银翘蒲黄散对奶山羊的安全性试验

李 沛,蒋 娟,李稳超,滕 江,赵昕钰,左景茹,陈君霖,廖 琳,刘晓强*

(1.西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵 712100;2.富平县畜牧发展中心,陕西富平 711700;3.西藏琼结县农牧综合服务中心,西藏琼结 856800)

近年来随着奶山羊养殖业的发展,奶山羊乳房炎问题日显突出,发病率达2%～19%[1]。临床型乳房炎平均发病率为6%,最高可达20%[2]。乳房炎不仅影响奶山羊的繁育,还影响产奶量和奶品质[3]。银翘蒲黄散是西北农林科技大学兽医药理学教研室研发的用于奶山羊乳房炎的中兽药,主要由金银花、连翘、蒲公英、黄芪、王不留行、乳香等中药组成,具有清热解毒、抗菌消炎、消痈下乳、通经活血之功效。为评价银翘蒲黄散对奶山羊的安全性,本试验参照农业部《兽药研究技术指导原则汇编》和《兽用中药、天然药物安全药理学研究技术指导原则》[4-5],进行银翘蒲黄散对奶山羊的安全性试验,考察奶山羊以推荐剂量的1、3、5倍剂量连续给药后,临床反应及生理生化指标变化,为银翘蒲黄散的临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用动物 健康成年奶山羊40只,由富平县某奶山羊养殖合作社提供,试验期间常规饲养。

1.1.2 试验药品 银翘蒲黄散主要含有金银花、连翘、蒲公英、黄芪、王不留行、乳香等11味中药组成,具有热解毒、消痈下乳、通经活血之功效,拟用于泌乳动物乳房炎的治疗,使用剂量为50 g/只。所有中药均购自陕西省杨凌示范区国华药店。将药物依据组方配药,粉碎为粗粉,临用前适量温水溶解。

1.1.3 主要试剂 白蛋白(ALB)测定试剂盒,上海泛柯实业有限公司;丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒,天门冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒,江苏晶美生物科技有限公司;尿素氮(BUN)试剂盒,上海吉至生化科技有限公司;肌酐(SCr) 测定试剂盒,上海源叶生物科技有限公司;山羊总蛋白(TP)测定试剂盒,上海泛柯实业有限公司。

1.1.4 主要仪器 电子分析天平,奥豪斯仪器有限公司产品;漩涡振荡器,其林贝尔仪器制造公司产品;MTN-81全自动血细胞分析仪,长春曼特诺医疗器械公司产品; H1650R高速冷冻离心机,湘仪仪器有限公司产品。

1.2 方法

1.2.1 试验动物分组处理 将受试奶山羊随机分为4组,包括3个试验组(1倍剂量组、3倍剂量组和5倍剂量组)和对照组,每组10头。1倍剂量组、3倍剂量组和5倍剂量组的奶山羊每次分别经胃管灌服银翘蒲黄散100、150、250 g,每天1次,连续3 d。对照组灌服生理盐水600 mL,每天1次,连续3 d。

1.2.2 评价指标

1.2.2.1 奶山羊生理指标 于给药前和给药后对受试奶山羊的精神、食欲及粪尿情况进行观察。粪尿观察主要包括排粪排尿动作、次数及粪尿颜色、气味、形状等异常情况。同时,测量给药前及给药后试验奶山羊的呼吸频率、心率及体温。

1.2.2.2 血常规检测 试验前试验组和对照组采空白抗凝血各1次;给药后3 d、7 d各采抗凝血1次。用全自动血细胞分析仪检测血液学指标。测指标主要有:红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、淋巴细胞数(LYM)及血红蛋白(HGB)。

1.2.2.3 血清生化指标检测 给药前对试验组和对照组各采空白血1次,分别于给药后3 d、7 d采血,4℃条件下4 000 r/min离心30 min,分离血清用于测定血清生化指标。主要检测指标包括血清尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酐(SCr)、白蛋白(ALB)和总蛋白(TP)。

