HA、LN及PⅢP检测在CHB患者肝纤维化的早期诊断中的价值分析#

翟丽娜 谭莉霞 魏书堂 武利萍*

（河南大学第一附属医院消化内科，河南 开封 475001）

CHB疾病属于临床上常见的肝病内科慢性疾患，发病原因与家族遗传、幼儿期感染病毒、血液感染等因素影响有关。其主要临床表现及体征包括恶心、乏力、腹胀、食纳差、肝脏部位疼痛等，进一步进展可出现脾大、肝掌、食管胃底静脉曲张、腹水和肝性脑病等，更严重时甚至危害患者的生命安全，对社会的危害性较大。肝脏的纤维化属于CHB疾病的病理基础，肝纤维化早期尚可逆转，当其进入发展期时，肝纤维化状态不可逆，且随着病龄的增长逐渐发展至肝硬化。因此尽早发现并诊断CHB疾病，对帮助评估病情状况和制定合理的治疗计划具有重要意义。临床上常采用血生化检查来辅助诊断CHB疾病和评估该疾病的病情严重程度[1]。其中HA作为糖胺多糖类物质的一种，其水平随着肝纤维化程度的发展，随之升高[2]。LN是基底膜的主要成分之一，有文献报道，LN水平一定程度上反映了肝纤维化的范围[3]。PⅢP属于N端肽，其浓度水平随着肝纤维化的程度增加[4]。为此，本文探讨HA、LN及PⅢP检测对CHB患者肝纤维化的早期诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2019年8月-2020年3月期间收治的疑似CHB的65例患者的临床资料，经穿刺活检证实CHB患者63例。纳入标准：实验资料完整；全程参与并配合研究项目者；均经组织穿刺活检证实且符合《CHB诊断指南》的相关诊断标准[5]；排除标准：急性乙型肝炎；有精神疾患不能配合研究项目者；合并有其他感染性疾病者。本研究经医院医学伦理委员为知情同意。其中男性32例，女性31例，年龄19-67岁，平均年龄（36.45±15.01）岁。另外选取同期健康体检者58例，设为对照组，其中男性30例，女性28例，年龄21-65岁，平均年龄（36.13±14.98）岁。

1.2 方法

1.2.1 HA、LN和PⅢP的检测

所有患者于清晨空腹状态下采集肘外周静脉血6 mL，置于三份真空离心管中，晃动试管充分混匀，以3000 r·min-1离心10 min，获得上层血清，置于-20℃冰箱内冷冻待测，分别用于检测HA、LN和PⅢP。采用放射免疫法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，RIA）对血清HA水平进行检测，采用酶联免疫吸附法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）对血清LN、PⅢP水平进行检测，所有配套试剂盒（来自上海奥瑞诊断试剂有限公司）；所有检测项目均由严格按照试剂说明书进行规范检测操作。

1.2.2 CHB患者病情进展阶段的判定标准及分组

阶段包括慢性乙型肝炎轻度、中度、中度及肝硬化。慢性乙型肝炎轻度：没有黄疸发生且转氨酶在正常值2倍以下，凝血时间值正常范围内；慢性乙型肝炎中度：轻度黄疸，转氨酶正常值2倍以上5倍以下，凝血酶时间轻度延长；慢性乙型肝炎重度：中重度黄疸，转氨酶水平高，凝血时间中度延长，腹胀乏力等症状明显；肝硬化：重度黄疸，白蛋白水平低于35g，胃镜提示静脉曲张征象，血常规血小板计数下降。

1.2.3 肝纤维化分期方法

肝纤维化分期包括：S0、S1、S2、S3、S4期。S0：一般肝脏不存在纤维化；S1：纤维化范围小，不影响肝脏小叶结构及微循环状态；S2：小叶内出现纤维间隔，不影响微循环状态；S3：破坏肝小叶；S4：形成假小叶，并对肝实质产生破坏，影响肝脏功能[6]。

1.2.4 肝功能（Child-Pugh，CHILD）分级

三个大项总分为15分，A级5-6分；B级7-9分；C级大于10分[7]。

1.2.5 诊断价值分析方法

包括诊断准确率、灵敏度及特异度。诊断准确率=（真阳性人数+真阴性人数）÷总人数×100%，特异度=（真阴性人数÷金标准阴性人数）×100%，灵敏度=（真阳性人数÷金标准阳性人数）×100%。

1.3 统计学方法

将采用SPSS18.0处理软件对本研究数据进行统计分析，计量资料使用平均数±标准差（±SD）表示，两两间数据使用t检验；计数数据采用百分比（%）表示，采用χ2检验；采用多元Logistic回归分析影响妊娠期高血压疾病的危险因素，所有数据均用P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 CHB患者病情进展阶段

