血清半乳糖凝集素-3、分泌型卷曲相关蛋白-1与早期糖尿病肾病的相关性

史欣辉 陈建平

1 石河子大学医学院第一附属医院肾内科,新疆石河子市 832000; 2 三明市第二医院肾内科

半乳糖凝集素-3(Galectin-3,Gal-3)为胞浆蛋白,属于Gal家族成员之一,其具有介导免疫应答、参与细胞活化与趋化、调节细胞黏附等多方面功能[1-2]。有研究表明[3]：Gal-3参与了调节肾脏细胞凋亡与肾组织纤维化,与多种肾脏损害存在相关性。 HODEIB 等研究发现[4]：DN患者Gal-3的表达水平显著高于非DN的糖尿病患者,其可能可以作为DN病情进展与预后的生物学标志物。分泌型卷曲相关蛋白-1(Secreted frizzled-related protein-1,SFRP-1)属SFRP家族成员之一,系分泌型糖蛋白,其可抑制Wnt/β-catenin信号通路[5],而Wnt/β-catenin信号通路为肾间质纤维化发生及发展的关键通路。因此,推测SFRP-1可能与肾间质纤维化的发生存在相关性。DN随着病情进展,大部分患者可同时出现肾小球硬化与萎缩、肾间质纤维化[6]。本研究通过检测血清Gal-3、SFRP-1水平,旨在探讨两者与早期DN发生的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 纳入2020年1月—2021年10 月入住我院的T2DM患者90例作为DM组,早期2型糖尿病肾病患者90例作为EDN组,同时门诊健康体检者60例作为对照组。DM组男52例,女38例,年龄36～71岁,平均年龄(56.11±9.22)岁,平均体质指数(BMI)(24.09±3.16)kg/m2。EDN组男48例,女42例,年龄33～72岁,平均年龄(56.34±8.84)岁,平均BMI(24.27±3.42)kg/m2。对照组男33例,女27例,年龄29～76岁,平均年龄(55.87±8.94)岁,平均BMI(24.17±3.52)kg/m2。3组一般资料对比无统计学差异(均P>0.05)。根据尿白蛋白/肌酐比值(uACR)水平,将EDN分成正常白蛋白尿组(uACR<30mg/g,n=24)、微量白蛋白尿组(30mg/g≤uACR<300mg/g,n=38)与大量白蛋白尿组(uACR≥300mg/g,n=28)。纳入标准：T2DM符合WHO关于糖尿病的诊断,即空腹血糖(FBG)≥7.0mmol/L或随机血糖≥11.1mmol/L或OGTT 2h血糖≥11.1mmol/L。排除标准：(1)1型糖尿病、妊娠期糖尿病及其他特殊类型糖尿病;(2)其他原因引起的肾病,如原发性肾小球疾病、骨髓瘤肾病、乙肝相关性肾病、过敏性紫癜性肾炎、肿瘤相关肾病、甲状腺疾病相关肾病、狼疮性肾炎、ANCA相关性血管炎、遗传性肾病等;(3)合并糖尿病急性并发症(糖尿病酮症酸中毒、糖尿病高血糖高渗性昏迷)、肝肾功能不全、恶性肿瘤、严重血液系统疾病、心脑血管疾病;(4)有服用影响蛋白尿药物者,如钠—葡萄糖协同转运蛋白抑制剂、血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素受体阻滞剂、胰岛素增敏剂等。所有入组对象均知情同意,并经医院医学伦理委员会批准同意。

1.2 方法

1.2.1 一般资料收集：问卷调查收集入住对象年龄、性别、既往史、用药史,电子血压计(欧姆龙)测量右上肢血压,记录收缩压、舒张压。晨起着单衣、赤足测量身高(m)、体重量(kg),计算BMI,BMI=体质量/身高2。

1.2.2 生化指标、uACR检测：留取空腹及餐后2h肘静脉血3～5ml,室温静置30min,采用全自动生化检测仪(型号：C8000,美国ARCHITECH公司)检测生化指标,主要包括同型半胱氨酸(Hcy)、尿酸(UA)、空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDLC)。留取24h尿液(早07：00—次日07：00所有尿液),采用免疫比浊法测定uACR,试剂盒由美国西门子公司提供。

1.2.3 血清Gal-3、SFRP-1水平检测：入组对象均留取空腹肘静脉血5ml,室温静置30min,离心(4℃,3 000r/min,离心半径10cm,离心15min),留取上层血清置于EP管中,存放于-70℃冰箱中保存,统一采用ELISA法测定血清Gal-3、SFRP-1水平,试剂盒均由美国R&D公司提供,严格按照试剂盒说明书操作。

