气相色谱-三重四极杆质谱联用法测定果蔬汁中的甲拌磷

张政，邰亮，王林，戚培培

摘 要：目的：对果蔬汁中残留的甲拌磷农残用气相色谱-三重四极杆质谱联用法进行定量分析。方法：样品经过QuEChERS前处理，浓缩定容后进样，利用GC-MS在MRM扫描模式下分析测定，利用目标化合物特征离子呈现的相对丰度比及存留时间，用内标方法定量。结果：在甲拌磷标液浓度范围0.005～0.100 μg·mL-1，相关系数R2的值0.999 9，方法的检出限为0.001 9 mg·kg-1，定量限为0.010 0 mg·kg-1，0.05～0.20 mg·kg-1添加水平时，平均回收率82.7%～94.9%，相对标准偏差1.04%～1.43%（n=6）。结论：该方法快速、高效、准确，满足测定果蔬汁中甲拌磷的要求。

关键词：果蔬汁；甲拌磷；气相色谱-三重四极杆质谱联用；内标法测定

Determination of Phorate in Fruit and Vegetable Juices by Gas Chromatography-Triple Quadrupole Mass Spectrometry

ZHANG Zheng， TAI Liang， WANG Lin ， QI Peipei

（Baoying Comprehensive Inspection and Testing Center of Product Quality， Yangzhou 225800， China）

Abstract： Objective： To quantitatively analyze phorate residues in fruit and vegetable juice by gas chromatography triple quadrupole mass spectrometry. Method： The samples were pretreated by QuEChERS， concentrated and fixed volume before injection， analyzed and determined by GC-MS in MRM scanning mode， and quantified by internal standard method using the relative abundance ratio and retention time of target compound characteristic ions. Result： Concentration range of phorate standard solution is 0.005～0.100 μg·mL-1， the value of correlation coefficient R2 is 0.999 9， the detection limit of the method is 0.001 9 mg·kg-1， the limit of quantitation is 0.010 0 mg·kg-1， the average recovery is 82.7%～94.9%， and the relative standard deviation is 1.04%～1.43% （n=6） at the addition level of 0.05～0.20 mg·kg-1. Conclusion： The method is rapid， efficient and accurate， and can meet the requirements for the determination of phorate in fruit and vegetable juice.

Keywords： fruit and vegetable juices; phorate; gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometer; internal standard determination

果蔬汁能为人体有效补充丰富的矿物质以及多种维生素，增加膳食纤维，增强人体细胞活力。但是，作为原材料的蔬菜瓜果，在种植过程中不可避免地会接触到各种农药，会对消费者健康产生威胁，引发潜在的食品安全问题[1]。甲拌磷[2]，化学名称O，O-二乙基-S-（乙硫基甲基）二硫代磷酸酯，是一种剧毒的有机化合物，广泛用于农业生产中。为保障农产品质量以及人身健康安全，探索出一种准确、高效的甲拌磷检测方法十分必要。

根据《食品安全国家标准 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（GB 23200.113—2018），气相色谱-三重四极杆质谱联用法在进行目标分析时具备出色的稳定性、高性能和灵敏度，以气相色谱-三重四极杆质谱联用法为基础建立甲拌磷的检测、评定分析方法，可以得到满意的结果[3]。

1 材料与方法

1.1 样品、试剂耗材和儀器

样品：果蔬汁，能力考核样品（大连中食提供）。

试剂耗材：乙腈（分析纯）；乙酸乙酯（色谱纯）；丙酮（分析纯）；萃取盐包（4 g硫酸镁+1 g氯化钠+1 g柠檬酸钠+0.5 g柠檬酸氢二纳）；15 mL净化管（885 mg硫酸镁+150 mg PSA+15 mg GCB）；陶瓷均质子和50 mL萃取管，其他实验室内常用玻璃仪器及耗材。

标准物质：甲拌磷标准溶液（100 μg·mL-1，证书编号BW900752-100-A，坛墨质检）；环氧七氯B标准溶液（100 μg·mL-1，证书编号CDAA-S-411017-MA，安谱）。

仪器：气相色谱-三重四极杆质谱联用仪（设备编号US2029U301，规格型号8890/7000D，安捷伦），配有电子轰击源（EI）；涡旋振荡器（规格型号MS digtal，IKA）；快速冷冻离心机（规格型号BIOFUGE，赛默飞）；十万分之一分析天平、水浴氮气吹干仪等实验室常见仪器。

1.2 实验方法

1.2.1 样品QuEChERS前处理

称取10 g果蔬汁能力验证的样品，放入塑料萃取管里面（50 mL），移液管移取乙腈10 mL加入，再向管内加入1份萃取盐包后盖上管盖，猛烈振荡后离心，离心机设定的速度为4 200 r·min-1，萃取管放入机器中5 min后取出。离心完毕后，吸取6 mL上清液加入15 mL净化管内，涡旋振荡器上涡旋混匀

