苍耳子炮制前后急性毒性及毒效成分含量差异研究

张静　刘倩　范雪梅　韩福国　张贵民　关永霞　程国良　李冰　王义明　罗国安　刘清飞

摘要 目的：研究苍耳子炮制前后对小鼠的急性毒性及主要毒性成分、药效成分的含量差异。方法：急性毒性实验采用小鼠灌胃给药测定其半数致死量（LD50）和最大耐受量（MTD），并通过组织病理切片观察其对小鼠肝、肾等脏器的损伤；采用高效液相色谱法比较苍耳子炮制前后2种水溶性苷类毒性成分和4种酚酸类有效成分的含量差异。结果：苍耳子的水煎剂和水煎剂醇沉沉淀，以及炒苍耳子的水煎剂和水煎剂醇沉沉淀的MTD分别为291.73 g生药/kg、405.75 g生药/kg、318.64 g生药/kg和480.77 g生药/kg。炮制前后苍耳子水煎剂醇沉上清的LD50分别为468.18 g生藥/kg和573.48 g生药/kg。组织病理结果显示死亡小鼠多数脏器出现不同程度的充血，以肝、肺、胃和小肠最为明显。苍耳子炮制后，水煎剂和水煎剂醇沉上清液中的羧基苍术苷含量均显著降低（均P<0.01）；炒苍耳子中咖啡酸和异绿原酸C的含量显著升高（均P<0.01）。结论：苍耳子炮制后毒性可显著降低，有效成分溶出增加。水煎剂醇沉上清液取自苍耳子的主要毒性部位。

关键词 苍耳子；炮制；水煎剂；醇沉；急性毒性；酚酸类成分；水溶性苷类成分；高效液相色谱法

Comparative Analysis of Acute Toxicity and Content of Toxic and Active Components in Crude and Processed Xanthii Fructus

ZHANG Jing1，2，LIU Qian1，2，FAN Xuemei2，HAN Fuguo2，ZHANG Guimin3，GUAN Yongxia3，CHENG Guoliang3，LI Bing3，WANG Yiming4，LUO Guoan4，LIU Qingfei2

（1 School of Pharmacy，Shaanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046，China; 2 School of Pharmaceutical Sciences，Tsinghua University，Beijing 100084，China; 3 State Key Laboratory of Generic Manufacture Technology of Chinese Traditional Medicine，Lunan Pharmaceutical Group Corporation，Linyi 276006，China; 4 Department of Chemistry，Tsinghua University，Beijing 100084，China）

Abstract Objective：To study the difference in acute toxicity in mice and the content of toxic and active components of Xanthii Fructus before and after stir-frying.Methods：In the acute toxicity experiment，mice were administered by gavage，and the median lethal dose（LD50） and the maximum tolerated dose（MTD） in mice were determined.The damage to the liver，kidney，and other organs of mice was observed by histopathological sections.The content of two water-soluble glycosides and four phenolic acids of crude and processed Xanthii Fructus was quantitatively determined by high-performance liquid chromatography（HPLC）.Results：MTDs of water decoction and precipitate after alcohol precipitation of crude Xanthii Fructus and water decoction and precipitate after alcohol precipitation of processed Xanthii Fructus were 291.73，405.75，318.64，and 480.77 g/kg（calculated based on the crude drug），respectively.The LD50 values of supernatant after alcohol precipitation of crude and processed Xanthii Fructus were 468.18 and 573.48 g/kg（calculated based on the crude drug），respectively.Hyperemia of different degrees was observed in the pathological sections of the main organs of the dead mice，especially in the liver，lung，stomach，and small intestine.The content of carboxyatractyloside in the water decoction and supernatant after alcohol precipitation decreased after stir-frying（both P<0.01），and the content of caffeic acid and isochlorogenic acid C increased（both P<0.01）.Conclusion：After stir-frying，the toxicity of Xanthii Fructus was significantly reduced and the dissolution of active components increased.The supernatant after alcohol precipitation of water decoction was the main toxic part of Xanthii Fructus.

