帕金森病患者轻度认知功能障碍与miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 水平的相关性

陈徐彬，郭子进，毛平安

帕金森病是一种临床常见的神经退行性疾病，以运动迟缓、静止性震颤、姿势平衡障碍等为主要临床表现，随病情进展可能出现认知功能障碍，严重影响患者生存质量[1]。现阶段，临床缺乏对帕金森病患者认知功能障碍的早期识别，易延误治疗。因此，积极寻找与帕金森病并发认知功能障碍相关的指标，预测患者认知功能障碍发生状况，并尽早采取对应干预措施，对改善患者预后有积极意义。微小RNA（miRNA）是一类具有调控基因表达作用的细胞因子，miR-19b-3p 作为微小RNA 家族成员，已被报道与神经元凋亡、炎症等有关[2]。锰超氧化物歧化酶（MnSOD）是机体重要自由基清除剂，可清楚体内自由基，抑制氧化损伤进程[3]。一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）为血管活性物质，二者相互作用，维持血管收缩功能；但当内皮受损时，二者释放异常，比值平衡紊乱，会诱发一系列应激反应[4]。本文探讨miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 水平与帕金森病认知功能障碍的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 采用前瞻性研究方法，选取2020 年

1 月至2022 年1 月丽水市人民医院收治的86 例帕金森病患者为研究对象，其中男54 例，女32 例；年龄56 ～74 岁，平均（65.9±4.2）岁；体质量指数19 ～30 kg/m2，平均（25.64±2.16）kg/m2；受教育年限2 ～16 年，平均（7.24±2.73）年。本研究经丽水市人民医院科研伦理委员会审批通过。

1.2 入组标准 纳入标准：（1）符合帕金森病诊断标准[5]；（2）肝肾功能基本正常；（3）依从性良好，能配合完成研究相关项目检查；（4）患者或家属签署知情同意书；（5）年龄50 ～80 岁。排除标准：（1）既往有脑部创伤、脑血管疾病史；（2）合并阿尔茨海默病；（3）合并精神疾病；（4）伴听力、视力、语言表达障碍；（5）合并血液系统疾病或恶性肿瘤。

1.3 方法

1.3.1 实验室指标检测 入院时，采集患者空腹静脉血5 ml，以3 000 r/min 的转速离心10 min，取血清，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）技术检测miR-19b-3p 水平，试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；采用酶联免疫吸附法检测MnSOD、NO、ET-1 水平，并计算NO/ET-1 值，试剂盒购自美国R&D 公司。

1.3.2 认知功能评估 采用蒙特利尔认知评估量表（MoCA）[6]评估患者认知功能，该量表包含命名能力（3 分）、定向力（6 分）、语言（3 分）、延迟回忆（5 分）、视空间与执行能力（5 分）、抽象（2 分）、注意力（6 分）7 个维度，总分30 分，若受教育年限≤12 年则加1分，评分越高则认知功能越佳，其中评分＜26 分视为认知功能障碍。

1.4 统计方法 采用SPSS 23.0 统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，两组比较采用t 检验；计数资料比较采用2检验；相关性分析采用点二列相关性检验；危险因素分析采用Logistic 回归分析；诊断效能比较采用绘制ROC 曲线分析，曲线下面积（AUC）评价：AUC≤0.50 视为无预测价值，0.50 ＜AUC≤0.70 视为预测价值较低，0.70 ＜AUC≤0.9 视为预测价值中等，AUC ＞0.9 视为预测价值较高。P ＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 轻度认知功能障碍发生状况 86 例帕金森病患者中发生轻度认知功能障碍31 例，占36.05%。

2.2 认知功能障碍组与认知功能正常组临床资料比较 两组年龄、性别、病程、受教育年限等资料差异均无统计学意义（均P ＞0.05）。见表1。

表1 认知功能障碍组与认知功能正常组临床资料比较

2.3 认知功能障碍组与认知功能正常组实验室指标比较 认知功能障碍组miR-19b-3p 水平高于认知功能正常组，MnSOD、NO/ET-1 水平低于认知功能正常组（均P ＜0.05）。见表2。