1.3 统计学方法 数据均采用SPSS20.0统计软件处理。计数资料以[n(%)]表示,组间比较采用χ2检验;计量资料用均数±标准差表示,多组间比较采用单因素方差分析,LSD-t法进行组间两两比较;各指标间相关性采用Pearson法;Logistic回归分析早期DN的影响因素。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组一般临床资料对比 (1)DM组、EDN组患者LDLC、TG、FBG、收缩压、舒张压、2hPG、UA、Hcy、Gal-3、SFRP-1等指标均较对照组升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。(2)与DM组比较,EDN组患者LDLC、TG、FBG、收缩压、舒张压、2hPG、UA、Hcy、Gal-3、SFRP-1等指标均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。见表1。

表1 3组一般临床资料对比

2.2 不同白蛋白尿水平组血清Gal-3、SFRP-1水平变化 微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组血清Gal-3、SFRP均较正常白蛋白尿组升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。与微量白蛋白尿组比较,大量白蛋白尿组血清Gal-3、SFRP明显升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。见表2。

表2 不同白蛋白尿水平组血清Gal-3、SFRP-1水平变化

2.3 血清Gal-3、SFRP-1与各变量的相关性分析 Pearson单因素相关分析结果：血清Gal-3、SFRP-1与收缩压、LDLC、TG、FBG、2hPG、UA、Hcy、UACR均呈正相关(P<0.01或P<0.05)。见表3。

表3 血清Gal-3、SFRP-1与各变量的相关性分析

2.4 早期DN影响因素的Logistic回归分析 以是否发生早期DN为因变量,以LDLC、TG、TC、HDLC、FBG、2hPG、UA、Hcy、Gal-3、SFRP-1、收缩压、舒张压为自变量进行Logistic回归分析,结果显示：Gal-3、SFRP、收缩压、FBG、2hPG、LDLC、UA、Hcy均为影响早期DN的独立危险因素。见表4。

3 讨论

糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)属DM微血管病变,肾小球硬化、肾间质纤维化、基底膜增厚为其典型特征,可进展至尿毒症。Gal-3系半乳糖结合素家族成员之一,其在多种细胞与组织中表现,研究发现Gal-3可能可以作为肾脏疾病预后的生物学标记物[7],尤其是DN患者。研究发现[8-9]：与正常人比较,DM患者Gal-3呈高表达,在敲除Gal-3基因的动物实验中,得出相关结论。詹碧翠等研究发现[10]：与对照组比较,DN患者Gal-3水平明显升高,且随着肾脏损害的加重,Gal-3水平亦呈逐渐增加趋势。亦有学者研究发现[11]：DN患者肾穿组织中Gal-3表现水平要显著高于非DN患者。而在动物实验中,林子越等研究发现[12]：Gal-3在DN小鼠肾脏组织中呈明显高表达,且其可能参与调节DN肾小球系膜细胞的增殖,进而参与DN的发生、发展。本文结果显示：与正常对照组比较,DM组、EDN组血清Gal-3水平均升高,而DN组血清Gal-3水平亦较DM升高。进一步对DN组进行亚组分析显示：随着肾脏损害的加剧,血清Gal-3水平呈逐渐升高趋势。这研究结果与上述国内外研究结果一致。

Wnt/β-catenin信号通路系肾间质纤维化的关键通路,而SFRP系该通路的抑制因子,因此推测SFRP可能与DN发生、发展相关。研究发现[13]：DN患者血清SFRP-1水平较对照组、DM组升高,而对照组与DM中SFRP-1水平无显著差异。覃晓虹等研究发现[14]：DN患者血清SFRP-1水平呈高表达,其水平高于对照组与DM组。亦有研究发现[15]：DN患者血清SFRP-1水平降低,且有动物实验研究发现[16]：DN小鼠肾组织SFRP-1表达下降,从而促进DN肾纤维进程。本文结果显示：与正常对照组比较,DM组、EDN组血清SFRP-1水平均升高,而DN组血清SFRP-1水平亦较DM升高。进一步对SFRP-1组进行亚组分析,结果显示：随着肾脏损害的加剧,血清SFRP-1水平呈逐渐升高趋势。这提示临床检测SFRP水平可间接反映DN损伤程度。

为进一步探讨血清Gal-3、SFRP-1与早期DN的关系,本文中采用Pearson相关分析Gal-3、SFRP-1与相关指标的相关性,结果显示：早期DN患者Gal-3、SFRP-1均与收缩压、LDLC、TG、FBG、2hPG、UA、Hcy、UACR均呈正相关(P<0.01或P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示：Gal-3、SFRP、收缩压、FBG、2hPG、LDLC、UA、Hcy均为影响早期DN的独立危险因素。这说明临床上通过控制血糖、血压、Hcy、降低血脂、Gal-3、SFRP水平,可能可以减少DM患者尿蛋白排泄率,进而延缓DN的发生与进展。

综上所述,EDN患者血清Gal-3、SFRP-1水平升高,其为影响EDN的独立危险因素,可能参与EDN的发生、发展。