Keywords Xanthii Fructus; Stir-frying; Water decoction; Alcohol precipitation; Acute toxicity; Phenolic acids; Water-soluble glycosides; HPLC

中图分类号：R285.5文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2023.01.009

苍耳子是菊科苍耳（Xanthium sibiricum Patrin.ex Widder）的干燥成熟带总苞的果实，《神农本草经》记载为中品，味甘、温，归肺经，具有散风湿、通鼻窍的功效，主要用于风寒头痛、鼻渊流涕、风湿痹痛、风疹瘙痒等症的治疗。苍耳子为历代治疗鼻渊头痛的要药，在治疗鼻渊的方剂中常作为君药使用［1］。近年来其复方制剂不断研发，例如鼻渊通窍颗粒由《严氏济生方》中的经典名方苍耳子散加减而成，以苍耳子和辛夷作为君药，对急慢性鼻炎、鼻窦炎等外邪犯肺证具有显著疗效［2］。

苍耳子主要含有酚酸类、倍半萜内酯类、噻嗪双酮杂环类等活性化合物，具有抗炎镇痛、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等药理作用［3］。苍耳子生品有毒性，一般炒制后入药，过量使用或者炮制不当会导致中毒甚至死亡［4］。羧基苍术苷和苍术苷是苍耳子的主要毒性成分［5］，炒制时会被高温破坏，且随温度升高，其含量下降［6］。目前已有学者开展了苍耳子炮制前后毒性和化学成分的相关研究，但研究比较分散，结果也存在差异。鄢良春等［7］研究发现，苍耳子和炒苍耳子对小鼠毒性的差异不明显，但二者水提物的毒性明显高于醇提物。吴慧等［8］研究发现，苍耳子的毒性主要是水提醇沉后的醇提物，炮制后醇提物的毒性明显降低。有研究发现苍耳子炒制后绿原酸、1，5-二咖啡酰奎宁酸的含量降低［9］，总酚酸的含量也降低［10］。但杜蓉等［11］研究发现，炒苍耳子水煎剂中的绿原酸、1，5-二咖啡酰奎宁酸及总酚酸含量反而升高。

本文参考苍耳子在临床使用的常用剂型，对苍耳子炮制前后不同提取部位的急性毒性以及主要水溶性苷类与酚酸类成分的含量变化进行比较研究，明确苍耳子主要的毒性提取部位及炮制对苍耳子急性毒性、不同提取部位中毒性成分和药效成分含量的影响，并探讨急性毒性机制，为苍耳子炮制后“减毒增效”理论提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 选取无特定病原体（Specific Pathogen-Free，SPF）级ICR小鼠180只，6周龄，雌雄各半，体质量22～28 g，由维通利华实验动物技术有限公司提供，生产许可证号：SCXK（京）2016-0006。实验期间饲养于清华大学实验动物中心，温度22～23 ℃，湿度60%～70%，每天光照与黑夜交替各12 h。本实验通过动物福利伦理委员会批准（伦理审批号：21-LQF1）。

1.1.2 药物 苍耳子（北京万泰利克药业有限公司，批号：20201103S）和炒苍耳子（北京万泰利克药业有限公司，批号：20201103P），其中炒苍耳子为同批苍耳子生品按照2020版《中华人民共和国药典》［12］清炒法（通则0213）炮制而成。经北京协和医学院药用植物研究所路娟副研究员鉴定为菊科苍耳子属植物苍耳Xanthium sibiricum Patrin.ex Widder的干燥果实。

1.1.3 试剂与仪器 甲醇（默克公司，德国，批号：WXBB6448V），乙腈（霍尼韦尔国际公司，批号：UC2A1H），甲酸（北京现代东方精细化学品有限公司，批号：20111010），乙酸铵（北京迈瑞达科技有限公司，批号：02005009），咖啡酸（成都普菲德生物技术有限公司，批号：17122804），绿原酸（成都普菲德生物技术有限公司，批号：17101904），异绿原酸A（成都普菲德生物技术有限公司，批号：17061201），异绿原酸C（成都普菲德生物技术有限公司，批号：160724），羧基苍术苷三钾盐（上海源叶生物科技有限公司，批号：Z17O8X44646）和苍术苷二钾盐（上海源叶生物科技有限公司，批号：Z17O8X44547）；高效液相色谱系统（岛津公司，日本，型号：LC-20AT），分析天平（梅特勒-托利多，瑞士，型号：X2015DU），旋转蒸发仪（步琦公司，瑞士，型号：R-3HB），真空干燥箱（上海恒科仪器有限公司，型号：DZF-6050），倒置显微镜（奥林巴斯，日本，型号：IX73P1F），低速离心机（北京京立离心机有限公司，型号：LD5-2B）。

