不同贮藏温度对刺梨原汁中总黄酮含量的影响

刘易伟，陈萍，卿云光，耿宁，黄兴

摘 要：利用紫外可见光分光光度计对不同贮藏温度下刺梨原汁的总黄酮含量进行测定和分析。结果表明，刺梨原汁在冷冻条件下总黄酮含量相对稳定，随着贮藏温度的升高，总黄酮含量降低速率逐渐增加。家用冰箱的储存温度通常为4 ℃，在此温度下，总黄酮含量比较稳定，可以作为日常保存温度，对刺梨原汁总黄酮的营养价值影响较小。

关键词：刺梨；总黄酮；贮藏温度

The Effects of Total Flavonodis in Rosa roxburghii Juice in Different Storage Temperature

LIU Yiwei， CHEN Ping， QING Yunguang， GENG Ning， HUANG Xing

（Qiannan Inspection and Testing Institute， Duyun 558000， China）

Abstract： The content of total flavonoids in Rosa roxburghii juice was determined and analyzed by spectrophotometer at different storage temperatures. The results showed that the content of total flavonoids in Rosa roxburghii juice was relatively stable under freezing condition， and the decreasing rate of total flavonoids content increased in higher storage temperature. The storage temperature by domestic refrigerator usually use in 4 ℃， under this temperature， which the content of total flavonoids is relatively stable. So the temperature can be used as the daily storage temperature， which has little influence on the nutritional value of total flavonoids in Rosa roxburghii juice.

Keywords： Rosa roxburghii; total flavonoids; storage temperature

刺梨（Rosa roxburghii）屬蔷薇科，又名山王果、刺玫果、刺菠萝、文先果等。刺梨味酸甜、肉质肥厚，果实富含黄酮类化合物、多糖、多种维生素、胡萝卜素、多种氨基酸和矿物质元素等[1-4]。刺梨具有抗氧化、抗衰老；抗肿瘤、抗癌；解毒、护肝、抑菌、降血糖作用[5-7]。刺梨原汁是用新鲜刺梨果实压榨而得的浆汁，刺梨原汁能促进胃液分泌，对平滑肌收缩运动具有明显的抑制作用，对免疫功能有增强作用[8]。有动物实验表明，刺梨原汁对动脉粥样硬化有降低作用[9]。现如今，人们对食品的要求越来越高，更加考虑食品的营养价值。刺梨因其丰富的营养价值和药用价值，在全国范围内成为研究的焦点，更是贵州省重点发展的农产品，榨汁不仅浓缩了刺梨的营养，丰富了口感，还能作为刺梨产品深加工的原材料，同时能避免由于刺梨鲜果的保存不易带来的营养流失和浪费。

黄酮类化合物是刺梨原汁中一种重要的营养物质，常用于测定总黄酮的方法有分光光度法[10-12]、液相色谱法[13-14]、荧光法[15]等。测定总黄酮的方法常用分光光度法和液相色谱法，液相色谱法主要应用于单一黄酮化合物的测定[16]。分光光度法操作简单，测定成本较低，可直接吸取样液进行试验，大大简化了提取步骤，节省了样品处理的时间，平均回收率达到100.3%[17]。刺梨原汁中总黄酮的含量相对较高，超过了茶叶[10]、洋葱[18-19]等，刺梨原汁为刺梨鲜果榨汁所得，总黄酮含量高于刺梨鲜果，但活性物质易受温度影响，因此采用分光光度计检测不同温度下刺梨原汁的总黄酮含量变化，研究温度以及贮藏时间对刺梨原汁的总黄酮含量的具体影响，为今后研究刺梨原汁及其他刺梨产品的总黄酮检测提供理论基础，也为刺梨产品后续的开发研究提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

刺梨原汁（包装方式：棕色玻璃瓶灌装），龙里产区（样品1）；刺梨原汁，贵定产区（样品2）；刺梨原汁，独山产区（样品3）；甲醇，分析纯；乙醇，分析纯；芦丁标准品（含量为92.4%）购于中国食品药品检定研究院。

