LNCRNA8975-1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖周期和迁移的影响及其机制

詹明峰 张文娟 孙士芳 尚佩生 沈晓峰

[摘要]目的：探討长链非编码RNA 8975-1（Long non-coding RNA 8975-1，LNCRNA8975-1）通过微小RNA-203（microRNA-203，miR-203）/血管内皮生长因子-A（Vascular endothelial growth factor-A， VEGF-A）信号轴对人瘢痕疙瘩成纤维细胞（Human keloid fibroblast， HKF）的细胞增殖周期和迁移的影响及其机制。方法：培养人皮肤成纤维细胞（Human skin fibroblasts，HSF）和HKF，采用定量PCR（quantitative polymerase chain reaction， qPCR）及western blot法检测LNCRNA8975-1、miR-203和I型胶原蛋白（Type I collagen， Col-I）的表达量。将HKF细胞分为Control组、小干扰RNA载体的阴性对照（the negative control for small interfering RNA vector， siNC）组、沉默LNCRNA8975-1的小干扰RNA载体（the small interfering RNA vector for silence of LNCRNA8975-1， siLNCRNA8975-1）组、pcDNA3.1空载体（the empty pcDNA3.1 vector， pcDNA）组、过表达LNCRNA8975-1的pcDNA3.1载体（overexpression of LNCRNA8975-1 in the pcDNA3.1 vector， pcDNA-LNCRNA8975-1）组、miR-203拟似物的阴性对照（the negative control of miR-203 mimic，NC mimic）组、miR-203的拟似物（miR-203 mimic）组、miR-203抑制剂的阴性对照（negative control of miR-203 inhibitor，NC inhibitor）组、miR-203的抑制剂（miR-203 inhibitor）组、siLNCRNA8975-1+miR-203 inhibitor组、VEGF-A+miR-203 mimic组。CCK-8法检测细胞增殖活性，免疫荧光检测细胞周期标志物细胞周期蛋白D1（cyclin D1），伤口愈合实验和Transwell实验检测细胞迁移功能。荧光素酶基因报告实验检测HKF细胞中LNCRNA8975-1和miR-203、miR-203和VEGF-A的直接作用。结果：与HSF相比，HKF中LNCRNA8975-1和Col-I表达量上调（P＜0.05），而miR-203降低（P＜0.05）。与siNC相比，siLNCRNA8975-1抑制了HKF细胞周期蛋白cyclin D1表达和细胞的迁移（P＜0.05）。与NC mimic相比，miR-203 mimic抑制了HKF中cyclin D1蛋白表达和细胞的迁移（P＜0.05）。LNCRNA8975-1充当miR-203的“分子海绵”靶向抑制miR-203，且VEGF-A是miR-203的靶基因。VEGF-A表达被miR-203 mimic抑制（P＜0.05）。miR-203 inhibitor充分逆转了siLNCRNA8975-1对HKF中cyclin D1表达和迁移的抑制作用（P＜0.05），而且VEGF-A则逆转了miR-203 mimic对HKF中cyclin D1表达和迁移的抑制功能（P＜0.05）。结论：LNCRNA8975-1通过抑制miR-203上调VEGF-A调控HKF的周期和迁移。

[关键词]长链非编码RNA 8975-1；微小RNA-203；血管内皮生长因子-A；瘢痕疙瘩；成纤维细胞；细胞周期；迁移

[中图分类号]R619+.6    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2023）08-0035-06

Effect of LNCRNA8975-1 on Proliferation Cycle and Migration of Keloid Fibroblasts and Its Mechanism

ZHAN Mingfeng，ZHANG Wenjuan，SUN Shifang，SHANG Peisheng，SHEN Xiaofeng

（Department of Dermatology，the Fifth Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University，Urumqi 830000，Xinjiang，China）