63例CHB患者的疾病分型为：23例慢性乙型肝炎轻度，16例慢性乙型肝炎中度，15例慢性乙型肝炎重度，9例肝硬化。

2.2 各阶段CHB患者和对照组血清HA、LN及PⅢP水平

肝硬化组血清HA、LN及PⅢP水平均高于慢性乙型肝炎重度组、中度组、轻度组和对照组，比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 各阶段CHB患者和对照组血清HA、LN及PⅢP水平（±SD）

表1 各阶段CHB患者和对照组血清HA、LN及PⅢP水平（±SD）

注：五组间比较，aP＜0.05。

组别 例数 HA(ng·mL-1)慢性乙型肝炎轻度 23 66..69±43.23a 98.69±23.46a 165.21±37.21a LN(μg·L-1) PⅢP(μg·L-1)慢性乙型肝炎中度 16 89.64±54.21a 103.58±38.21a 178.68±55.46a慢性乙型肝炎重度 15 90.68±68.21a 110.47±39.21a 183.54±60.19a肝硬化 9 142.68±77.36a 139.54±12.88a 240.69±79.99a对照组 58 51.03±13.21 75.03±12.36 79.10±19.98

2.3 肝纤维化分期与HA、LN及PⅢP的水平关系

肝纤维化分期S4期血清HA、LN及PⅢP水平均高于S2-S3、S0-S1期和对照组，比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 肝纤维化分期与HA、LN及PⅢP的水平关系（±SD）

表2 肝纤维化分期与HA、LN及PⅢP的水平关系（±SD）

注：四组间比较，aP＜0.05。

分期 例数 HA(ng·mL-1) LN(μg·L-1) PⅢP(μg·L-1)S0-S1 20 50.32±11.11a 188.46±23.46a 141.58±21.21a S2-S3 28 53.65±16.25a 289.48±27.68a 185.85±30.12a S4 15 92.36±66.66a 378.36±89.35a 246.38±35.69a对照组 58 48.34±9.98 136.15±18.21 82.32±34.56

2.4 CHILD分级与血清HA、LN及PⅢP的水平关系

CHILD分级C级组血清HA、LN及PⅢP水平均高于S2-S3、S0-S1和对照组，比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 CHILD分级与血清HA、LN及PⅢP的水平关系（±SD）

表3 CHILD分级与血清HA、LN及PⅢP的水平关系（±SD）

注：三组间比较，aP＜0.05。

分级 例数 HA(ng·mL-1) LN(μg·L-1) PⅢP(μg·L-1)A级 21 287.41±66.66 110.41±29.68 12.35±4.21 B级 32 578.59±144.56a 184.35±39.87a 19.68±8.45a C级 10 1087±615.42a 241.48±55.51a 22.26±11.24a

2.5 分析HA、LN及PⅢP联合检测对CHB患者肝纤维化的诊断价值

以组织穿刺活检为金标准比较，HA、LN及PⅢP联合检测诊断准确率、灵敏度、特异度分别为83.82%（57/68）、94.82%（55/58）、40.00%（2/5）。

血清HA主要通过肝脏摄取和降解，当肝脏细胞受损后，多种细胞因子互相作用从而激活了肝窦内皮细胞，使HA水平增高。同时由于肝细胞受损，导致HA清除率也随之下降[2]。正常肝脏内LN分布在血管和胆管的基底膜中，且含量极少，随着肝细胞的受损，肝纤维化发生，导致LN沉积量增多，其水平也随着升高[3]。有文献报道，PⅢP是最早随着肝纤维化发生而水平升高的血清分子，是反应肝纤维化活动性的主要指标[4]。

本研究结果显示，以组织穿刺活检为金标准比较，HA、LN及PⅢP联合检测诊断准确率、灵敏度、特异度分别为83.82%（57/68）、94.82%（55/58）、40.00%（2/5）、且肝硬化组血清HA、LN及PⅢP水平均显著高于慢性乙型肝炎重度组、中度组、轻度组和对照组，表示HA、LN及PⅢP随着CHB疾病的病情严重程度而升高。分析原因是因为肝脏受损后，激活了肝窦内皮细胞HA清除率下降，同时使LN沉积量增多和PⅢP活性增加。研究结果显示，肝纤维化S4组血清HA、LN及PⅢP水平均高于S2-S3、S0-S1和对照组，表明HA、LN及PⅢP水平可以作为辅助诊断CHB疾病和其肝纤维化严重程度的重要指标，分析原因是因为HA、LN及PⅢP水平参与了CHB疾病肝纤维的发生和发展过程。研究结果显示，CHILD分级C级组血清HA、LN及PⅢP水平均显著高于S2-S3、S0-S1和对照组，该结果与以往实验相似，间接证实血清HA、LN及PⅢP水平会随着CHB疾病肝纤维化病情严重程度而变化[4]。

综上所诉，血清HA、LN及PⅢP参与CHB患者肝纤维化的发生与发展，能作为早期疾病诊断CHB肝纤维化和评估病情严重程度的重要指标，具有一定的临床推广和应用价值。