1.2 方法

1.2.1 急性毒性研究

1.2.1.1 受试药物的制备 称取苍耳子和炒苍耳子，分别加10倍量水，浸泡0.5 h，煎煮2 h/次，煎煮2次后合并煎液，滤过。将每种滤液按体积分成2等份，一份浓缩、干燥，得苍耳子水煎剂干膏（Decoction of Xanthii Fructus，DX）和炒苍耳子水煎剂干膏（Decoction of Fried Xanthii Fructus，DFX），得率分别为8.29%和7.59%；另一份浓缩至密度约为1.15 g/mL，加入乙醇至浓度80%，放置12 h后，2 130×g离心10 min，分离上清液和沉淀，分别进行干燥，即得苍耳子水煎剂醇沉上清干膏（Alcohol Supernatant of Xanthii Fructus，SX）、炒苍耳子水煎劑醇沉上清干膏（Alcohol Supernatant of Fried Xanthii Fructus，SFX）、苍耳子水煎剂醇沉沉淀干膏（Alcohol Precipitation of Xanthii Fructus，PX）和炒苍耳子水煎剂醇沉沉淀干膏（Alcohol Precipitation of Fried Xanthii Fructus，PFX）。SX和PX得率分别为3.69%和4.55%，SFX和PFX得率分别为3.28%和4.04%。干膏于干燥条件下4 ℃密闭保存，临用以纯水现配。

1.2.1.2 最大耐受量（Maximum Tolerated Dose，MTD）测定 预实验发现，受最大给药容积的影响，DX、DFX、PX和PFX对小鼠最大剂量给药，给药后小鼠未出现死亡现象，无法测定药物对小鼠的半数致死量（50％ Lethal Dose，LD50），故采用1 d内多次给药测定其MTD。将小鼠随机分为正常对照组和4种提取物给药组，每组10只，雌雄各半。禁食不禁水12 h后，灌胃给药3次，间隔4 h，单次给药体积为40 mL/kg，DX、DFX、PX和PFX总给药剂量分别为291.73 g生药/kg、318.64 g生药/kg、405.75 g生药/kg、456.97 g生药/kg。正常对照组小鼠灌胃等量体积溶剂。给药后每天观察小鼠的毛色、进食与活动状态，记录体质量、出现的毒性反应和死亡情况，持续观察14 d。

1.2.1.3 LD50LD50测定 采用小鼠急性系统毒性试验方法［13］，将小鼠随机分为13组，每组10只，雌雄各半，包括空白对照组、SX和SFX各6个剂量组。根据预试验获得的SX和SFX小鼠灌胃给药的绝对致死量（Absolute Lethal Dose，LD100），设为最高剂量组给药剂量，组间剂量比为1∶0.80～1∶0.95。SX和SFX组1～6对应的给药剂量分别为294.91 g生药/kg（SX组1）、368.64 g生药/kg（SX组2）、419.90 g生药/kg（SX组3）、460.80 g生药/kg（SX组4）、518.04 g生药/kg（SX组5）、576.00 g生药/kg（SX组6）和375.84 g生药/kg（SFX组1）、442.17 g生药/kg（SFX组2）、520.20 g生药/kg（SFX组3）、612.00 g生药/kg（SFX组4）、720.00 g生药/kg（SFX组5）、847.00 g生药/kg（SFX组6）。试验前禁食不禁水36 h，给药体积为40 mL/kg，灌胃给药1次；正常对照组小鼠灌胃等量体积的溶剂。给药后2 h内密切观察，当天每4小时观察1次，之后每天观察并称重，连续观察7 d，详细记录小鼠出现的毒性反应和死亡情况。对SX和SFX的最高剂量组死亡的小鼠取主要脏器心、肝、脾、肺、肾、胃和肠组织进行组织病理学检查。

