动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留检测前处理技术的比较研究

陆向梅，胡 波，宫 平，魏佩玲，许艳丽

（新疆畜牧科学院畜牧业质量标准研究所，新疆乌鲁木齐 830000）

兽药在预防和治疗畜禽动物疾病、促生长和提高动物生产性能等方面有重要作用，对畜牧业发展有积极影响，但根据国家市场监督管理总局于2020——2022年发布的食品（抽检）不合格通告，发现我国动物性食品中兽药残留形势依旧严峻。2020年农兽药残留超标占不合格样品总量的35.31%，2021年兽药残留超标占抽检不合格样品总量的10.10%。畜肉兽药喹诺酮类药物残留值高是引起不合格的主要原因之一，并且禽肉禽蛋、水产品、蜂产品以及牛奶中的喹诺酮类药物残留也较为突出，原因可能是私自非法滥用禁用、限用兽药。

氟喹诺酮类药物（Fluoroqquinolones，FQs），别称吡啶酮酸类、沙星类，属于含氟第三代喹诺酮类化学合成抗菌药物。本文论述了近5年的有关动物源性食品中的氟喹诺酮类药物残留的检测研究，主要从色谱和色谱质谱联用法的角度，总结并论述不同基质样品、液相提取及洗脱条件、净化方式等对方法性能参数的影响，旨在提高动物源性食品中兽药残留的检测分析的效率和准确性，为后期建立同时检测多种兽药残留药物方法提供参考。

1 前处理技术和检测技术

1.1 前处理技术

喹诺酮类药物残留检测中常用的样品前处理技术主要有固相萃取法，QuEChERS法、固相微萃取、磁性固相萃取等前处理技术。

1.1.1 固相萃取技术

固相萃取技术是利用固相吸附剂分离液相混合物中的目标成分，选择不同的吸附剂过滤液体基质和干扰物，通过多种洗脱操作，能够对目标分离物进行富集，从而分析出残留物的质量和种类[1]。目前C8、C18、Oasis HLB、MCX固相萃取小柱在提取兽药检测中较为常用。

1.1.2 QuEChERS方法

QuEChERs法是目前普遍被采用的，适用于复杂基质中兽药残留检测的一种简单而直接的提取技术。其原理是将微萃取技术与分散固相萃取技术相结合使用，即先加入乙腈、甲醇等有机试剂进行提取；后利用PSA吸附脂肪酸、极性有机酸、某些糖类，C18吸附脂肪等，达到净化待测物质的目的。QuEChERs法具有操作简便、准确度高等优点。

1.1.3 新型微萃取技术

固相微萃取技术集样品采集、萃取和进样于一体，同时还可以实现无溶剂萃取。根据样品类型可选择直接萃取、顶空萃取或者膜保护萃取。按照萃取技术的不同，又可分为纤维针式萃取和管内固相萃取。随着技术的不断发展，液相微萃取也衍生了不同的形式，其中包括中空纤维液相微萃取、平行人工液膜微萃取或电膜萃取、分散液-液微萃取等[2]。

1.1.4 磁性固相萃取技术

磁性固相萃取技术基于液-固色谱理论，使用具有磁性或可磁化的材料作为吸附材料，通常以纳米Fe3O4为磁性内核，表面用其他稳定性材料进行修饰。碳材料、离子液体、分子印迹聚合物、金属有机框架、硼酸基亲和配体等新型材料的应用有助于调节吸附性能，实现对不同目标分析物的有效萃取[3]。

1.2 检测技术

目前，在质谱技术的发展中，应用最广泛的依然是四极杆质量过滤器，其中三重四极杆质谱仪的多反应监测模式可适用于进行常规的和高通量的生物分析，具有高灵敏度、高分辨率的特点，能够出具高准确度和精密度的定量分析结果。电喷雾离子化技术ESI离子化效率高，可以很好地与其他分离技术相联接使用，如液相色谱、毛细管电泳技术等，更利于分离纯化不同基质的样品用于质谱分析，因此在兽药残留、药物代谢及蛋白质分析研究等诸多领域得到广泛的应用。

2 不同基质样品、检测仪器、液相提取及洗脱条件、净化方式对方法性能参数的影响

本文主要从色谱和色谱质谱联用法的角度，总结并论述不同基质样品、检测仪器、液相提取及洗脱条件、净化方式等对方法性能参数的影响，见表1。

表1 不同基质样品、检测仪器、液相提取及洗脱条件、净化方式下方法性能参数的汇总

由表1可得到以下内容。①在动物样品、畜禽产品中检测氟喹诺酮类药物残留时，提取液主要以EDTA-Mcllvaine缓冲溶液、酸化乙腈溶液为主，回收率高而稳定；分离纯化不同的基质样品时，HLB、Oasis PRiME HLB两种固相萃取柱相较于C18基质分散固相萃取均体现了低检出限，高回收率；QuEChERS法在处理鸡肉和蜂蜜样品中体现出很高的准确度，且回收率高而稳定。②在固相萃取净化洗脱液甲醇和乙腈这两种溶剂上，甲醇的极性强，但对于反相色谱来说，极性越强的溶剂其洗脱能力反而减弱。无论是C18或者C8，固定相的极性都很低，根据相似相溶原理，也就需要通过低极性的溶剂来洗脱下吸附在固定相上的溶质。因此，低极性的乙腈具有比高极性的甲醇更强的洗脱能力。③石墨烯中空纤维固相微萃取、分子印迹聚合物固相萃取（MISPE）技术等新型吸附材料在处理牛奶和蜂蜜样品中体现出强选择性、目标性，分离效果好，净化完全，检出限低，回收率高而稳定。

3 结语

综上所述，氟喹诺酮类药物残留检测样品前处理技术不仅限于采用固相萃取技术、QuEChERS方法，新型微萃取技术、磁性固相萃取技术也会在处理畜肉、禽肉、禽蛋、牛奶、水产品及蜂蜜等的氟喹诺酮类药物残留检测中表现出更强的选择性、目标性，可提高动物源性食品中兽药残留检测分析的效率和准确性，为后期建立同时检测多种兽药残留药物方法提供参考。