不同生物农药对茶谷蛾三龄幼虫室内毒力测定

龙丽雪，龚雪娜，王雪松，罗梓文，玉香甩，李晓霞，龙亚芹

（云南省农业科学院茶叶研究所，昆明 650201）

茶树［Camellia sinensi（L.）O.Kuntze］是云南省重要的传统优势特色经济作物，云南省属于中国西南茶区，是世界公认的茶树起源中心［1，2］。截至2020年，全省茶叶面积47.98 万hm2。随着茶园种植面积的不断增加，密植现象严重，加之气候条件适宜，导致其虫害十分严重，尤其是鳞翅目类害虫，是云南省乃至全国茶区普遍发生的重要茶树害虫［3，4］。

茶谷蛾（Agriophara rhombataMeyr.）又称茶灰木蛾，属鳞翅目（Lepidoptera）谷蛾科（Tineidae），是茶树重要的食叶性害虫之一。在国内福建、广东、广西、海南、湖南、贵州、台湾等茶区，以及国外印度、印度尼西亚均发生为害［5-8］，以幼虫在成熟叶片或老叶上取食吐丝结苞为害。受害轻时茶树叶片形成缺刻、干枯，后期则呈焦枯状；受害重的茶树叶片被吃光，植株似火烧状，光合作用受阻，甚至整株枯死。近几年，茶谷蛾在云南省部分茶区发生为害较重，常将叶片食光仅剩秃枝，为害严重时可使茶树树冠枯萎，树势衰弱难恢复，茶叶产量和品质降低，造成严重的经济损失［9-12］。茶叶作为世界三大饮料之一，其质量安全日益受到重视，世界各国及组织均针对茶叶制定了相关农药残留限量标准，并以此作为贸易技术壁垒限制茶叶的进口，可以说茶叶的质量安全不仅是影响茶叶“健康”属性的关键，也是对外贸易和茶产业健康绿色发展的重要决定因素［13］。因此，在茶树病虫害防治中，考虑防治效果的同时也应关注用药安全问题。随着云南省打造世界一流“绿色食品牌”目标的确立，绿色发展和质量安全成为云茶发展的核心要素，而云南省茶叶种植主要以中小型企业和农户零散种植为主，在防治技术上存在用药混乱、技术落后等问题。防治茶谷蛾大多采用化学药剂，如15%茚虫威乳油2 500~3 000 倍稀释液、2.5%三氟氯氢菊酯乳油6 000~8 000 倍稀释液、10%氯氰菊酯乳油6 000 倍稀释液、2.5%联苯菊酯乳油3 000 倍稀释液、2.5%溴氰菊酯乳油6 000 倍稀释液喷雾防治，虽然在短期内可取得一定的经济效益，然而其长期使用所带来的“3R”问题（农药残留、有害生物再猖獗、有害生物抗药性问题）直接影响茶叶的可持续发展。因此，亟需寻找绿色、安全的药剂对化学农药进行替代和补充，降低化学农药的使用量。

近年来，在开展云南省茶区主要病虫害发生情况调查时发现，普洱市、西双版纳傣族自治州、大理白族自治州南涧彝族自治县、昌宁县、凤庆县、临沧市、芒市、文山壮族苗族自治州等均发现茶谷蛾为害，有的茶区如普洱市思茅区倚象镇竜竜村、思茅区南屏镇整碗村、景洪市大渡岗等局部暴发为害，且有逐年扩大的趋势，而茶谷蛾防控措施相关文献报道甚少，因此本试验采用浸叶法，选用短稳杆菌（Empedobacter brevis）、苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis）、苜核·苏云菌、棉铃虫核型多角体病毒和甜菜夜蛾核型多角体病毒5 种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫开展室内毒力测定，筛选有效防治茶谷蛾的生物药剂，以期为田间防治茶谷蛾提供指导依据。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

供试的几种生物农药种类、有效成分和生产厂家及其稀释倍数见表1。

1.2 供试虫源

于普洱市思茅区南屏镇整碗村（北纬22°43′46″、东经100°53′59″）采集茶谷蛾幼虫，在室内用新鲜茶叶枝条饲养至化蛹，蛹羽化后的雌蛾交尾后，产卵孵化出的第二代幼虫饲养至3 龄，挑选大小一致、较活跃的3 龄幼虫作为供试虫源。

1.3 试验设计

采用浸叶法，分别测定5 种生物农药对茶谷蛾3龄幼虫的室内毒杀活性，由于苜核·苏云菌为核型多角体病毒与苏云金杆菌的合成药剂，仅进行室内防效测定，不计算其LC50，其余4 种生物农药既进行毒杀活性测定也计算半致死浓度。以灭菌水处理作为对照（CK），每处理重复4 次。将健康的成熟茶叶枝条分别浸入不同处理溶液中30 s 后取出，放置在滤纸上自然晾干，然后用清水湿润的脱脂棉包裹茶树枝条下部保湿，放入培养皿中并接入供试幼虫10头/皿。分别于24、48、72、96 h 后统计供试幼虫死虫数，以毛笔轻触虫体，不再蠕动视为死亡。