Abstract： Objective  To study the effect of long non-coding RNA 8975-1 （LNRNA8975-1） on cell proliferation cycle and migration of keloid fibroblasts and to explore the mechanism. Methods  Human skin fibroblasts （HSF） and keloid fibroblasts （HKF） were cultured. The expression levels of LNCRNA8975-1， miR-203 and Col-I were detected by qPCR and western blot. HKF cells were divided into Control group， siNC group， siLNCRNA8975-1 group， pcDNA group， pcDNA-LNCRNA8975-1 group， NC mimic group， miR-203 mimic group， NC inhibitor group， miR-203 inhibitor group， siLNCRNA8975-1+miR-203 inhibitor group， VEGF-A+miR-203 mimic group. Cell proliferation activity was detected by CCK-8 assay， cell cycle marker cyclin D1 was detected by immunofluorescence， and cell migration function was detected by wound healing assay and Transwell assay. Luciferase gene reporter assay detected the direct effects of LNCRNA8975-1 and miR-203， miR-203 and VEGF-A in HKF cells. Results  Compared with HSF， the expressions of LNCRNA8975-1 and Col-I in HKF were up-regulated （both P＜0.05）， while miR-203 was down-regulated （P＜0.05）. Compared with siNC， siLNCRNA8975-1 inhibited the expression of HKF cyclin D1 and cell migration （all P＜0.05）. Compared with NC mimic， miR-203 mimic inhibited cyclin D1 protein expression and cell migration in HKF （P＜0.05）. LNRNA8975-1 acts as a "molecular sponge" for miR-203 to target inhibition of miR-203， and VEGF-A is a target gene of miR-203. VEGF-A expression was inhibited by miR-203 mimic （P＜0.05）. miR-203 inhibitor fully reversed the inhibitory effect of siLNCRNA8975-1 on the expression and migration of cyclin D1 in HKF （P＜0.05）， and VEGF-A reversed the inhibitory effect of miR-203 mimic on the expression and migration of cyclin D1 in HKF （P＜0.05）. Conclusion  LNRNA8975-1 regulates the cycle and migration of keloid fibroblasts by inhibiting miR-203 and up-regulating VEGF-A.

Key words： long non-coding RNA 8975-1; microRNA-203; vascular endothelial growth factor-A; keloid fibroblasts; cell cycle; migration

过度瘢痕形成可进展为瘢痕疙瘩[1-2]，这与人瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长、细胞周期进程和细胞迁移的调控密切相关，但其内在机制并不清楚[3]。lncRNA可通过“分子海绵”作用吸附微小RNA，进一步通过调控靶mRNA的表达从而调控细胞的增殖、周期进程、细胞的迁移和侵袭等[4-7]。最近研究表明LNCRNA8975-1在瘢痕疙瘩中明显高表达[8]，但其在瘢痕疙瘩中的作用不清楚。经预测发现miR-203[9]是LNCRNA8975-1潜在靶基因，而VEGF-A则是miR-203在肿瘤细胞中的靶基因[10]。然而，LNCRNA8975-1调控的miR-203/VEGF-A网络是否介导HKF的细胞周期蛋白D1（cyclin D1）表达和细胞迁移等并不清楚。本研究旨在探讨长链非编码RNA8975-1通過微小RNA-203/血管内皮生长因子-A信号轴对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的细胞增殖周期和迁移的影响及其机制，现报道如下。

1  材料和方法

1.1 试剂和耗材：HSF和HKF购自购于武汉普诺赛生命科技有限公司。人重组VEGF-A蛋白（VEGF-A）购于英国Abcam公司。沉默LNCRNA8975-1的阴性对照（si-NC）、沉默LNCRNA8975-1的小干扰RNA载体（siLNCRNA8975-1）、pcDNA3.1空载体（pcDNA）、pcDNA3.1-LNCRNA8975-1过表达载体（pcDNA-LNCRNA8975-1）、miR-203拟似物（mimic）的阴性对照（NC）（NC mimic）、miR-203 mimic、miR-203抑制剂（inhibitor）的阴性对照（NC）（NC inhibitor）、miR-203 inhibitor、pGL3-LNCRNA8975-1-WT载体以及pGL3-LNCRNA8975-1-Mut载体都构建于上海吉玛公司。I型胶原蛋白（Type I collagen， Col-I）的一抗（ab6308）购于英国Abcam公司，VEGF-A（12534）、磷酸化（p-）VEGF-A（9516）、cyclin D1、磷酸甘油醛脱氢酶（Glyceraldehyde-phosphate dehydrogenase，GAPDH）（5174）购于美国Cell Signaling Technology公司。AlexaFluor594偶联的山羊抗兔二抗购于美国ThermoFisher公司。二脒基苯基吲哚（Diaminidine phenyl indole，DAPI）购于美国VectorLaboratory公司。

1.2 细胞培养：HSF和HKF在补充有10%胎牛血清、100 U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的杜氏改良培养基（Dulbecco's modified eagle medium，DMEM）中培养。在37℃下，细胞在含有95%空气和5% CO2的湿润培养箱中培养，每1 d换液1次。将汇合率达到70%的对数生长期细胞用于后续实验。

