奇楠沉香叶的有效成分含量测定及其生物活性评价

林思琦， 招志辉， 司徒杰

（广州中医药大学第一附属医院，广东广州 510405）

沉香为瑞香科植物白木香Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg含有树脂的木材，擅长“行气止痛、温中止呕、纳气平喘”，中医临床常用于“胸腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急”诸证[1]；现代研究发现其具有镇痛镇静、镇咳平喘、抗菌、抗肿瘤和改善心肌缺血等作用[2]。由于沉香成药时间长、产量低，兼具收藏价值，因此市场价格一直居高不下[3]。资源的稀缺，市场的需求，使得沉香树其他部位（如叶子），在近几年来逐渐成为研发热点。据报道，沉香叶中含有多糖、鞣质、黄酮、氨基酸、挥发油等多种成分[4]，具有抗氧化、降血糖、降血脂、平喘、抑菌等生物活性[5]。在2018年，国家卫计委将白木香叶列入终止审查新食品原料目录，以地方特色食品进行管理[6]；同年，广东省卫健委制定并实施了《食品安全地方标准白木香叶》（DBS44/011-2018）[7]，极大地推动了白木香叶产业的快速发展。现已开发出沉香叶茶饮品等产品[8-9]。

奇楠沉香，是经过野生分化变异和自然条件选育出的多个沉香品种中品质最高的一种，其油脂丰富、芳香优雅、回味悠长，关键指标色酮类成分含量高，同时具备“生长快、结香久、抗病害强”的种植优势，正被大力推广种植[10-11]。目前，关于奇楠沉香叶的研究甚少。本研究选取奇楠沉香叶为研究对象，采用不同提取方法，对其总黄酮、总多糖、鞣质含量测定以及体外抗氧化、抗菌、抗炎活性评价展开系统研究，以期为奇楠沉香叶产品的开发及工业化生产提供参考，现将研究结果报道如下。

1 材料

1.1 仪器SQP分析天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司）；GZX-9076 MBE数显鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；OSB-2100 旋转蒸发仪（东京理化器械株式会社）；UV-1700 型紫外-可见光光度计（日本岛津公司）；HH-S6数显恒温水浴锅（江苏金怡仪器科技有限公司）；DW 调温电热器（上海平环燃烧设备工程技术有限公司）；SW-CJ-2FD型双人单面净化工作台（苏州净化科技设备有限公司）；LX-B50L 型立式自动电热压力蒸汽灭菌器（合肥华素医疗设备有限公司）。

1.2 样品与试剂奇楠沉香叶于2020 年11 月采摘于广东省阳江市阳西县阿拉丁沉香种植基地，由广东药科大学李钟副教授鉴定基源为白木香[Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg]，且符合奇楠沉香植物特征。

没食子酸（批号：110831-200803，含量99%），中国药品生物制品检定所； 芦丁（批号：LD200119-08，含量99%），Stanford Analytical Chemicals Co.， Ltd.； D- 无 水 葡 萄 糖（批 号：20180111），中国食品药品检定研究院；抗坏血酸（VC，批号：20180110），天津市致远化学试剂有限公司；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH·），上海麦克林生物有限公司；2，2’-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）（ABTS+·），上海麦克林生物有限公司；其他试剂均为分析纯，水为纯水。

1.3 培养基营养肉汤培养基（批号：1094671）、Mueller-Hinton 琼脂培养基（批号：1095901），广东环凯微生物科技有限公司。

1.4 菌种金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）、表皮葡萄球菌（ATCC 1228）、铜绿假单胞菌（ATCC 49103）、肺炎克雷伯菌（ATCC 700603）、变形杆菌（ATCC 49103）、沙门氏菌（ATCC 14028）、福氏痢疾杆菌（ATCC 43300）、大肠杆菌（ATCC 8739），均由广东省微生物研究所提供。

1.5 动物SPF 级昆明种小鼠，体质量18 ～22 g，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK（粤）2018-0002。实验环境条件：室温20 ～25 ℃，日温差≤3 ℃，湿度40%～70%。

2 方法与结果

2.1 奇楠沉香叶提取物制备

（1）水提法：取200 g奇楠沉香叶粗粉，第1次加入12 倍纯水，浸泡0.5 h，加热回流提取2 h，200目筛网过滤；药渣继续加入12倍纯水加热回流提取2 h，200 目筛网过滤；合并滤液，75 ℃减压浓缩至质量浓度为1.0 g（药材）/mL的水提物溶液。