1 min。萃取管再次放入机器5 min后取出。离心完毕后，吸取2 mL上清液加入10 mL试管中，置于水浴氮气吹干仪中，设定温度40 ℃条件下氮气吹至近干。加入20 μL的内标环氧七氯溶液，加入1 mL乙酸乙酯再次溶解，混匀后过有机相滤膜，待进样。另取试剂空白，除不加试料，其他均按上述步骤平行操作[4]。

1.2.2 标准溶液配制

环氧七氯B标准溶液（5 μg·mL-1）：准确称取环氧七氯B固体10 mg，利用10 mL的容量瓶，加入乙酸乙酯稀释成内标溶液（5 μg·mL-1）。

甲拌磷标准中间液（100 μg·mL-1）：准确移取甲拌磷标准储备液（1 000 μg·mL-1）1 mL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容；甲拌磷标准溶液（10 μg·mL-1）：准确移取甲拌磷标准中间液（100 μg·mL-1）1 mL于1个10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容。

甲拌磷系列标准工作液：吸取甲拌磷标准溶液（10 μg·mL-1）5 μL、10 μL、20 μL、50 μL、100 μL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容，配制成含甲拌磷浓度为0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1的标准工作溶液。

空白基质溶液氮吹至近干，加入20 μL内标液，分别加入1 mL甲拌磷系列标准工作液复溶，分别用一次性注射器过滤膜，配制成含有甲拌磷的基质混合标准工作溶液[5]，等待进入GC-MS测定。根据所测结果进行分析并绘制标准曲线，得到线性回归方程。

1.2.3 气相色谱-质谱条件设定

色谱柱：HP-5ms（15 m×0.250 mm，0.25 μm，产品序列号US0628013A）2根串联；色谱柱程序升温：柱温40 ℃（1 min，40 ℃·min-1）→120 ℃（0 min，5 ℃·min-1）→240 ℃（0 min，12 ℃·min-1）→300 ℃（6 min）；载气：氦气浓度≥99.999%，气体色谱柱内流速1.0 mL·min-1；进样口：280 ℃；进样方式：不分流进样；进样量：1 μL；离子加速器：280 ℃；离子传输线：280 ℃；EI：70 eV；甲拌磷定量离子对260.0、75.0，碰撞电压5 V，定性离子对230.9、128.9，碰撞电压25 V；环氧七氯B定量离子对352.8、262.9，碰撞电压15 V，定性离子对354.8、264.9，碰撞电压15 V。

2 结果与分析

2.1 标曲线性、方法检出限和定量限

本次实验甲拌磷系列标准工作液为0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1，相关系数R2的值达到了0.999 9，线性良好，满足线性要求。线性图谱见图1。

由信噪比计算公式S/N=3和S/N=10可分别得到方法的检出限和定量限。经过计算得出，当称样量为10.00 g，定容体积为1 mL时，该方法的检出限为0.001 9 mg·kg-1，定量限为0.010 0 mg·kg-1。

2.2 精密度与回收率平行实验结果

通过向果蔬汁空白样品中添加一定量的甲拌磷标准溶液，以此來计算本方法的回收率与精密度。添加体积分别为0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL的甲拌磷标准溶液（1 μg·mL-1），添加水平分别为0.05 μg、0.10 μg、0.20 μg，按照本方法前处理重复6次平行实验，计算公式为

P=5C×V/（C0×V0）×100%（1）

式中：P为回收率，%；C为测得试样中甲拌磷的含量，μg·mL-1；5为稀释倍数；V为检验样品定容体积，mL；C0为加入标液的浓度，μg·mL-1；V0为加入标液的体积，mL。

测得甲拌磷在添加水平为0.05～0.20 mg·kg-1时，平均回收率在82.7%～94.9%，标准偏差系数，即精密度在1.04%～1.43%。回收率的数值和精确度的数值如表1所示。

3 结论

本实验建立了果蔬汁中甲拌磷测定的气相色谱-三重四极杆质谱联用检测方法。多次实验表明，本方法快速、高效、准确，对于果蔬汁试样中甲拌磷提取效果较好，标曲线性良好，定量限、检出限、相对标准偏差、回收率等技术指标均达到国家标准要求，满足对甲拌磷分析检测需要。

参考文献

[1]张兆利.滥用高毒农药违法[J].湖南农业，2021（10）：50.

[2]马涛，郑晓东，宋丽花.山西省蔬菜农药残留现状分析[J].中国植保导刊，2022，42（5）：86-89.

[3]杨静，曹海峰，张海霞.串联质谱检测果蔬中甲拌磷及其代谢物的优势分析[J].黑龙江农业科学，2017（9）：98-103.

[4]曾霞，于雅汇，王鸟，等.QuEChERS前处理技术在农药多残留检测中的研究进展[J].当代化工研究，2022（6）：33-35.

[5]徐国锋，聂继云，李海飞，等.基质效应对气相色谱法检测苹果和梨中有机磷农药的影响[J].果树学报，2011，28（1）：97-101.