1.2.2 水溶性苷类成分含量测定

1.2.2.1 色谱条件 色谱柱：Positisil ODS-P（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：0.01 mol/L乙酸铵水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱：0～12 min：11%～15% B；12～30 min：15%～18% B；流速：1.0 mL/min；检测波长：203 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。

1.2.2.2 对照品溶液的制备 取羧基苍术苷三钾盐和苍术苷二钾盐对照品适量，精密称定，分别加纯水制成1 mL含羧基苍术苷三钾盐0.75 mg、苍术苷二钾盐1.46 mg的溶液，即得各对照品储备液（折算成羧基苍术苷、苍术苷浓度分别为0.65 mg/mL和1.32 mg/mL）。

1.2.2.3 线性关系考察 精密吸取“1.2.2.2”项下的各对照品储备液，用纯水稀释配制为梯度浓度的混合溶液，按1.2.2.1项下高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）条件进行测定，以峰面积值为纵坐标，对照品浓度（g/mL）为横坐标，分别绘制标准曲线，计算回归方程。

1.2.2.4 供试品溶液的制备与测定 精密称取“1.2.1.1”项下制备的DX、DFX、SX和SFX各0.10 g，置离心管中，精密加入30 mL纯水，超声（500 W，40 kHz）10 min，摇匀后2 130×g离心10 min取上清液，用0.45 m的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得DX、DFX、SX和SFX的供试品溶液。按1.2.2.1项下HPLC条件进行测定，计算各供试品中的羧基苍术苷和苍术苷的含量。

1.2.3 酚酸类成分的含量测定

1.2.3.1 色谱条件 色谱柱：Agilent TC-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）。流动相：0.5%甲酸水溶液（A）-甲醇（B）。梯度洗脫：0～35 min10%～17% B；35～45 min，17%～35% B；45～55 min35% B；55～65 min35%～60% B；65～85 min60%～95% B。流速1.0 mL/min，检测波长320 nm，柱温30 ℃，进样量10 μL。

1.2.3.2 对照品溶液的制备 取咖啡酸、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1 mL含咖啡酸0.45 mg、绿原酸0.82 mg、异绿原酸A 0.11 mg、异绿原酸C 0.33 mg的溶液，即得各对照品储备液。

1.2.3.3 线性关系考察 精密吸取“1.2.3.2”项下的各对照品储备液，用甲醇稀释配制为梯度浓度的混合溶液，按“1.2.3.1”项下HPLC条件进行测定，以峰面积值为纵坐标，对照品浓度（g/mL）为横坐标，分别绘制标准曲线，计算回归方程。

1.2.3.4 供试品溶液的制备及与测定 取苍耳子和炒苍耳子药材，粉碎过三号筛，各精密称定1.0 g，置具塞锥形瓶中，精密加入30 mL甲醇，称定重量，浸泡30 min后，超声（500 W，40 kHz）提取60 min，放至室温后以甲醇补足重量。摇匀后2 130×g离心10 min取上清液，用0.45 m的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得苍耳子和炒苍耳子的供试品溶液。按“1.2.3.1”项下HPLC条件进行测定，计算各供试品中的咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸C和绿原酸的含量。

1.2.4 统计学方法 采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析，采用Bliss法计算LD50和95%CI；计量资料用均数±标准差（±s）表示，采用t检验和单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 急性毒性研究结果

2.1.1 MTD测定结果 与正常对照组比较，各给药组小鼠给药后均出现活动减少，部分动物尾部轻微发绀，对外界刺激有反应。PX和PFX组在给药后10～30 min恢复活动，开始进食；而DX组和DFX组的小鼠在给药后20 min～1 h恢复活动；各组小鼠在给药后第2天均恢复正常。观察14 d，动物行为活动、摄食、饮水均未见异常，各给药组小鼠未出现死亡。PX的小鼠灌胃给药MTD明显高于PFX的，且二者的小鼠灌胃给药MTD均明显高于DX组和DFX组；观察期间各组小鼠的体质量增长与正常对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。说明苍耳子的水煎剂醇沉沉淀毒性低于水煎剂，二者不良反应均不明显。见表1。