1.3 HKF细胞的瞬时转染和分组处理：siNC组、siLNCRNA8975-1组、pcDNA组、pcDNA-LNCRNA8975-1组、0 NC mimic组、miR-203 mimic组、NC inhibitor组、miR-203 inhibitor组的细胞的处理方法如下，当HKF细胞生长到70%汇合率时，联合Lipofectamine 2 000分别加入10 nmol/L siNC、siLNCRNA8975-1、pcDNA、pcDNA-LNCRNA8975-1，0.8μmol/L的NC mimic、miR-203 mimic、NC inhibitor、miR-203 inhibitor，并在37℃下孵育24 h。而siLNCRNA8975-1+miR-203 inhibitor组为联合Lipofectamine 2 000共同加入10 nmol/L siLNCRNA8975-1和0.8μmol/L miR-203 inhibitor，并在37℃下孵育24 h。而VEGF-A+miR-203 inhibitor组为联合Lipofectamine 2 000共同加入10 nmol/L人重组VEGF-A蛋白和0.8 μmol/L miR-203 inhibitor，并在37℃下孵育24 h。Control组细胞不进行任何处理。收集细胞用于后续检测。

1.4 qPCR：收集各组细胞超声裂解后，根据制造商的方案，将细胞转移到含有Trizol的试管中，分离总RNA。用DNase I处理1μg总RNA，根据生产上说明进行逆转录。并根据制造商的说明，使用SYBR? Green PCR进行qPCR分析。在96孔光学反应板中进行40个循环进行PCR扩增，1个循环中94°C 30 s、58～63°C 30 s、72°C 60 s。对于mRNA用GAPDH作内参基因。获得相对于Control组数值的倍数变化。使用以下引物：GAPDH（内参）正向引物5'-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3'，反向引物5'-GGGGTCGTTGATGGCAACA-3'；LNCRNA8975-1正向引物5'-CGGCTAACAAGGAGATTTGG-3'，反向引物5'-AGGCTCAGGGATGGTAGTCC-3'；miR-203正向引物5'-TAAGGCACGCGGTGAATGCC-3'，反向引物5'-GATTGAATCGAGCACCAGTTAC-3'；VEGF-A正向引物5'-TTTCGCTAGCCAACTTTT-3'，反向引物5'-TATCTGTTTTCAATGTAAGCTC-3'。使用2-ΔΔCT方法分别计算lncRNA和miRNA的靶基因对GAPDH（内参蛋白）和U6（内参蛋白）的相对表达。

1.5 蛋白免疫印迹（Western blot）：在SDS-PAGE凝胶上分离来自不同样品的等量总蛋白，并用针对Col-I（1∶500）、VEGF-A（1∶1 000）、p-VEGF-A（1∶1 000）或GAPDH（1∶5 000）在4°C孵育过夜，然后用HRP偶联的抗小鼠二抗（1∶5 000）在室温下孵育2 h。用增强的化学发光试剂显色，并使用Image J软件进行分析。

1.6 CCK-8：根据生产商提供的说明，于96孔板内处理各组细胞持续24 h、48 h、72 h，随后去除96孔培养板内培养液，每孔避光加入100μl含10% CCK-8溶液的DMEM完全培养液，37 ℃孵育4 h后终止培养，摇床室温振荡5 min。在酶标仪上测定450 nm处吸光度值。实验重复3次，取3次实验的均值作为实验结果。

1.7 cyclin D1的免疫荧光染色：将细胞固定在4%多聚甲醛中，用0.3% TritonX-100渗透，并用PBS中的1% BSA封闭。与抗cyclin D1抗体（1∶500）在4°C孵育过夜后，细胞用AlexaFluor594缀合的山羊抗兔二抗（1∶250）染色，并用DAPI染色液染细胞核15 min。使用荧光显微镜（Olympus，Tokyo，Japan）捕获图像。

1.8 伤口愈合实验：将细胞（5×104）接种在96孔板中并孵育过夜，以使细胞黏附并生长至汇合层。然后用无菌移液器尖端在细胞单层上划一个1 mm宽的划痕。0 h、24 h和48 h分别对划痕的相同位置进行拍照。使用ImagePro-Plus软件（Media Cybernetics，Rockville，MD）计算0 h、24 h和48 h时间间隔的划痕/伤口宽度。