表2 认知功能障碍组与认知功能正常组实验室指标比较

2.4 miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 与帕金森病患者并发认知功能障碍的相关性分析 miR-19b-3p 与帕金森病患者并发认知功能障碍呈正相关（r=0.611，P＜0.05）；MnSOD、NO/ET-1 与帕金森病患者并发认知功能障碍呈负相关（r=-0.579、-0.674，均P＜0.05）。

2.5 帕金森病患者并发认知功能障碍的危险因素将miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 作为自变量（均为连续变量），帕金森病患者认知功能障碍发生情况作为因变量（认知功能障碍=1，认知功能正常=0），经logistic 回归分析显示，miR-19b-3p 可能是帕金森病患者并发认知功能障碍的危险因素（OR ＞1，P ＜0.05），MnSOD、NO/ET-1 是保护因素（OR ＜1，均P＜0.05），见表3。

表3 帕金森病患者并发认知功能障碍危险因素的logistic 回归分析

2.6 miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 预测帕金森病患者并发认知功能障碍的价值分析 将miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 作为检验变量，将帕金森病患者认知功能状况作为状态变量（认知功能障碍=1，认知功能正常=0）绘制ROC曲线，结果显示，miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 预测帕金森病并发认知功能障碍的AUC 均＞0.8，具有一定预测价值，见图1。

图1 miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 预测帕金森病患者并发认知功能障碍的ROC 曲线

3 讨论

认知功能障碍在帕金森病患者中较为常见，有研究指出，30%～60%的帕金森病患者伴有不同程度认知功能障碍[7]。现阶段，临床关于帕金森病认知功能障碍的病因学机制尚未完全阐明，可能与乙酰胆碱、多巴胺等神经递质失衡及神经病理学改变有关。目前尚无有效干预措施逆转帕金森病认知功能障碍，早期发现并采用相关干预措施延缓病情进展是关键。

神经组织中miRNA 种类丰富、组织特异性明显，当miRNA 异常表达时，可破坏相应特异性蛋白表达平衡，并在神经系统疾病中发挥重要作用[8]。在生物体系中MnSOD 是抗氧化酶的重要组成部分，具有抗氧化作用，能够催化超氧阴离子自由基生成过氧化氢和氧，减轻自由基对细胞的损伤[9]。NO 属舒血管物质，ET-1 属强缩血管物质，两种物质存在拮抗作用，当血管内皮受损时，二者变化程度并不一致，因此，NO/ET-1 比值更加能够反映血管内皮受损情况[10]。本研究结果显示，认知功能障碍组miR-19b-3p 水平高于认知功能正常组，MnSOD、NO/ET-1 水平低于认知功能正常组（均P ＜0.05），这提示三项指标与帕金森病认知功能障碍存在明显相关性。且Logistic 回归分析结果显示，miR-19b-3p可能是帕金森病患者并发认知功能障碍的危险因素；MnSOD、NO/ET-1 是保护因素。相关研究指出，在神经母细胞瘤中，miR-19b-3p 能够负性调节-分泌酶表达，而-分泌酶能够阻碍细胞生成蛋白激酶A，影响记忆功能，此外，-分泌酶还可能参与脑小血管损伤，降低患者认知功能，miR-19b-3p 可能通过干预-分泌酶表达来改善患者认知功能。MnSOD 对多巴胺能神经元具有保护作用，能够促进神经元再生，改善患者认知状况；该物质还能够减弱海马神经元应激作用，改善学习能力与记忆能力，进而提升认知功能。NO 可通过舒张脑部血管，改善脑部血流灌注，还能够抑制内皮细胞、单核细胞黏附，起到保护血管内皮的作用；ET-1 在机体发生氧化应激反映时会大量分泌，能够作用于神经细胞，刺激兴奋性氨基酸释放，导致钙内流，引起细胞凋亡；ET-1 还可促进花生四烯酸代谢致使大量氧自由基产生，并加重炎症反应，引起脑损伤。NO/ET-1 比值高，则表明血管内皮受损程度较轻，患者认知状况也较好。

综上所述，帕金森病患者轻度认知功能障碍与miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1 密切相关，临床应早期识别上述指标，为预测患者认知功能障碍提供参考依据。