2.1.2 LD50测定结果

2.1.2.1 毒性反应及LD50值 SX和SFX给药5 min后，各组小鼠均出现静卧不动，呼吸变深变慢。给药15 min后，毒性严重的小鼠开始焦虑走动，进而出现剧烈震颤、抽搐、跳跃，呼吸加深停止后，心脏停止跳动，小鼠死亡。各组存活小鼠表现为心跳加快、呼吸变慢、静卧休息，未出现痛苦挣扎行为，在给药后30～240 min内逐渐恢复行动，并开始进食，第2天均恢复正常，给药剂量越高，小鼠恢复越慢。SX给药最高剂量组（SX组6，576.00 g生药/kg）和SFX给药最高剂量组（SFX组6，847.00 g生药/kg）小鼠死亡多发生在给药后10～40 min内，其余剂量组死亡小鼠的死亡时间主要分布于给药后30～120 min间。对死亡小鼠立即解剖，可见小鼠胃肠均有大量尚未吸收的药液，肠道大部分充满透明的黄色液体；个别小鼠胃底部有充血，SX组5（518.04 g生药/kg）和SFX组5（720.00 g生药/kg）的个别小鼠肝脏大叶及小叶的边缘色泽较淡，为浅粉红色，其余脏器未见明显异常。

统计各剂量组小鼠死亡率，SFX组3（520.20 g生药/kg）与SX组5（518.04 g生药/kg）给药剂量相近，但SFX组3的小鼠死亡率（40%）明显低于SX组5的（90%）。通过Bliss法计算得SX和SFX的LD50及其95%CI，SX为468.18（426.26～514.22）g生药/kg，SFX为573.48（531.18～618.79）g生药/kg。由结果可知，SFX的LD50明显高于SX，说明炮制后苍耳子水煎剂上清液的急性毒性明显降低。见图1。

2.1.2.2 存活小鼠体质量变化 灌胃给药后，存活小鼠饲养7 d后的体质量变化除了SX高剂量组仅存活的1只体质量增长低于正常对照组外，其余各组差异无统计学意义（均P>0.05），体质量随周龄增长。SFX的各剂量组存活动物的体质量变化与正常对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），均随周龄增长。见表2。

2.1.2.3 毒性靶器官鉴定 SX和SFX最高剂量组死亡小鼠的心、肝、脾、肺、肾、胃和小肠组织病理学检查结果。见图2。苍耳子对小鼠的脏器急性毒性主要表现为臟器充血，肝脏、肺脏、胃黏膜、小肠出现严重充血，心脏、肾脏、脾脏也出现了轻微充血现象。相较SFX而言，SX给药最高剂量组（SX组6，576.00 g生药/kg）小鼠脏器充血现象更为严重。此外，二组小鼠均可观察到肺泡壁细胞层次增厚现象与肝脏吞噬细胞捕获毒性物质现象，其中后者以SX组更为明显。仅SX给药最高剂量组（SX组6，576.00 g生药/kg）小鼠的脾脏出现了早期急性免疫现象，可观察到组织细胞吞噬、增生以及红髓和白髓的细胞结构被破坏现象。综上分析，与炒苍耳子相比，苍耳子水煎剂醇沉上清液对小鼠主要脏器的急性毒性损伤相对更为严重，说明炮制可以减轻苍耳子对小鼠脏器造成的急性损伤。

2.2 水溶性苷类毒性成分差异

2.2.1 标准曲线绘制 建立了羧基苍术苷与苍术苷的标准曲线，线性回归方程和线性范围结果表明2种水溶性苷类成分在相应的浓度范围内线性关系良好。见表3。

2.2.2 供试品中水溶性苷类毒性成分含量测定 通过HPLC测定各供试品中的羧基苍术苷和苍术苷的含量。因二者均为贝壳杉烷型二萜糖苷类成分，具末端吸收，所以色谱图基线均出现一定漂移。见图3。DFX与DX相比，羧基苍术苷的含量显著降低（P<0.01），但苍术苷的含量变化差异无统计学意义（P>0.05）；SFX与SX相比，羧基苍术苷的含量显著降低（P<0.01），但苍术苷的含量差异无统计学意义（P>0.05）。见表4。此外，比较SX与DX以及SFX与DFX，可发现羧基苍术苷与苍术苷的含量在苍耳子水煎剂醇沉上清液中出现了明显富集。上述结果表明，炮制可降低苍耳子中水溶性苷类毒性成分羧基苍术苷的含量，从而实现减毒作用；对于苍耳子与炒苍耳子，水煎剂醇沉上清液均取自其主要毒性部位。

