多粘类芽孢杆菌P1 不同施药方法防治广东菜心根肿病药效评价

袁东华，吴家胜，张莹莹，王承芳，陈秀，张颂函

(1.上海万力华生物科技有限公司，上海 201611；2.上海市农业技术推广服务中心，上海 201103)

根肿病(clubroot)是危害十字花科作物的一种世界性土传病害，由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae)引起，主要侵染作物根部，作物整个生育期都可感病，可造成20%~60%的减产和经济损失[1-2]，严重影响十字花科作物产量和品质[3-5]。目前对根肿病的控制主要采取喷施化学农药、撒施石灰改良土壤理化性质、选择适宜抗病品种等措施[6]。但是，部分化学药剂防效不稳定且易造成环境污染；长期施用生石灰容易造成土壤板结和碱性化。近年来，国内外已有利用有益微生物防治十字花科根肿病的报道。

多粘类芽孢杆菌(Bacillus polymyxoides)作为一种生防菌，已广泛应用于植物病害的生物防治。经前期研究发现，多粘类芽孢杆菌P1 对广东菜心根肿病有一定的防治效果[7]。本文在前期研究的基础上，探索不同的施药方法下多粘类芽孢杆菌制剂对广东菜心根肿病的防治效果，以期为多粘类芽孢杆菌在实际生产中应用找到一种科学合理的使用方法。

1 材料与方法

1.1 试验条件

1.1.1 试验对象、作物和品种

试验对象为根肿病(Plasmodiophora brassicae)；供试作物为广东菜心，品种为“四九菜心”。

1.1.2 作物栽培及环境条件

试验地点设在上海鸿宇蔬菜园艺场，2 块试验地中设施栽培地前茬作物为杭白菜，大田露地前茬作物为小青菜。2 块试验地均为十字花科蔬菜连作地块，根肿病发病率高。试验地广东菜心的种植按照常规田间管理统一管理。

1.2 试验设计和安排

1.2.1 供试药剂

15 亿CFU/mL 多粘类芽孢杆菌P1 悬浮剂(上海万力华生物科技有限公司)。

1.2.2 试验设计

试验共设5 个处理，处理1~4 为药剂处理，处理5 为空白对照(表1)。处理1~4 均分为播前药剂处理和出苗后药剂处理，共施药2 次，主要探索不同的播前处理模式对广东菜心根肿病的防治效果。每个处理3 次重复，共15 个小区。每个小区30 m2，小区按照随机区组排列。

表1 15 亿CFU/mL 多粘类芽孢杆菌P1 悬浮剂不同处理方式试验方案

第1 次施药时间均为广东菜心播种前24 h。处理1 和2 将药剂按照试验剂量2 L/667 m2兑水300 L/667 m2，均匀喷淋于土壤表面。土壤喷淋前应将大块土壤打碎，并保证土壤湿度。处理1 土壤喷淋后不作混土处理，处理2 土壤喷淋后作混土处理。处理3 将药剂稀释100 倍进行浸种30 min，浸泡完毕后晾干。处理4 按照药种比1∶50 拌种，拌种完毕后晾干。均于第2 天播种。第2 次施药时间为广东菜心长至2 叶1 心期时，将药剂按照试验剂量2 L/667 m2兑水300 L/667 m2，均匀喷淋在广东菜心上。按照试验方案，分别于2022 年3 月、9 月在设施地、露地大田开展了试验。

1.3 试验调查

在广东菜心发病明显或收获期对发病程度进行调查。采用五点取样法，每个点随机调查20 株，根据分级标准记录各级病株数，并计算病情指数及其防治效果。分级标准：0 级：没有附着根肿；1 级：根肿只附着在侧根上，数量占根系全部的1%~25%；2 级：主根上有根肿附着，侧根上根肿数量占根系全部25%以上；3 级：根肿数量占50%~75%的根系，主根上有根肿附着；4 级：根肿数量占75%以上的根系，主根上有根肿附着。

1.4 统计方法

1.5 数据分析

采用Excel、SPSS 19.0 软件进行数据统计分析。

2 结果与分析

设施地和露地多粘类芽孢杆菌P1 悬浮剂防治广东菜心根肿病的试验结果见表2 和表3。试验地广东菜心根肿病发生程度为偏重发生，设施地根肿病发病率为63.67%、病情指数为49.53，露地根肿病发病率为58.67%、病情指数为35.53。设施地处理1~4 对广东菜心根肿病的病株防效分别为46.60%、58.12%、23.56%、22.51%，病指防效分别为62.99%、67.36%、46.84%、39.43%。露地处理1~4 对广东菜心根肿病的病株防效分别为67.76%、72.10%、41.06%、36.00%，病指防效分别为75.44%、82.13%、55.23%、52.88%。两地的试验结果均表明，播前采用土壤喷淋的处理1 和2 对广东菜心根肿病的防效显著优于采用浸种和拌种的处理3 和4。土壤喷淋后采用混土的方式处理2 防效略高于不混土的处理1，但方差分析显示差异不显著。采用浸种的处理3 防效显著高于采用拌种的处理4。

表2 多粘类芽孢杆菌P1 悬浮剂不同处理方式对广东菜心根肿病防治效果(设施地)

表3 多粘类芽孢杆菌P1 悬浮剂不同处理方式对广东菜心根肿病防治效果(露地)

3 结论与讨论

通过在设施地和下半年在露地大田开展试验，研究结果表明15 亿CFU/mL 多粘类芽孢杆菌P1 悬浮剂采用播前土壤喷淋(制剂量2 L/667 m2)和2 叶1 心期根茎喷淋相结合的方式防治广东菜心根肿病的效果优于种子处理(100 倍浸种、1∶50 倍拌种)和2 叶1 心期根茎喷淋相结合的方式。研究数据显示，采用播前土壤喷淋(制剂量2 L/667 m2)和2 叶1 心期根茎喷淋相结合的方式对广东菜心根肿病的防效显著，病指防效为62.99%~82.13%，可满足生产上防治需求，为今后在农业生产中广东菜心根肿病防治技术开发与应用奠定基础。

因本研究仅在上海一地开展了试验，且多粘类芽孢杆菌尚未在广东菜心上登记，为增强数据的代表性和说服力，建议在全国其他省份开展相应试验，以期能够推进多粘类芽孢杆菌制剂在广东菜心根肿病上的登记。