（2）醇提法：取200 g奇楠沉香叶粗粉，以70%乙醇溶液为溶剂，其余条件参数按照“水提法”制备方法进行提取，最终制备成质量浓度为1.0 g（药材）/mL的70%醇提物溶液。

2.2 总黄酮含量测定[12]

2.2.1 溶液的制备

（1）对照品溶液：取芦丁对照品约7.5 mg，精密称定，置于25 mL 容量瓶中，加入适量60%乙醇，超声溶解后继续加入60%乙醇定容成0.30 mg/mL的芦丁对照品溶液。

（2）供试品溶液：分别吸取1.0 g/mL 的奇楠沉香叶水提物、70%醇提物0.5 mL，精密称定，置于100 mL 容量瓶中，分别加入适量60%乙醇超声溶解，再定容成5.0 mg/mL 的水提物供试品溶液、70%醇提物供试品溶液。

2.2.2 标准曲线的绘制 准确吸取2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mL 芦丁对照品溶液于试管中，分别补足纯水至5.0 mL；再加入5%的亚硝酸钠溶液0.5 mL，室温静置6 min；继续加入10%的硝酸铝溶液0.5 mL，室温静置6 min；最后加入1.0 mol/L氢氧化钠溶液4.0 mL，室温静置15 min。应用紫外-可见光分光光度计于510 nm波长处测定吸光度（OD）值。以纯水为空白对照。以OD 为纵坐标（y），芦丁对照品溶液浓度为横坐标（x），绘制标准曲线，得线性回归方程为y=11.993 2x-0.460 8（R2=0.9960）。结果表明，芦丁对照品在0.06 ～0.12 mg/mL浓度范围内线性关系良好。

2.2 .3 精密度试验 准确吸取6 份芦丁对照品溶液2.5 mL，按照“2.2.2”项下方法测定OD（510 nm）值，计算出平均吸光度（AOD）值为0.461、相对标准偏差（RSD）为0.57%，表明仪器精密度良好。

2.2.4 稳定性试验 准确吸取水提物供试品溶液3.0 mL，同法进行反应0、30、60、90、120 min后测定OD（510 nm）值，平行3 份，计算出AOD 值为0.448、RSD为0.74%，表明该样品稳定性良好。

2.2.5 重复性试验 准确吸取水提物供试品溶液3.0 mL，同法反应后测定OD（510 nm 值），平行3 份，计算出AOD 值为0.445、RSD 为1.05%，表明该方法重复性良好。

2.2.6 加样回收率试验 吸取已知含量的水提物供试品溶液1.5 mL，加入芦丁对照品溶液1.25 mL，同法反应后测定OD（510 nm）值，平行3 份，计算出平均回收率为108.89%，表明该测定方法准确可靠。

2.2.7 样品含量测定 吸取“2.2.1”项下水提物供试品溶液、70%醇提物供试品溶液各3.0 mL，同法反应测定OD（510 nm）值，平行3 份，代入标准曲线计算出奇楠沉香叶中总黄酮含量分别为（5.04±0.011）%（水提法）、（3.78±0.020）%（醇提法）。

2.3 总多糖含量测定[13]

2.3.1 溶液的制备

（1）对照品溶液：取D-无水葡萄糖对照品约10.0 mg，精密称定，置于100 mL 容量瓶中，加入适量纯水溶解，同时定容成0.10 mg/mL 的D-无水葡萄糖对照品溶液。

（2）供试品溶液：分别吸取1.0 g/mL 的奇楠沉香叶水提物、70%醇提物溶液0.1 mL，置于100 mL容量瓶中，加入适量纯水溶解，同时定容成1.0 mg/mL的水提物供试品溶液、70%醇提物供试品溶液。

2.3.2 标准曲线的制备 准确吸取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 的D-无水葡萄糖对照品溶液于试管中。分别加入纯水至1.0 mL，再加入5%苯酚溶液1.0 mL，摇匀后加入浓硫酸溶液5.0 mL，90 ℃水浴20 min，取出冰浴冷却至室温，应用紫外-可见光分光光度计于490 nm波长处测定OD值。以纯水为空白对照。以OD 为纵坐标（y），D-无水葡萄糖对照品浓度为横坐标（x），绘制标准曲线，得线性回归方程为y=0.067 7x+0.079 5（R2=0.995 2）。结果表明，D-无水葡萄糖在1.43 ～14.31 μg/mL 浓度范围内线性关系良好。