TU-1901紫外可见分风光光度计，北京普析通用仪器有限公司；BS224S电子天平，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；SC-66HL冰箱，海尔；SPX-250BⅢ恒温培养箱，天津市泰斯特仪器有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 样品处理

将样品分别放置于-24 ℃、-14 ℃、-7 ℃、4 ℃、20 ℃、30 ℃下储存，放置前测定一次，之后每月进行一次总黄酮的测定，共测定7次。检测方法参考耿宁[17]、T/GZSX 081—2021[20]中的测定方法，以芦丁标准溶液为对照，甲醇溶液调零，1 cm比色皿，360 nm处进行吸光度的测定。

1.2.2 标准溶液的配制

精确称取芦丁标准品108.4 mg于100 mL容量瓶内，用甲醇定容至刻度，得到芦丁储备液1.002 mg·mL-1的芦丁储备溶液，分别稀释至1.00 μg·mL-1、2.00 μg·mL-1、3.00 μg·mL-1、4.00 μg·mL-1、5.00 μg·mL-1和6.00 μg·mL-1芦丁标准溶液，以甲醇溶液为零点。

1.2.3 总黄酮的测定

称取1 g（精确至0.01 g）的样品（若为冷冻样品需提前解冻），用乙醇定容至25 mL，摇匀后，超声提取20 min，室温静置30 min，吸取1 mL上清液于25 mL比色管中，用甲醇定容后，用进行分光光度计测定。每个样品做3个平行样，求平均值。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线的绘制

将配制好的不同浓度的芦丁标准溶液进行测定，并制得标准曲线，得到回归方程，见表1。

2.2 刺梨原汁中总黄酮含量测定结果

应用分光光度法检测，并对照标准曲线，按2.1所述公式计算可得到各个月不同温度下刺梨原汁总黄酮的含量，结果见图1～3。

由图1～图3可看出，在贮藏过程中总黄酮的变化趋势一致，随着贮藏时间的增加，总黄酮含量都呈下降趋势，且贮藏温度不同，下降速度也不同。随着贮藏温度的升高，总黄酮含量降低程度更加明显，可以看出贮藏温度对刺梨原汁的总黄酮存在一定的影响。以较低的温度贮藏，能够更好地保持刺梨原汁中的总黄酮的含量。以样品1为例，-24 ℃下贮藏时间为6个月时的总黄酮含量与4 ℃下贮藏时间为4个月时的含量基本接近；以样品2为例，4 ℃贮藏6个月和20 ℃、30 ℃贮藏3个月时的总黄酮含量相近，说明在低温的条件下，总黄酮的降解速率更低。贮藏温度在-24 ℃、-14 ℃和-7 ℃时，总黄酮含量的降低速率相对缓慢，4 ℃居中，20 ℃和30 ℃条件下，总黄酮含量下降较快。随着贮藏时间的增加，总黄酮含量逐渐降低，特别是在较高温度的情况下，总黄酮含量降低更加明显。在半年的储存过程中，总黄酮都有一定程度的降解，贮藏温度越低，总黄酮含量相对越稳定，更有利于刺梨原汁中黄酮类化合物的活性保持。

3 结论

刺梨原汁中含有丰富的黄酮类化合物，黄酮类化合物具有良好的清除自由基、抗氧化、抗衰老作用[21]，总黄酮含量受温度影响较大，在较高贮藏温度下，总黄酮含量降低较快，只有在较低的温度条件下，总黄酮的含量下降较为缓慢。家庭冰箱常用4 ℃保存食物，4 ℃下刺梨原汁的总黄酮含量在短时间内相对稳定，可以作为家庭保存刺梨原汁的推荐温度，而企业在大量储存刺梨原汁时，可以冷冻保存，且储存时间不宜过长。本实验采用分光光度法对刺梨原汁中总黄酮含量进行测定，简化了操作步骤，减少耗材的使用，无需大型检验设备即可完成检测，具有更高的可行性，更适合微小企业进行品质分析。刺梨原汁因其丰富的营养价值，正越来越受到人们的关注，通过研究其总黄酮含量在不同温度和贮藏条件下的变化，为刺梨原汁的銷售和储运提供理论依据。

参考文献

[1]罗桃，王玉奇，陈文本.黔南州刺梨产业链分析[J].绿色科技，2021，23（19）：106-107.