2 结果

2.1 银翘蒲黄散对奶山羊生理指标的影响

连续给药3 d后,试验组奶山羊未出现精神异常、食欲废止、呕吐、便秘或腹泻等异常反应,排粪排尿次数、排泄物颜色、气味、形状等均正常。由表1可知,对照组奶山羊的呼吸频率、心率、体温在试验前后均未出现明显变化,各组与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。

表1 不同剂量的银翘蒲黄散对奶山羊呼吸频率、心率和体温的影响

2.2 银翘蒲黄散对奶山羊血液学指标的影响

连续给药3 d后,3 d、7 d各组奶山羊血液学指标检测结果见表2和表3。各组的血常规参数没有明显变化。对照组与试验组间的红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)、血红蛋白(HGB)和淋巴细胞数(LYM)的含量无显著性差异(P>0.05)。结果表明,银翘蒲黄散对受试奶山羊的血液学指标不会产生明显的不良影响。

表2 不同剂量的银翘蒲黄散对奶山羊血常规的影响(给药前)

表3 不同剂量的银翘蒲黄散对奶山羊血液学指标的影响(给药后第3、7天)

2.3 银翘蒲黄散对奶山羊血清生化指标的影响

由表4和表5可知,连续给药3 d后,奶山羊血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、白蛋白(ALB)以及总蛋白(TP)活性与给药前相比无显著性差异(P>0.05)。试验组与对照组相比较,各血液生化指标活性差异不显著(P>0.05)。表明银翘蒲黄散对奶山羊的肝脏、肾脏功能以及物质代谢并无不良影响。

表4 不同剂量的银翘蒲黄散对奶山羊血清生化指标的影响(给药前)

表5 不同剂量的银翘蒲黄翘对奶山羊血清生化指标的影响(给药后第3、7天)

3 讨论

抗菌药物在应对泌乳动物乳房炎方面发挥了重要作用,但长期使用会引起细菌的耐药性、兽药残留和环境污染等问题,加之国家限抗、替抗政策的出台[6]。临床治疗动物乳房炎也越来越倾向于中草药治疗,中草药含有丰富的活性物质,各味中草药之间互相协调辅助,可同时产生抗炎、抗菌、镇痛、抗氧化、调节免疫功能等多种功效。

靶动物安全性评价是药物临床应用判断标准之一[7]。根据受试奶山羊的临床体征,不同剂量组奶山羊均未出现异常反应,精神状态良好,饮水、饮食、排粪和排尿正常,体温、心率和呼吸也均正常,说明银翘蒲黄散对奶山羊无不良影响。药3 d与7 d后血常规指标均在正常范围,表明银翘蒲黄散在一定剂量范围内对奶山羊的血常规指标无不良影响。银翘蒲黄散所含的主要成份为金银花、连翘、蒲公英、黄芪、王不留行、乳香等,单味或复方均毒性低,安全可靠。蒲公英可化热毒,消恶肿,具有抑菌、抗氧化、抗炎等多种药理作用[6,8-9]。连翘和黄芩也属于临床常用中草药[10-11]。银翘蓝芩口服液含有金银花、连翘、黄芩等,许春燕对靶动物鸡连续饮水给药7 d,不同剂量组与对照组相比,血液生理学与生化学指标以及脏器系数差异不显著(P>0.05),且各脏器无明显组织病变[12]。血液生化指标中,血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、白蛋白和总蛋白是评价肝脏功能的重要标志,尿素氮和肌酐是评价肾脏功能的重要指标,可反映机体肝脏、肾脏及总体代谢功能的正常与否。本试验中1倍和3倍剂量组奶山羊用药后其血液生化指标变化均处于参考值正常范围内,与给药前相比较差异不显著(P>0.05),表明银翘蒲黄散对奶山羊的肝、肾功能及机体代谢不会产生不良影响。但是5倍剂量组奶山羊的血清生化指标和对照组比显著升高(P<0.05),其原因可能是该散剂中所含的没药、乳香及知母在剂量较大时产生一定毒性[13]。综上所述,银翘蒲黄散不超过3倍推荐剂量时具有良好的安全性。