早产儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平对早发型败血症的预测价值

姚彦莉

早发型败血症(early onset sepsis,EOS)是指新生儿在出生后72 h内发生败血症,其中早产儿自身机体免疫防御系统较弱,导致EOS发病率、预后不良风险明显高于足月儿,需给予重视[1,2]。目前,早产儿EOS早期诊断难度较大,细菌培养虽是金标准,但耗时较长,不利于早期诊断,而脐血是新生儿最早可获取的血液样本,故积极探索可靠且敏感的脐血标志物至关重要[3]。α1-酸性糖蛋白(α 1-acid glycoprotein,AAG)是血清中类黏蛋白的主要成分,在细菌感染引发炎症反应时可大量合成、释放,并促进炎症反应发展[4]。白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)均是炎症反应的产物,既往有研究表明,新生儿脐血中IL-6、TNF-α水平升高与其体内炎症免疫应答密切相关[5,6]。但目前关于上述指标对早产儿EOS的预测价值及对预后的影响仍尚未明确,故本研究对该课题进行探讨,旨在为临床防治早产儿EOS提供脐血标志物。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2019年1月至2022年1月46例早产儿EOS患儿作为发生组,另选取同期46例无EOS早产儿作为未发生组。纳入标准:孕周<37周,均为早产儿;EOS均符合新生儿败血症相关诊断标准[7],且发病时间在出生后72 h内;患儿监护人均知情,签订知情同意书。排除标准:存在先天性畸形者;伴有严重新生儿溶血病者;合并自身免疫性疾病者;伴有其他感染性疾病者。本研究经我院伦理委员会审批通过,批号:。

1.2 方法

1.2.1 脐血AAG、IL-6、TNF-α水平检测方法:2组均于出生后留取脐血样本,于胎儿娩出后,立即夹闭脐带两端,抽取2～3 ml脐动脉血,在室温条件下静置30 min,离心处理,离心速率为3 000 r/min,离心时间为5 min,取上清液,保存于-80℃条件下,备用。采用免疫比浊法检测脐血AAG水平,试剂盒及特定蛋白分析仪购自德国西门子公司,采用酶联免疫吸附法检测脐血IL-6、TNF-α水平,试剂盒购自美国贝克曼库尔特公司,所有操作严格遵循试剂盒说明书。

1.2.2 EOS治疗方法:首先给予积极抗感染处理,待病原菌明确后根据药敏试验选择合理抗生素,并采取适当改善通气、血流动力学支持、营养支持、保护脏器等对症治疗措施。

1.2.3 预后判定方法[8]:治愈且出院时不遗留后遗症判定为预后良好;出院时临床症状无好转;放弃治疗自动出院3 d内死亡或住院期间死亡;住院期间发生需外科处理的并发症,出现以上任何1种情况则判定为预后不良。

1.3 观察指标 (1)2组临床资料,包括胎龄、性别、分娩方式、母亲妊娠期糖尿病、妊娠期高血压疾病、极低出生体重儿、呼吸功能低下等资料。(2)2组脐血AAG、IL-6、TNF-α水平。(3)脐血AAG、IL-6、TNF-α水平与EOS发生的关系。(4)脐血AAG、IL-6、TNF-α水平对EOS的预测价值。(5)不同预后患儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平。(6)脐血AAG、IL-6、TNF-α水平对预后的影响。

2 结果

2.1 2组临床资料比较 2组性别比、分娩方式、母亲妊娠期糖尿病、妊娠期高血压疾病比例差异无统计学意义(P>0.05);发生组胎龄短于未发生组,极低出生体重儿、呼吸功能低下比例高于未发生组(P<0.05)。见表1。

表1 2组临床资料比较 n=46,例(%)

2.2 2组脐血AAG、IL-6、TNF-α水平 发生组脐血AAG、IL-6、TNF-α水平高于未发生组(P<0.05)。见表2。

表2 2组脐血AAG、IL-6、TNF-α水平比较 n=46,

2.3 脐血AAG、IL-6、TNF-α水平与EOS发生的关系 Logistic回归分析方法,校正胎龄、极低出生体重儿、呼吸功能低下等其他因素前后,结果显示,脐血AAG、IL-6、TNF-α均与EOS发生独立相关(P<0.05)。见表3。

表3 脐血AAG、IL-6、TNF-α水平与EOS发生的关系

2.4 脐血AAG、IL-6、TNF-α水平对EOS的预测价值 ROC曲线分析,脐血AAG、IL-6、TNF-α预测EOS发生的AUC分别为0.765(95%CI:0.665～0.847)、0.718(95%CI:0.615～0.807)、0.818(95%CI:0.724～0.891),三者联合预测EOS发生的AUC为0.925(95%CI:0.851～0.970),大于三者单独预测。见图1。

图1 脐血AAG、IL-6、TNF-α水平对EOS的预测价值

2.5 不同预后患儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平 随访至所有患儿出院,预后良好31例,预后不良15例。预后不良患儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平高于预后良好患儿(P<0.05)。见表4。