2.3.3 精密度试验 准确吸取6 份D-无水葡萄糖对照品溶液0.6 mL，按照“2.3.2”项下方法测定OD（490 nm）值，计算出AOD 值为0.685、RSD 为0.76%，表明仪器精密度良好。

2.3.4 稳定性试验 准确吸取水提物供试品溶液0.5 mL，同法进行反应0、30、60、90、120 min后测定OD（490 nm）值，平行3 份，计算出AOD 值为0.419、RSD为1.29%，表明该样品稳定性良好。

2.3.5 重复性试验 准确吸取水提物供试品溶液0.5 mL，同法反应后测定OD（490 nm）值，平行3 份，计算出AOD 值为0.407、RSD 为1.35%，表明该方法重复性良好。

2.3.6 加样回收率试验 吸取已知含量的水提物供试品溶液0.25 mL，加入D-无水葡萄糖对照品溶液0.17 mL，同法反应后测定OD（490 nm）值，平行3 份，计算出平均回收率为106.88%，表明该测定方法准确可靠。

2.3.7 样品含量测定 吸取“2.3.1”项下水提物供试品溶液、70%醇提物供试品溶液各0.5 mL，同法反应测定OD（490 nm）值，平行3 份，代入标准曲线计算出奇楠沉香叶中总多糖含量分别为（6.86±0.11）%（水提法）、（3.09±0.27）%（醇提法）。

2.4 鞣质含量测定[14]

2.4.1 溶液的制备

（1）对照品溶液：取没食子酸对照品约5.0 mg，精密称定，置于100 mL 容量瓶中，加入适量纯水，超声溶解后继续加入纯水定容成0.050 mg/mL的没食子酸对照品溶液。

（2）供试品溶液：分别吸取1.0 g/mL 的奇楠沉香叶水提物、70%醇提物溶液0.5 mL，精密称定，置于100 mL 容量瓶中。分别加入适量纯水、70%乙醇，超声溶解，再定容成5.0 mg/mL 的水提物供试品溶液、70%醇提物供试品溶液。

2.4.2 总酚含量测定

2.4.2.1 标准曲线的绘制 准确吸取0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL 没食子酸对照品溶液于试管中。分别加入纯水至4.8 mL，再加入0.4 mL 磷钼钨酸溶液，混匀后加入10%碳酸钠溶液稀释至10.0 mL，避光静置30 min。应用紫外-可见光分光光度计于760 nm波长处测定OD值。以纯水为空白对照。以OD为纵坐标（y），没食子酸对照品浓度为横坐标（x），绘制标准曲线，得线性回归方程为y=0.093 8x+0.043 8（R2=0.994 8）。结果表明，没食子酸在0.99 ～9.90 μg/mL浓度范围内线性关系良好。

2.4.2.2 精密度试验 准确吸取6 份没食子酸对照品溶液0.8 mL，按照“2.4.2”项下方法测定OD（760 nm）值，计 算 出AOD 值 为0.366、RSD 为0.93%，表明仪器精密度良好。

2.4.2.3 稳定性试验 准确吸取水提物供试品溶液0.2 mL，同法进行反应0、30、60、90、120 min后测定OD（760 nm）值，平行测定3份，计算出AOD值为0.452、RSD为1.02%，表明该样品稳定性良好。

2.4.2.4 重复性试验 准确吸取水提物供试品溶液0.2 mL，同法反应后测定OD（760 nm）值，平行3 份，计算出AOD 值为0.440、RSD 为0.73%，表明该方法重复性良好。

2.4.2.5 加样回收率试验 吸取已知含量的水提物供试品溶液0.1 mL，加入没食子酸对照品溶液0.4 mL，同法反应后测定OD（760 nm）值，平行3 份，计算出平均回收率为96.46%，表明该测定方法准确可靠。

2.4.2.6 样品含量测定 吸取“2.4.1”项下水提物供试品溶液、70%醇提物供试品溶液各0.2 mL，同法反应测定OD（760 nm）值，平行3 份，代入标准曲线计算出总酚含量。