1.9 Transwell迁移实验：细胞以1 × 105个细胞/孔接种在24孔板中的未包被基质胶Transwell过滤器上。当细胞迁移通过未涂覆的过滤器时，应用三步法（Richard-Allan Scientific）对细胞进行染色。将迁移细胞的数量量化为相对于对照的倍数变化。

1.10 荧光素酶报告基因检测：在24孔板上培养细胞，然后用pGL3-LNCRNA8975-1载体或pGL3-LNCRNA8975-1-Mut载体以及miR-203-mimic或NC-mimic轉染。此外，建立了含有miR-203结合位点的野生型VEGF-A（WT）和突变型VEGF-A（Mut），并将这些载体与miR-203-mimic或NC-mimic共转染。48 h后，收获细胞。根据制造商的说明，使用Dual-Luciferase Reporter Assay System（美国普洛麦格）进行荧光素酶报告基因测定以检测荧光素酶活性。

1.11 统计学分析：所有数据均使用SPSS 22.0软件进行分析，并以3个独立实验的均数±标准差（x?±s）表示，每个实验的每个条件设置3个复孔。组间比较采用t检验，三组及三组以上比较采用单因素方差分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1 人瘢痕成纤维细胞中LNCRNA8975-1、miR-203、Col-I的表达：观察LNCRNA8975-1、miR-203和Col-I的表达模式。qRT-PCR和蛋白免疫印迹分析显示与HSF相比，LNCRNA8975-1和Col-I在HKF中显著上调，但miR-203反而下调，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见图1。

2.2 敲低LNCRNA8975-1抑制了HKF细胞的cyclin D1表达和迁移：用siLNCRNA8975-1转染HKF以沉默LNCRNA8975-1的表达，数据显示，在用siLNCRNA8975-1转染的细胞中LNCRNA8975-1的表达被显著抑制（见图2A）。此外，转染后48 h还观察了HKF的形态。稳定沉默LNCRNA8975-1的HKF显示出细胞形态的显著变化，从排列良好的簇状细胞转变为不规则的非极化细胞（见图2B）。此外，CCK-8和cyclin D1的免疫荧光染色确定LNCRNA8975-1的敲低显著降低了细胞增殖能力和细胞周期蛋白表达（见图2C～D）。伤口愈合和Transwell测定还表明敲低LNCRNA8975-1导致细胞迁移受到抑制（见图2E～F）。

2.3 miR-203是LNCRNA8975-1的靶标：细胞中LNCRNA8975-1和miR-203的表达呈负相关。为进一步证明LNCRNA8975-1和miR-203在瘢痕疙瘩形成中的关系，本研究检测了过表达LNCRNA8975-1的HKF或沉默LNCRNA8975-1的HKF中miR-203表达的改变。结果证实了LNCRNA8975-1对miR-203表达的负调节（见图3A）。此外，通过生物信息学分析还确定了LNCRNA8975-1和miR-203之间的互补结合位点（见图3B）。荧光素酶报告基因结果发现miR-203-mimic可特异性抑制由WT-LNCRNA8975-1序列驱动的荧光素酶报告基因活性，而不是由Mut-LNCRNA8975-1序列（见图3C）。

2.4 miR-203逆转LNCRNA8975-1在HKF中的调节功能：LNCRNA8975-1敲低显著上调了miR-203，而miR-203-inhibitor显著逆转了这种作用。功能实验表明，LNCRNA8975-1的敲低导致细胞cyclin D1蛋白表达和迁移率的抑制。然而，这些调节功能明显被miR-203-inhibitor所阻断。见图4。

2.5 VEGF-A是miR-203的生物学功能性靶基因：生物信息学分析发现VEGF-A的3'-非翻译区（UTR）含有潜在的miR-203结合位点（见图5A）。为了分析VEGF-A是否是miR-203的直接靶标，本研究在VEGF-A基因的3'-UTR内构建突变，将WT或MUT-VEGF-A序列克隆到荧光素酶报告基因的构建载体中，并将??荧光素酶构建的载体与miR-203-mimic或NC-mimic转染进入HKF细胞。miR-203-mimic特异性抑制由WT驱动的荧光素酶活性，但不抑制MUT-VEGF-A 3'-UTR的荧光素酶活性（见图5B）。qRT-PCR和蛋白免疫印迹分析进一步确认发现，抑制miR-203会增加VEGF-A的表达，而过表达miR-203会降低VEGF-A的水平（见图5C～D）。功能研究发现miR-203-mimic+VEGF-A组HKF细胞的细胞增殖、cyclin D1表达和迁移率显著高于miR-203-mimic组（见图5E～G）。