[2]夏仕青，张爱华.刺梨的营养保健功能及其开发利用研究进展[J].贵州医科大学学报，2018，43（10）：1129-1132.

[3]李跃红，陈露，冉茂乾，等.基于主成分分析的刺梨中微量元素的评价[J].农产品加工，2020（7）：46-49.

[4]路朝，徐荣艳，胡永红，等.缫丝花的营养，保健和药用价值研究进展[J].植物生理学报，2021，57（7）：1393-1400.

[5]王继尧，李慧.刺梨原汁对艾氏腹水癌（实体型）生长的抑制作用[J].中国公共卫生，1999（12）：87-88.

[6]贺琴，尚含乐.刺梨的营养价值，生物学功能及其在畜禽生产中的应用[J].动物营养学报，2022，34（8）：4776-4784.

[7]蔡健，王薇.黄瓜叶中总黄酮含量的研究[J].食品科学，2005，26（8）：194-197.

[8]孙学蕙，叶家齐，谢宝忠，等.刺梨果汁及提取物的药理作用研究[J].贵阳中医学院学报，1991（2）：60-64.

[9]汪俊军，刘小传，刘效林，等.刺梨汁对金黄地鼠的抗动脉粥样硬化作用[J].中国动脉硬化杂志，2001，9（1）：17-20.

[10]王丽丽，林清霞，宋振硕，等.分光光度法测定茶叶中总黄酮含量[J].茶叶学报，2021，62（1）：1-6.

[11]蒋洪亮，李跃红，张馨允，等.不同产地刺梨中总黄酮含量的测定分析[J].低碳世界，2021，11（8）：224-226.

[12]杜薇，刘国文.刺梨总黄酮的含量测定及资源利用[J].食品科学，2003，24（1）：112-114.

[13]刘松青，唐先哲，马文秀，等.高效液相色谱法测定银杏叶制品中总黄酮[J].中草药，1995（9）：461-462.

[14].张廷志，肖军，侯镜德.反相高效液相色谱法测定毛竹叶中总黄酮[J].宁波高等专科学校学报，2001，13（增刊1）：105-106.

[15]刘君，李振泉，全先高，等.荧光法测定不同采收期银杏叶中的总黄酮[J].数理医药学杂志，2012，25（1）：94-95.

[16]何书美，刘敬兰.茶叶中总黄酮含量测定方法的研究[J].分析化学，2007，35（9）：1365-1368.

[17]耿宁，刘易伟，卿云光.紫外分光光度法测定刺梨原汁中总黄酮含量的研究[J].食品安全导刊，2020（32）：77-78.

[18]于爱平，张丹，郭喜红.紫外分光光度法测定洋葱提取物中总黄酮的含量[J].中国药房，2005（19）：1498-1499.

[19]樊孔明，田太成，王晓莉，等.洋葱醇提物总黄酮含量的测定及其降脂活性的研究[J].化学与生物工程，2022，39（10）：38-45.

[20]贵州省食品工业协会.刺梨汁中总黄酮含量的测定：T/GZSX 081—2021[S/OL].（2021-09-26）[2022-09-11].http：//down.foodmate.net/standard/sort/12/111612.html.

[21]陈庆菊，胡萍，曾艳，等.黄酮类化合物的益生机理及其在畜禽生产上的应用[J].动物营养学报，2021，33（8）：4294-4303.