表4 不同预后患儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平比较

2.6 脐血AAG、IL-6、TNF-α水平对预后的影响 以发生组所有患儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平平均值(2.26 g/L、30.21 pg/mL、3.72 μg/L)为界分为高水平与低水平患儿。危险度分析,脐血AAG、IL-6、TNF-α高水平患儿预后不良风险是低水平患儿的4.574倍(95%CI:1.165～17.967)、4.000倍(95%CI:1.298～12.326)、5.460倍(95%CI:1.386～21.509),差异均有统计学意义(P<0.05)。见表5。

表5 脐血AAG、IL-6、TNF-α水平对预后的影响

3 讨论

早产儿EOS早期缺乏特异性表现,与常见感染类似,但其病情进展迅速,还极易并发血管内凝血、休克、多器官衰竭等严重并发症,对患儿生命安全造成极大威胁[9,10]。及早准确有效诊治能达到控制病情进展、降低并发症与死亡风险、改善预后的目的。已有的临床实践证实,细菌培养作为EOS诊断的金标准,在新生儿EOS早期诊治中的应用价值有限[11]。近年来,血清学诊断方式成为临床早期诊断EOS的重要途径,在此过程中,可靠的血清学指标是确保诊断效能的关键所在。

AAG是临床常见急性时相反应蛋白之一,是血清中类黏蛋白的主要成分,在细菌感染引发炎症反应时可大量合成、释放,并促进炎症反应发展既往有研究证实,急性感染期患者血液中AAG含量呈急剧增加趋势,随着炎症控制逐渐下降,可作为判断炎症反应的有效指标[12,13]。IL-6属于典型的促炎因子,是启动细菌炎症反应的关键细胞因子,在正常生理状态下,其在血液中的含量极低或监测不到,一旦发生细菌感染则会迅速升高,在反映早期感染方面具有重要价值[14,15]。Ebenebe等[16]报道中显示,IL-6不升高时新生儿败血症发病率约5%,IL-6升高时新生儿败血症发病率高达60%左右,说明其在新生儿败血症发生过程中扮演重要角色。TNF-α是一种内源性调节因子,作为炎性应答与感染的重要介质,能通过调节炎症免疫反应参与感染性疾病发生发展过程[17,18]。有文献指出,败血症作为细菌感染性疾病,势必会导致机体免疫功能亢进,引发一系列炎症免疫生理过程,而TNF-α在此过程中发挥关键的调节作用[19]。在上述研究基础上,本研究结果显示,发生组脐血AAG、IL-6、TNF-α水平高于未发生组,且Logistic回归分析,校正其他因素前后,脐血AAG、IL-6、TNF-α均与EOS发生独立相关,提示脐血AAG、IL-6、TNF-α水平异常升高参与早产儿EOS发生。分析原因,在于以下几个方面:(1)炎症反应发生后,可激活肝巨噬细胞、粒细胞、T细胞及内皮细胞,释放大量的脂多聚糖,从而导致AAG过多合成、分泌,对机体免疫防御机制造成明显破坏,进而促进炎症反应发展,加重病情,最终引发败血症[20];(2)IL-6同样是由T淋巴细胞、内皮细胞、单核型巨噬细胞产生,不仅会导致机体发热,诱发炎症反应,还能促进T淋巴细胞、B淋巴细胞自身增殖分化,从而启动炎症免疫应答反应,为急性时相反应蛋白的大量生成提供有利环境,进而不断加快机体内炎症反应扩散,促进EOS发生[21];(3)TNF-α能通过介导白细胞黏附在血管内皮细胞上,激活免疫T细胞及相关炎性细胞,刺激单核细胞产生大量炎性因子,同时诱导B细胞产生抗体,形成机体内因炎症引起的免疫亢进反应,还可经由与其受体特异性结合后调控相关靶细胞,在败血症发生过程中发挥相关作用[22]。因此,提示临床可将脐血AAG、IL-6、TNF-α作为临床早期预测诊断早产儿EOS发生的重要血清学指标。

本研究数据,表明,脐血AAG、IL-6、TNF-α单独预测EOS发生的价值有限,不适宜单独应用于临床早期预测中,故进一步尝试探讨三者联合预测价值,结果发现,三者联合预测EOS发生的AUC高达0.925,这为临床早期预测提供了新的思路,有利于对EOS及早防治,改善预后。

此外,本研究随访至所有EOS患儿出院发现预后不良发生率高达32.61%,提示早产儿EOS患儿预后不良风险较高,临床应给予重视。本研究还证实,预后不良患儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平高于预后良好患儿,高水平的脐血AAG、IL-6、TNF-α会明显增加预后不良风险,可见脐血AAG、IL-6、TNF-α还能为临床判断预后不良风险提供有效信息,临床应用价值较大。不足之处:本研究未详细探讨脐血AAG、IL-6、TNF-α对早产儿EOS患儿预后不良风险的具体预测价值,仍需进一步分析,以获取更全面的数据支持。

综上可知,早产儿脐血AAG、IL-6、TNF-α水平联合预测EOS的价值较为可靠,且三者异常升高表达均会显著增加预后不良风险,可为临床防治、改善预后提供相关依据。