2.3 酚酸类有效成分含量差异

2.3.1 标准曲线的绘制 建立了咖啡酸、绿原酸、异绿原酸A和异绿原酸C的标准曲线，线性回归方程和线性范围结果表明4种酚酸类成分在相应的浓度范围内线性关系良好。见表5。

2.3.2 供试品中4种酚酸类成分含量测定 通过HPLC法测定苍耳子和炒苍耳子中咖啡酸、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C的含量。见图4。与苍耳子比较，炒苍耳子中咖啡酸和异绿原酸C的含量显著增加（P<0.01），而绿原酸和异绿原酸A的含量在炮制前后无明显改变（P>0.05）。见表6。

3 讨论

苍耳子是古代记载有效但亦有毒的中药，在使用前均必须炒制焦黄，并去刺，才可入药。研究表明，苍耳子毒性成分为主要是苍术苷和羧基苍术苷［5］，后者的毒性是前者的10倍［14］，其毒性机制主要为抑制细胞的氧化磷酸化［15］。在临床上，苍耳子过量使用或炮制不当使用导致中毒、甚至死亡的病例时有报道，值得引起重视。因此，为了保证苍耳子临床使用的安全性，对其炮制前后毒性差异和毒性机制进行系统、深入探索具有重要意义。

本研究采用苍耳子传统用药方式水煎剂，比较其不同提取部位对小鼠的急性毒性差异。MTD测定结果表明，苍耳子和炒苍耳子的水煎剂和水煎剂醇沉沉淀在最大耐受给药剂量下，皆不会导致小鼠死亡，不良反应不明显。鄢良春等［7］研究发现苍耳子水提物对昆明种小鼠（体质量18～22 g）灌胃给药的LD100为210 g生药/kg，但未对毒性成分含量进行检测。而本实验对ICR小鼠（体质量22～28 g）灌胃给药苍耳子水煎剂最大剂量291.73 g生药/kg时仍未出现小鼠死亡，故未能测得其LD100与LD50。推测可能与苍耳子药材质量、提取工艺、动物品系及体质量等因素不同有关。

苍耳子炮制前后水煎剂醇沉上清液LD50测定结果显示，SFX的LD50明显高于SX，同时，从小鼠脏器病理组织切片可以看出，SX对小鼠的脏器损伤较SFX严重。结合HPLC测定的水溶性苷类成分结果，SFX的羧基苍术苷含量明显低于SX，说明苍耳子炮制后毒性降低与毒性成分含量降低有关。炒苍耳子的LD50相当于《中华人民共和国药典》2020年版推荐成人临床口服剂量3～10 g/d的445～1 483倍［12］，表明苍耳子在药典用量下安全性较高。

毒理学研究表明苍耳子毒性作用是多脏器、多靶点、多系统的，主要以肝脏损伤为主，肝毒性机制主要表现为脂质过氧化损伤［16］。从本实验结果看苍耳子主要急性毒性机制是胃、小肠、肺脏、肝脏严重充血，肝功能急剧损害，从而引起小鼠全身中毒而死亡，与文献［7］报道基本一致。

苍耳子中的酚酸类化合物为其主要有效成分［17］，具有抗炎、抑菌、镇痛等作用［18］，其中绿原酸、1，5-二咖啡酰奎宁酸和总酚酸提取物对过敏性鼻炎和鼻窦炎模型动物具有较好的治疗作用［19］。本文对苍耳子炮制前后的4种酚酸类药效代表性成分的含量也进行了比较，结果显示炒苍耳子所含的咖啡酸和异绿原酸C含量明显增加，说明炮制会对苍耳子有效成分含量产生影响，部分酚酸类化合物的含量在炮制后会显著升高。其原因可能是苍耳子炒制后质地变酥脆，利于有效成分的溶出。有研究认为，苍耳子中毒性成分苍耳子苷含于脂肪蛋白中，炮制可使脂肪蛋白中所含蛋白遇高热变性，苷类成分凝固在细胞中不易溶出，从而降低毒性［20］。由此可推测，苍耳子中毒性成分苷类化合物的存在部位可能与有效成分酚酸类化合物的不同。

综上所述，苍耳子经炒制后可“减毒增效”，为其在临床安全使用增加了保障，也为以苍耳子为君药的鼻渊通窍颗粒等中成药制剂临床使用的安全性提供了科学依据和有效保障。

利益冲突声明：无。

参考文献

［1］曾瑾，尹竹君，李莉，等.苍耳子对内毒素免疫敏化大鼠的肝脏毒性［J］.中国实验方剂学杂志，2020，26（15）：75-80.