1.4 数据处理

计算各处理的死亡率与校正死亡率，公式如下。

用Excel 2016 软件统计死亡率和校正死亡率，用统计软件SPSS 22.0 计算各药剂不同时间的毒力回归方程、LC50。

2 结果与分析

2.1 五种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫的室内毒杀活性

由图1 可知，5 种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫均有致死作用，其毒杀效果随稀释倍数的增加而降低，且不同药剂不同处理下杀虫效果随时间的延长而提高，均在48 h 后达最大毒杀作用。

图1 五种生物农药不同稀释倍数处理下对茶谷蛾3 龄幼虫的校正死亡率

8 000 IU/μL 的苏云金杆菌SC 100 倍、300 倍、500 倍、700 倍、900 倍稀释液处理96 h 死亡率均超过50%，100~500 倍稀释液表现出较好的杀虫活性（图1a）。苜核·苏云金SC 500 倍稀释液处理96 h 的校正死亡率为100%，表现出较高的杀虫活性；2 000 倍稀释液处理72、96 h 的校正死亡率分别为55.17%、58.62%（图1b）。棉铃虫核型多角体病毒SC 300~500 倍稀释液处理48 h，校正死亡率均超过50%；1 200 倍稀释液和1 500 倍稀释液处理下杀虫活性较差，校正死亡率小于32%（图1c）。100 亿个孢子/mL短稳杆菌100~500 倍稀释液处理96 h，校正死亡率均超过50%；700 倍稀释液和900 倍稀释液处理下杀虫效果较差（图1d）。甜菜夜蛾核型多角体病毒SC在5 个设置稀释倍数下，杀虫活性弱，其校正死亡率不到30%（图1e）。

2.2 四种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫的毒力效果

由表2 可知，室内测定24 h 后，苏云金杆菌、短稳杆菌对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为48.27、3.63×108CFU/mL；棉铃虫核型多角体病毒、甜菜夜蛾核型多角体病毒对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为3.97×106、3.19×107PIB/mL。

表2 四种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫的室内毒力（24 h）

由表3 可知，室内测定48 h 后，苏云金杆菌、短稳杆菌对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为29.48、3.78×108CFU/mL；棉铃虫核型多角体病毒、甜菜夜蛾核型多角体病毒对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为3.41×106、2.52×107PIB/mL。

表3 四种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫的室内毒力（48 h）

由表4 可知，室内测定72 h 后，苏云金杆菌、短稳杆菌对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为7.34、3.36×107CFU/mL；棉铃虫核型多角体病毒、甜菜夜蛾核型多角体病毒对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为3.06×106、2.27×107PIB/mL。

表4 四种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫的室内毒力（72 h）

由表5 可知，室内测定96 h 后，苏云金杆菌、短稳杆菌对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为5.41、2.05×107CFU/mL；棉铃虫核型多角体病毒、甜菜夜蛾核型多角体病毒对茶谷蛾3 龄幼虫的LC50分别为2.71×106、2.36×107PIB/mL。

表5 四种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫的室内毒力（96 h）

3 小结与讨论

在国内有关茶谷蛾仅见其分布与为害、形态特征、生物学特性、发生与环境关系的报道，而鲜见其防治措施的报道。茶谷蛾在云南省年发生4 代，第1 代和第4 代为幼虫主要盛发期，发生较重时，影响树势恢复且可造成茶叶减产40%以上，导致严重的经济损失［10］。因茶谷蛾幼虫隐蔽性极强，初孵幼虫大都在两叶之间吐丝结成虫苞，藏匿其中取食，受惊吓或干扰后，立马落至地面或寻找其他隐蔽场所。除人工捕捉外，目前尚缺乏有效的防控措施。因此，为寻找绿色、安全的防控药剂，本试验选用5 种常见防治鳞翅目害虫的生物农药对茶谷蛾毒杀效果进行比对，试验发现，5 种生物农药对茶谷蛾3 龄幼虫均有毒杀效果，在500 倍稀释液处理下，72~96 h 其毒杀活性大小表现为苜核·苏云菌>苏云金杆菌>棉铃虫核型多角体病毒>短稳杆菌>甜菜夜蛾核型多角体病毒。

8 000 IU/μL 的苏云金杆菌SC 100~500 倍稀释液处理72 h 表现出较好的杀虫活性，室内毒力测定结果表明，不同时间处理下其LC50均小于短稳杆菌，毒力效果大于短稳杆菌。100 亿孢子/mL 短稳杆菌SC 100 倍稀释液处理96 h 的致死率最高，为79.31%，且用药96 h 毒力作用最大。苜核·苏云金SC 500 倍稀释液处理96 h 的校正死亡率为100%，表现出较高的杀虫活性，800 倍稀释液处理72、96 h 致死率均超过85%。棉铃虫核型多角体病毒SC 300倍稀释液处理72 h 达最大致死率，为72.41%，毒力测定中用药96 h 后毒力作用最大。甜菜夜蛾核型多角体病毒SC 300 倍稀释液处理下，致死率为28.57%，杀虫活性较弱，其在用药72 h 后毒力作用最大。

综上，本试验中5 种生物药剂对茶谷蛾3 龄幼虫均有致死作用，其毒杀效果随稀释倍数的增加而降低。推荐苏云金杆菌、苜核·苏云菌、棉铃虫核型多角体病毒为下一步田间药效验证首选药剂，且要综合考虑气候、环境因素以及投入成本，以期为提高茶叶经济效益、推动茶园农药减施增效、绿色健康发展提供参考。