2.4.3 不被吸附多酚含量测定 分别吸取“2.4.1”项下水提物供试品溶液、70%醇提物供试品溶液10.0 mL 及20.0 mL 纯水，加至已加入0.6 g 干酪素的100 mL 具塞锥形瓶中，置于30 ℃水浴中保温1.0 h，时时振摇。取出过滤，先弃去初滤液，再吸取1.0 mL续滤液于10 mL试管中。按照“2.4.2.1”项下方法，加入3.8 mL 纯水及0.4 mL 磷钼钨酸溶液，再用10%的碳酸钠溶液稀释到10.0 mL，避光静置30 min。测定OD（760 nm）值，代入标准曲线计算出不被吸附多酚含量。

2.4.4 样品鞣质含量测定 根据以下公式计算：鞣质含量=（m总酚-m多酚）/m沉香叶×100%。奇楠沉香叶中鞣质含量分别为（2.16 ± 0.012）%（水提法）、（1.81±0.012）%（醇提法）。

2.5 抗氧化活性评价参考文献方法[15-16]进行操作并做适当改变。

2.5.1 DPPH·清除率测定 分别准确吸取：①0.1 mg/mL 的VC 溶 液：0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL；②2.50 mg/mL 的水提物溶液：0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mL；③2.49 mg/mL 的70%醇提物溶液：0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mL。各加入95%乙醇溶液至2.0 mL，再加入6.5×10-5mol/L 的DPPH·溶液2.0 mL，室温避光反应30 min，以95%乙醇溶液调零，应用紫外-可见光分光光度计于517 nm波长处测定OD 值（ODi）。同法测定95%乙醇2.0 mL与水提物/70%醇提物供试品溶液2.0 mL 混合后的OD 值（ODj），以及DPPH·溶液2.0 mL 与95%乙醇2.0 mL 混合后的OD 值（OD0）。计算公式如下：DPPH·清除率（%）=[1-（ODi-ODj）]/OD0×100%。

实验测得VC，奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对DPPH·的IC50分别为0.019、0.31、0.37 mg/mL，图1、图2 可见清除率均随着药物浓度的增加而提高。相比之下，奇楠沉香叶水提物、70%醇提物的IC50之间无显著性差异，但均明显高于VC，表明奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对DPPH·的清除能力均弱于VC，且水提法略优于醇提法。

图1 不同浓度抗坏血酸（VC）对DPPH·清除率的影响Figure 1 Effect of different concentrations of VC on DPPH·clearance rate

图2 不同浓度奇楠沉香叶提取物对DPPH·清除率的影响Figure 2 Effect of different concentrations of extract of Aquilaria sinensis leaves on DPPH·clearance rate

2.5.2 ABTS+·自由基清除作用测定 分别准确吸取：①0.1 mg/mL 的VC 溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL；②2.50 mg/mL 的水提物溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL；③2.49 mg/mL 的70%醇提物溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL。各加入纯水至1.0 mL，再加入ABTS+·溶液3.9 mL，室温反应6 min，应用紫外-可见光分光光度计于734 nm 波长处测定ODE。同时吸取ABTS+·溶液3.9 mL，加入70%的乙醇溶液0.1 mL 测定ODB。计算公式如下：ABTS+·清除率（%）=（ODB-ODE）/ODB×100%。

实验测得VC，奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对ABTS+·的IC50分别为0.004、0.12、0.16 mg/mL，图3、图4 可见清除率均表现出随着药物浓度的增加而提高。相比之下，奇楠沉香叶水提物、70%醇提物的IC50之间无显著性差异，但均明显高于VC，表明奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对ABTS+·的清除能力弱于VC，且水提法略优于醇提法。

图3 不同浓度抗坏血酸（VC）对ABTS+·清除率的影响Figure 3 Effect of different concentrations of VC on ABTS+·clearance rate

图4 不同浓度奇楠沉香叶提取物对ABTS+·清除率的影响Figure 4 Effect of different concentrations of Aquilaria sinensis leaves extract on ABTS+·clearance rate