［2］中国医师协会儿科医师分会儿童耳鼻咽喉专业委员会，中国妇幼保健协会儿童变态反应专业委员会.鼻渊通窍颗粒治疗儿童鼻部炎症专家共识［J］.中国实用儿科杂志，2021，36（8）：561-564.

［3］夏召，张海新，许天启，等.苍耳子的化学成分研究［J］.中国中药杂志，2020，45（12）：2907-2915.

［4］张学梅，张重华.苍耳子中毒及毒性研究进展［J］.中西医结合学报，2003，1（1）：71-73.

［5］章秀梅，李丹，刘丛彬，等.多重PCR方法同时鉴别中药苍耳子及其混淆品［J］.中国中药杂志，2022，47（10）：2605-2613.

［6］胡晓雪，安靖，王光忠.不同炮制温度对炒苍耳子中主要活性成分及毒性成分含量的影响［J］.湖南中医杂志，2015，31（1）：131-134.

［7］鄢良春，张婷婷，赵军宁，等.苍耳子4种提取物小鼠急性毒性比较研究［J］.中国中药杂志，2012，37（15）：2228-2231.

［8］吴慧，王光忠，邵贝贝，等.苍耳子炮制前后不同提取部位的急性毒性实验研究［C］.//中华中医药学会.中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集.贵阳，2011：445-448.

［9］杜蓉，张广播，付巧艳.苍耳子炮制前后绿原酸和1，5-二咖啡酰奎宁酸的含量比较［J］.中国医院药学杂志，2014，34（18）：1576-1578.

［10］盛昌翠，安靖，聂磊，等.苍耳子炒制前后总酚酸的含量比较［J］.湖北中医药大学学报，2013，15（5）：36-38.

［11］杜蓉，任力，张孟佑.苍耳子炒制前后水煎液中酚酸性成分含量比较［J］.中国药师，2016，19（2）：247-250.

［12］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2020：169.

［13］张世玮，陈奇，邓文龙.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：8.

［14］LUCIANI S，MARTINI N，SANTI R.Effects of carboxyatractyloside a structural analogue of atractyloside on mitochondrial oxidative phosphorylation［J］.Life Sci，1971，10（17）：961-968.

［15］KEPHALAS T，ALIKARIDIS F，PANTELIA K，et al.Production of carboxyatractyloside and atractyloside by cell suspension cultures of Atractylis gummifera［J］.Phytochem，1999，51（1）：53-54.

［16］曾瑾，唐紹微，刘云华，等.苍耳子对正常大鼠重复给药的肝毒性效应及其机制研究［J］.中药药理与临床，2018，34（2）：79-82.

［17］韩婷，李慧梁，胡园，等.苍耳子中酚酸类化合物及不同品种和居群苍耳子中总酚酸含量的测定［J］.中西医结合学报，2006，4（2）：194-198.

［18］赵昱，赵军，李湘萍，等.咖啡酰奎尼酸类化合物研究进展［J］.中国中药杂志，2006，31（11）：869-874.

［19］韩婷.苍耳子的生物活性成分及品质评价［D］.上海：第二军医大学，2006.

［20］徐涛.苍耳子炮制工艺的改进［J］.湖北中医杂志，2007，29（12）：60.

（2021-10-18收稿 本文编辑：吴珊）

基金项目：重大新药创制国家科技重大专项（2018ZX09201010）——中药口服制剂先进制造关键技术与示范研究作者简介：张静（1994.11—），女，硕士研究生在读，研究方向：中药炮制学，E-mail：751740044@qq.com通信作者：刘清飞（1971.08—），男，博士，副教授，研究方向：中药物质基础与作用机制，E-mail：liuqf@Tsinghua.edu.cn