温度对黑斑原胚胎发育的影响

李 磊，刘欣苑，周荣攀，禹 猛，李 赞

（1.华电西藏能源有限公司大古水电分公司，西藏山南 856200；2.武汉中科瑞华生态科技股份有限公司，武汉 430061）

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

试验设置9、12、15、18 ℃4 个温度试验组，每个温度组设3 个平行，每组放入受精卵1 000 粒。每组的温差为±0.5 ℃。为防止温度突变对胚胎发育产生不良影响，采取逐步升、降温的方法，升（降）温速度为0.5 ℃/h，达到设计温度后保持恒温。定期观察并记录各组温度及胚胎发育情况，仔鱼半数孵出时，计算其孵化时数和积温，全部孵化后计算孵化率。孵定每天观察受精卵孵化情况，剔除死卵并记录死亡数量。

1.3 数据计算与处理

采用Microsoft Excel 2013 和SPSS 19.0 对试验数据进行统计分析，利用单因素方差分析和Ducan 多重比较来检验各组间的显著性水平；采用OriginPro 9进行绘图。试验数据统一采用均值±标准差表示。

式中，V=1/N，为发育所需时间的倒数；N为发育所需时间，h；T为孵化温度平均值，℃；n为数据组数；C为生物学零度，℃。

K=N（T-C）

式中，K为有效积温，℃·h。

2 结果与分析

2.1 黑斑原胚胎孵化时间与温度的关系

图1 黑斑原胚胎孵化时间与温度的关系

2.2 黑斑原胚胎孵化率与温度的关系

图2 黑斑原胚胎孵化率与温度的关系

2.3 黑斑原胚胎发育的生物学零度与有效积温

表1 不同孵化温度下黑斑原胚胎发育的有效积温

表1 不同孵化温度下黑斑原胚胎发育的有效积温

设计温度//℃9 12 15 18实际平均温度//℃9.2 12.5 14.6 18.2孵化时间//h 338.0 253.0 204.5 162.0有效积温//℃·h 2 662.93 2 799.10 2 691.96 2 715.71

3 小结

外界环境因素对鱼类胚胎发育有重要的影响，其中温度是最主要的影响因素。不同鱼类的生境不同，最适胚胎发育温度也有区别。白斑狗鱼的最适胚胎发育温度在14～16 ℃［8］，海水青鳉的最适胚胎发育温度为28 ℃左右［9］，松江鲈的最适胚胎发育温度在10～11 ℃［10］。本研究表明，黑斑原的最适胚胎发育温度在12～15 ℃，在此温度条件下，黑斑原

胚胎的存活率最高，孵化时较短，初孵仔鱼状态最好。这与黑斑原自然产卵的环境因素有关，雅鲁藏布江常年水温在1～16 ℃，每年5—6 月水温为11～15 ℃［1］，而5—6 月正是黑斑原的繁殖季节。9～18 ℃时黑斑原均能孵化出膜，在该温度区间内，黑斑原胚胎发育时间与温度呈负相关，即随着水温升高，孵化时间变短。这与海水青鳉、黄姑鱼、日本鳗鲡和白斑狗鱼胚胎发育时间与温度的研究结果一致［8，9，11-13］。温度对胚胎孵化的进程进行影响主要是通过影响孵化酶的分泌与活性，而鱼类受精卵的孵化主要依靠胚胎扭动及孵化酶催化［14，15］。在温度为9.2～14.6 ℃，随着温度升高，黑斑原胚胎的孵化率逐渐升高，孵化时间降低，这表明孵化水温逐渐接近黑斑原孵化酶的最适温度。虽然提高温度可以缩短胚胎发育时间，但可能对鱼类的生长发育产生一定的副作用［16］。因此，在人工繁殖过程中，应遵循自然规律，将黑斑原的繁殖孵化水温保持在12～15 ℃。