2.5.3 ·OH 清除率测定 分别准确吸取：①0.1 mg/mL 的VC 溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL；②1.67 mg/mL 的水提物溶液0.05、0.1、0.2、0.4、0.6 mL；③1.67 mg/mL 的70%醇提物供试品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL。各加入纯水至1.0 mL，再分别加入1 mL 的6 mmol/L 硫酸亚铁溶液和6 mmol/L 过氧化氢溶液，室温反应5 min。继续加入1 mL 的6 mmol/L 水杨酸溶液，室温反应30 min，应用紫外-可见光分光光度计于510 nm波长处测定OD 值（ODi）。以纯水代替水杨酸溶液同法测定OD值（ODj）。以纯水代替样品溶液为空白对照同法测定OD 值（OD0）。计算公式如下：·OH 清除率（%）=[OD0-（ODi-ODj）]/OD0×100%。

实验测得VC，奇楠沉香叶水提物、70%醇提 物 对ABTS+·的IC50分 别 为0.007 8、0.069、0.074 mg/mL，图5、图6 可见清除率均表现出随着药物浓度的增加而提高。相比之下，奇楠沉香叶水提物、70%醇提物的IC50之间无显著性差异，但均明显高于VC，表明奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对·OH 的清除能力弱于VC，且水提法优于醇提法。

图5 不同浓度抗坏血酸（VC）对·OH清除率的影响Figure 5 Effect of different concentrations of VC on·OH clearance rate

图6 不同浓度奇楠沉香叶提取物对·OH清除率的影响Figure 6 Effect of different concentrations of Aquilaria sinensis leaves extract on ·OH clearance rate

图7 不同浓度抗坏血酸（VC）对清除率的影响Figure 7 Effect of different concentrations of VC onclearance rate

图8 不同浓度奇楠沉香叶提取物对清除率的影响Figure 8 Effect of different concentrations of Aquilariasinensis leaves extract on clearance rate

2.5.5 总还原力测定 分别准确吸取：①0.1 mg/mL的VC溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL；②5.0 mg/mL的水提物溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL；③5.0mg/mL的70%醇提物溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL。加入纯水至0.5 mL，再加入0.2 mmol 的pH6.6 磷酸盐缓冲液2.5 mL 和1%铁氢化钾溶液2.5 mL，50 ℃反应20 min，冰水降温；继续加入10%三氯乙酸溶液2.5 mL，混匀后以3 000 r/min 离心10 min；取上清液2.5 mL，加入纯水2.5 mL 和0.1%氯化铁溶液1.0 mL。应用紫外-可见光分光光度计于700 nm 波长处测定OD值。

在同样的质量浓度下，OD 值越大，即对Fe3+的还原能力越强，表明抗氧化能力越好。由图9、图10 可知，在同一浓度下，奇楠沉香叶的水提物OD 值比70%醇提物稍大，但均小于VC 的OD 值，表明奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对Fe3+的总还原力均弱于VC，且水提法略优于醇提法。

图9 不同浓度抗坏血酸（VC）对Fe3+还原力的影响Figure 9 Effect of different concentrations of VC on the reducing power of Fe3+

图10 不同浓度奇楠沉香叶提取物对Fe3+还原力的影响Figure 10 Effect of different concentrations of Aquilaria sinensis leaves extract on the reducing power of Fe3+

2.6 抗菌活性评价

2.6.1 菌液制备

将金黄色葡萄球菌等受试菌种于MH 琼脂板上划线复苏培养24 h，挑选生长良好的单菌落于营养肉汤培养基中，37 ℃培养20 h，采用麦氏比浊管进行校正，并稀释成浓度为1×106CFU/mL 的菌悬液。

2.6.2 MIC测定

采用微量二倍稀释法[17]。于96 培养孔板每排第1 ～12 孔各加入100 μL 的1 × 106CFU/mL 菌悬液，再按浓度由高至低依次往每排第1 ～11孔各加入100 μL 的系列浓度（1 000.0 ～0.98 mg/mL）水提物溶液、70%醇提物溶液，第12 孔只加入纯水作为空白对照。将96 孔培养板于培养箱中37 ℃培养20 h，吸取10 μL 混合培养液涂板后37 ℃培养20 h，以菌落数少于5个者为MIC。

