3]。

白囊耙齿菌作为一种药用真菌，其多糖已经被开发成药品，用于治疗肾小球肾炎所致的各种症状[4]。近年来，有学者对白囊耙齿菌菌丝生长的条件进行了研究，除了固体培养外[5]，还有液体发酵培养[6]，也有学者尝试了白囊耙齿菌的栽培[7]。白囊耙齿菌除了作为药用真菌外，在工农业方面和治理环境污染方面也有很好的应用前景。白囊耙齿菌可用来降解园林绿化树木枝条[8]，生物预处理玉米杆[9]，可以更好地被牛羊等牲畜消化吸收[10]。白囊耙齿菌可以用来处理废水[11]，处理含有色素废水时具有很好的脱色和解毒效果[12]，也可以分解土壤中不能被迅速降解的有机物[13]。本试验通过对白囊耙齿菌人工驯化栽培，筛选最佳培养基配方，解决野生资源不断减少，供不应求的问题，以期提高白囊耙齿菌人工栽培的产量与质量，为今后工厂化栽培白囊耙齿菌奠定基础。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

供试菌株子实体采自汪清县仲坪乡，将子实体在无菌条件下进行组织分离，经PDA培养基纯化后获得白囊耙齿菌菌株，保藏在延边朝鲜族自治州农业科学院食用菌研究所实验室。

1.2 制作母种

改良PDA培养基：马铃薯200g，琼脂粉20g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g、水1000mL。

称取马铃薯200g，去皮切块，将马铃薯切块在锅中用水1000mL煮烂，用纱布过滤，留取过滤液，弃去马铃薯块，滤液在锅中继续加热，加入琼脂粉20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g，搅拌均匀，待琼脂粉融化后加水定容至1000mL即可将培养液灌装到20mm×200mm玻璃试管中，灌装至试管高度1/4即可塞上棉塞，在高温高压灭菌锅中121℃灭菌30min后摆放斜面，待培养基凝固冷却后在洁净工作台中接入白囊耙齿菌菌种，将接种后的母种置于恒温培养箱中28℃避光培养，观察菌丝复活情况及长势。

1.3 制作原种

原种培养基：二级菌专用枝条90%，杂木屑7.8%，麦麸2%，白糖0.1%，石膏粉0.1%。

将二级菌专用枝条用水泡透后按照比例与杂木屑、麦麸、白糖、石膏粉加水搅拌均匀，使其含水量在60%左右即可装入二级菌袋中，在袋底装入一层杂木屑、麦麸、白糖和石膏粉混合的辅料，装入二级菌专用枝条，枝条要竖直紧密装入，在袋口再装入1层辅料后盖上无棉盖体，在高温高压灭菌锅中121℃灭菌120min，待培养基冷却后在洁净工作台中接入白囊耙齿菌母种，将接种后的原种置于恒温培养箱中28℃避光培养，观察菌丝长势。

1.4 制作栽培种

培养基1：杂木屑54%，玉米芯29%，麦麸10%，黄豆粉5%，石膏1%，白糖1%。培养基2：棉籽壳78%，玉米芯10%，麦麸10%，玉米粉1%，生石灰0.5%，白糖0.5%。培养基3：杂木屑70%，麦麸15%，玉米芯14%，石膏1%。培养基4：玉米芯88%，麦麸10%，生石灰1%，白糖0.5%，玉米粉0.5%。培养基5：杂木屑54%，玉米秸秆29%，麦麸10%，黄豆粉5%，石膏1%，白糖1%。培养基6：杂木屑86.5%，麦麸10%，豆粉2%，石膏粉1%，石灰粉0.5%。

将上述6种配方栽培种培养基分别加水充分搅拌均匀，使其含水量在60%左右，用手紧握培养料有水滴落为宜。用装袋机装入17cm×36cm×0.004cm聚乙烯栽培袋中，每袋装干料0.75kg，每个配方100袋，在高温高压灭菌锅中121℃灭菌120min，待培养基冷却后在洁净工作台中接入白囊耙齿菌原种，将接种后的栽培种置于培养室中，发菌初期温度28～30℃，避光培养，空气湿度65%以下，勤通风。初期6～8d，检验菌袋的污染情况，隔离污染的菌袋，对培养室进行洁净化管理，8d后保持温度在25～30℃，直至菌丝长满菌袋，并记录6种配方白囊耙齿菌菌丝满袋时间。

1.5 栽培方法

1.5.1 场地消毒

在白囊耙齿菌栽培袋进入场地前，将温室封闭进行喷雾消毒和熏蒸消毒。用高浓度(0.1%～1%)克霉灵对温室四壁、地面和网格架喷雾进行重点消杀，用低浓度(0.02%～0.05%)克霉灵喷雾进行空间杀菌降尘。将菇宝点燃产生烟雾进行熏蒸，能够有效杀死栽培环境中的杂菌和害虫、害螨，净化栽培环境，不仅能收到事半功倍的效果，而且可以在整个出菇期不用或少用农药，生产安全的食用菌。

1.5.2 开口方式

白囊耙齿菌人工驯化栽培选用温室网格架式卧袋栽培，待栽培袋下地5d后菌丝恢复洁白选择打开接种口，敞口方式出菇，在原基形成前将敞开的栽培袋用橡皮筋系上，保证透气即可，防止杂菌污染。并记录6种配方人工驯化栽培白囊耙齿菌原基形成时间和子实体形成时间。