3  讨论

尽管LNCRNA8975-1在瘢痕疙瘩中被发现表达上调[8]，但对其在瘢痕疙瘩形成的机制知之甚少。本研究发现沉默HKF中LNCRNA8975-1抑制HKF细胞Col-I、周期蛋白cyclin D1、VEGF-A的表达，并抑制细胞的迁移；而miR-203 mimic抑制了HKF中Col-I、cyclin D1、VEGF-A蛋白表达和细胞的迁移。抑制miR-203能逆转LNCRNA8975-1沉默对HKF中cyclin D1表达和迁移的抑制作用，而用重组VEGF-A蛋白刺激HKF后逆转了miR-203 mimic对HKF细胞Col-I和cyclin D1表达、细胞迁移的抑制功能。表明LNCRNA8975-1可通过吸附miR-203从而增加VEGF-A表达促进HKF的周期进展和迁移。

细胞外基质成分Col-I在瘢痕疙瘩形成中发挥关键作用[11，13-14]。本研究发现LNCRNA8975-1是刺激HKF中Col-I合成的新信号。与HSF细胞相比，HKF细胞中LNCRNA8975-1和Col-I都上调。而且沉默HKF中的LNCRNA8975-1可以显著抑制Col-I的表达。表明LNCRNA8975-1调控HKF中Col-I的合成。

研究显示LNCRNA8975-1在瘢痕疙瘩中表达上调[8]，并通过抑制靶基因Smad3促进皮肤成纤维细胞胶原合成[15]。与之类似，本研究发现，在HKF中LNCRNA8975-1表达上调，与此同时Col-I的表达上调。另外，LNCRNA8975-1对于维持HKF的活力、增殖、细胞周期、迁移至关重要，因为在HKF中下调LNCRNA8975-1会显著降低上述功能和表型。以往的研究还表明LNCRNA8975-1对瘢痕成纤维细胞发挥作用的多种机制。最常见的是，LNCRNA8975-1通过海绵miRNA发挥作用，例如LNCRNA8975-1可以通过吸附miR-21从而抑制瘢痕成纤维细胞的增殖[16]。本研究同样观察到LNCRNA8975-1通過“分子海绵”吸附miR-203从而上调VEGF-A促进HKF的迁移和细胞周期蛋白表达。

本研究发现miR-203是HKF中LNCRNA8975-1的直接靶标，其证据是miR-203与LNCRNA8975-1的表达在HKF与HSF中的趋势相反，且荧光素酶报告基因测定证实miR-203 mimic可以抑制LNCRNA8975-1野生型报告载体结合的荧光素酶活性，进一步分析发现，敲低HKF中的LNCRNA8975-1提高了内源性miR-203水平。功能回复证实siLNCRNA8975-1在HKF中诱导的表型，包括细胞增殖周期和迁移功能和VEGF-A及Col-I等表型的表达降低，均被miR-203-inhibitor显著恢复。类似的是，VEGF-A也可以显著恢复miR-203 mimic对增殖周期和迁移功能和表型的抑制作用，荧光素酶基因报告试验还证实VEGF-A是miR-203的靶基因。在颌面部伤口愈合的研究中已发现VEGF-A是miR-203的靶基因[17]，另外，miR-203抑制VEGF-A从而抑制肝癌的迁移和血管生成[10]，这与本研究结果类似。因此，miR-203/VEGF-A轴是LNCRNA8975-1诱导的瘢痕疙瘩表型的下游靶点。

本研究存在如下不足，如LNCRNA8975-1在瘢痕疙瘩组织中的表达以及与miR-203和VEGF-A的相关性。后续研究需寻找LNCRNA8975-1在HKF中吸附的其他潜在miRNA，并描述这些靶标是否以及如何有助于HKF细胞中的LNCRNA8975-1功能。同样，还应对瘢痕疙瘩形成过程中miR-203的其他潜在靶点的特征和功能进行综合分析。

总之，LNCRNA8975-1/miR-203/VEGF-A轴是调节HKF细胞周期、细胞迁移、Col-I合成的新机制，表明抑制LNCRNA8975-1或增强miR-203表达可能为预防和治疗瘢痕疙瘩提供新的选择。

[参考文献]

[1]王蕴璋，苏晨，付思祺，等.瘢痕疙瘩中的成纤维细胞特性研究进展[J].中华烧伤与创面修复杂志，2022，38（6）：590-594.