1.5.3 出菇管理

待开口3d后开口处菌丝恢复洁白开始浇水，保持环境湿度在65%左右，温度保持在22～26℃，勤通风。出现原基后去掉橡皮筋，将栽培袋接种口敞开，加大浇水量，将温度保持在22～26℃，空气湿度保持在85%左右，CO2浓度保持在400ppm以下，光照保持在800lx左右，并勤通风。白囊耙齿菌属好氧菌，子实体生长期间通风不良易造成子实体团状，影响产品质量。白囊耙齿菌整个生产过程应保持环境清洁，出菇期应防止高温高湿，避免杂菌污染。

1.5.4 采收分析

待6种配方白囊耙齿菌菌袋开口处长出约2～3cm的白色突起，且白色突起上长出绒毛状子实层时可以采收，采收后称量子实体鲜重，放在晾晒架晾干后再次称量子实体干重，并计算干湿比、生物学转化率等，之后放在通风阴凉处保存。采用Excel 2017进行数据整理，SPSS 25采用邓肯分析法进行方差和差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1 白囊耙齿菌栽培记录

通过对6种配方人工驯化栽培白囊耙齿菌各个阶段进行记录，从表1可以看出，6种配方在接种后满袋时间相差较多，培养基1和培养基4相差最多为16d，白囊耙齿菌菌丝在培养基4上生长最快。6种配方在开口后形成原基时间相差较少，培养基2和培养基4相差最多为8d，培养基4虽然菌丝生长最快，但形成原基最慢，培养基2菌丝生长缓慢，但形成原基最快。6种配方在开口后形成子实体时间相差较少，培养基4和培养基6相差最多为8d，培养基6最先形成子实体。

表1 白囊耙齿菌栽培记录

2.2 白囊耙齿菌原基

从图1可以看出，6种配方人工驯化栽培白囊耙齿菌均形成原基，菌袋开口处培养基表面灰白色小突起为白囊耙齿菌原基。培养基2形成原基最早，形成的原基颜色更白，为乳白色，原基也更密集。培养基1和培养基5在形成原基时间上相差很少，原基颜色很接近，为灰白色。培养基3和培养基6在形成原基时间上相差很少，原基颜色也很接近，为黄白色。培养基4形成原基最慢，原基颜色为灰白色。

图1 白囊耙齿菌原基

2.3 白囊耙齿菌子实体

从图2可以看出，6种配方人工驯化栽培白囊耙齿菌均形成子实体，菌袋开口处培养基表面褐色2cm左右突起为白囊耙齿菌子实体层。培养基1、培养基2和培养基5在形成子实体时间上相差很少，但培养基5子实体层最厚，且子实体大小较大。培养基3和培养基6在形成子实体时间上相差很少，且子实体层厚度和子实体大小相差不大。培养基6最先形成子实体，子实体大小最大，培养基4最后形成子实体，子实体层最薄，子实体大小最小。

2.4 白囊耙齿菌产量

对6种不同配方培养基栽培白囊耙齿菌进行2次采摘测产，从表2可以看出，配方1、配方2和配方3白囊耙齿菌子实体每袋平均产量、干湿比和生物学转化率均相差不大。配方4白囊耙齿菌子实体每袋平均鲜重为85.83g，每袋平均干重为25.89g，生物学转化率为11.44%，均为最低。配方5和配方6白囊耙齿菌子实体每袋平均产量、干湿比和生物学转化率相差不大，但配方6白囊耙齿菌子实体每袋平均鲜重最重为109.89g，生物学转化率最高为14.65%。

3 结论

本试验利用对6种配方人工驯化栽培白囊耙齿菌进行比较试验，结果6种配方人工驯化栽培白囊耙齿菌均能形成原基，形成子实体，但在接种后满袋时间、开口后形成原基、子实体时间和平均产量有所差异。培养基1和培养基5在满袋、形成原基和子实体时间上相差很少，培养基5平均产量略高于培养基1。培养基3和培养基6在满袋、形成原基和子实体时间上相差很少，培养基6平均产量略高于培养基3。培养基2形成原基最早，且形成的原基颜色更白，更密集，表明白囊耙齿菌菌丝对棉籽壳利用率较高。培养基4在接种后最先长满菌袋，但形成原基最慢，最后形成子实体，平均产量最低，表明白囊耙齿菌菌丝对玉米芯利用率较低，也可能是玉米芯颗粒较大，含水量较低，导致原基形成缓慢。培养基6最先形成子实体，平均产量最高，表明白囊耙齿菌菌丝对木屑利用率较高，菌丝体能够更好地利用木质素维持生长发育，符合白囊耙齿菌为木腐菌的特性，与于萍等[5]研究结果一致。综合各种因素，在日后白囊耙齿菌栽培中可选用培养基3，玉米芯资源丰富，可以部分替代杂木屑，保护环境，降低生产成本，且培养基3在满袋、形成原基和子实体时间上，平均产量上均属于较高水平。白囊耙齿菌人工栽培使用培养基3时由于配方含有玉米芯，在栽培种装袋时要提前用水泡透玉米芯，在灭菌时要延长时间灭菌透彻，否则玉米芯易受杂菌污染，在出菇管理阶段要注意开口大容易在浇水时积水，要少浇勤浇，高温高湿易导致杂菌污染率高，要勤通风降温，出菇后期易有虫害，要及时采摘，挂黄板除虫，才能保证白囊耙齿菌人工栽培的产量和质量。