[2]黄晶晶，蒋英，于静萍.瘢痕疙瘩发病机制及术后放疗研究进展[J].中国麻风皮肤病杂志，2020，36（7）：440-444.

[3]Zhou X，Lu J，Wu B，et al.HOXA11-AS facilitates the proliferation，cell cycle process and migration of keloid fibroblasts through sponging miR-188-5p to regulate VEGFA[J].J Dermatol Sci，2022，106（2）：111-118

[4]Wang J，Yang Y，Ma Y，et al.Potential regulatory role of lncRNA-miRNA-mRNA axis in osteosarcoma[J].Biomed Pharmacother，2020，121：109627.

[5]Wang J，Shen J.LncRNA HOXA11-AS aggravates the keloid formation by targeting miR-148b-3p/IGFBP5 axis[J].Biochem Biophys Res Commun，2021，581：60-67.

[6]张翠，王珺，王凯波，等.重楼皂苷Ⅰ通过调控LncRNA CEBPA-AS1/miR-195-5p通路抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及促进细胞凋亡的初步研究[J].中国美容医学，2021，30（9）：12-16.

[7]Sun Y，Niu X，Wang G，et al.A novel lncRNA ENST00000512916 facilitates cell proliferation，migration and cell cycle progression in ameloblastoma[J].Onco Targets Ther，2020，13：1519.

[8]Li J，Chen L，Cao C，et al.The long non-coding RNA LncRNA8975-1 is upregulated in hypertrophic scar fibroblasts and controls collagen expression[J].Cell Physiol Biochem，2016，40（1-2）：326-334.

[9]Yuan W，Sun H，Yu L.Long non-coding RNA LINC01116 accelerates the progression of keloid formation by regulating miR-203/SMAD5 axis[J].Burns，2021，47（3）：665-675.

[10]Chen L J，Yuan M X，Ji C Y，et al.Long non-coding RNA CRNDE regulates angiogenesis in hepatoblastoma by targeting the miR-203/VEGF-A axis[J].Pathobiology，2020，87（3）：161-170.

[11]胡銀娥.肿瘤坏死因子α刺激基因-6和CXC趋化因子配体8在瘢痕疙瘩不同部位中的表达及意义[J].安徽医药，2021，25（7）：1354-1358.

[12]Cui J，Li Z，Jin C，et al.Knockdown of fibronectin extra domain B suppresses TGF-β1-mediated cell proliferation and collagen deposition in keloid fibroblasts via AKT/ERK signaling pathway[J].Biochem Biophys Res Commun，2020，526（4）：1131-1137.

[13]Campbell C A，Burdick M D，Strieter R M.Systemic fibrocyte levels and keloid expression of the chemoattractant cxcl12 are upregulated compared with patients with normal scar[J].Ann Plast Surg，2021，87（2）：150-155.

[14]Cui J，Li Z，Jin C，et al.Knockdown of fibronectin extra domain B suppresses TGF-β1-mediated cell proliferation and collagen deposition in keloid fibroblasts via AKT/ERK signaling pathway[J].Biochem Biophys Res Commun，2020，526（4）：1131-1137.

[15]Li J，Gao Y，Li Q，et al.LncRNA COL1A2-AS1 promotes skin fibroblast apoptosis by repressing p-Smad3 and promoting β-catenin expression[J].Exp Dermatol，2021，30（8）：1090-1098.

[16]Nong Q，Li S，Wu Y，et al.LncRNA COL1A2-AS1 inhibits the scar fibroblasts proliferation via regulating miR-21/Smad7 pathway[J].Biochem Bioph Res Co，2018，495（1）：319-324.

[17]Chen L J，Yuan M X，Ji C Y，et al.Long non-coding RNA CRNDE regulates angiogenesis in hepatoblastoma by targeting the miR-203/VEGFA axis[J].Pathobiology，2020，87（3）：161-170.

[收稿日期]2022-09-07

本文引用格式：詹明峰，张文娟，孙士芳，等.LNCRNA8975-1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖周期和迁移的影响及其机制[J].中国美容医学，2023，32（8）：35-40.