由表1结果可知，奇楠沉香叶水提物对不同致病菌的抑制作用由强至弱依次是：铜绿假单胞菌=变形杆菌（15.63 mg/mL）＞沙门氏菌＞表皮葡萄球菌＞金黄色葡萄球菌＞福氏痢疾杆菌＞肺炎克雷伯菌=大肠杆菌（＞500.0 mg/mL）；70%醇提物则是：铜绿假单胞菌=变形杆菌（31.25 mg/mL）＞沙门氏菌＞表皮葡萄球菌=金黄色葡萄球＞福氏痢疾杆菌＞肺炎克雷伯菌=大肠杆菌（＞500.0 mg/mL）。表明奇楠沉香叶水提物、70%醇提物均对铜绿假单胞菌、变形杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性菌表现出较强的抗菌活性，同时水提法优于醇提法。

表1 奇楠沉香叶提取物对不同致病菌的MICTable 1 MICs of Aquilaria sinensis leaves extract against different pathogenic bacteria

2.7 抗炎活性评价[18]

将小鼠随机分组：空白对照组，奇楠沉香叶水提物高、中、低剂量组（生药3.33、1.67、0.83 g·kg-1），奇楠沉香叶70%醇提物高、中、低剂 量 组（生 药3.33、1.67、0.83 g·kg-1），每 组10 只，雌雄各半。空白对照组按20 mL·kg-1给予生理盐水灌胃，水提物组、70%醇提物组分别给予不同剂量药物灌胃，1 次/d，连续7 d。于实验第7 天灌胃给药1 h 后，吸取50 μL 的二甲苯溶液均匀涂抹小鼠右耳正反两面，致炎20 min 后处死，剪下右耳，用打孔器打出直径为6 mm 的圆耳片，称质量（m），以左耳为空白对照。计算公式如下：耳廓肿胀度=m右-m左。

由图11 可知：与空白对照组相比，奇楠沉香叶水提物高、中剂量组及70%醇提物高、中剂量组小鼠耳廓肿胀度降低均具有非常显著性差异（P＜0.01），水提物低剂量组具有显著性差异（P＜0.05），而70%醇提物低剂量组则无显著性差异（P＞0.05）；同一剂量水平，水提物组与70%醇提物组相比未见显著性差异（P＞0.05）。表明水提法与醇提法的抗炎效果相同或近似。

图11 不同剂量奇楠沉香叶提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响Figure 11 Effect of different doses of Aquilaria sinensis leaves extract on xylene-induced auricular swelling in mice

3 讨论

本研究测得奇楠沉香叶中总黄酮、总多糖、鞣质含量分别为：①水提法：5.04%、6.86%、2.16%；②醇提法：3.78%、3.09%、1.81%。结果表明，奇楠沉香叶中含量最高的是总多糖，其次是总黄酮，最低是鞣质。两法相比，水提法所得有效成分含量均高于醇提法，分别是其1.33、2.22、1.19 倍，以多糖的差异量最大。考虑以水为溶剂的提取物中由不同分子量组成的水溶性多糖较多，且大分子量多糖更多，而以70%乙醇为溶剂提取得到的多糖，分子量则较为集中，致醇提法多糖含量低于水提法。

测得奇楠沉香叶对DPPH·、ABTS+·、·OH、的IC50分别为：①水提法：0.31、0.12、0.069、0.71 mg/mL； ②醇 提 法： 0.37、 0.16、 0.074、1.17 mg/mL。结果表明，沉香叶对·OH 的清除作用最强，其次是ABTS+·、DPPH·，最弱是。两法相比，水提法所得物质的IC50均低于醇提法，分别是其0.84、0.75、0.93、0.61 倍，对清除能力的差异性最大。其原因可能与其黄酮、多糖、鞣质含量较高有关[19-20，14]。

测得奇楠沉香叶对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、沙门氏菌、福氏痢疾杆菌、大肠杆菌的MIC范围分别为：①水提法：15.63～＞500.0 mg/mL；②醇提法：31.25～＞500.0 mg/mL。结果表明，奇楠沉香叶对革兰氏阴性菌的作用明显强于革兰氏阳性菌，特别是对铜绿假单胞菌、变形杆菌的作用最强。两法相比，水提法所得物质的MIC 均低于或等于醇提法，分别是其1.0、0.5、1.0、0.5、0.5、0.5、1.0、1.0 倍，其原因可能与其黄酮、鞣质含量较高有关[21-22]。

测得奇楠沉香叶高、中、低剂量组小鼠耳廓肿胀度分别为：①水提法：13.0、15.2、16.3 mg；②醇提法：13.6、15.5、16.8 mg。结果表明，奇楠沉香叶对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀具有显著性抑制作用，尤其是高、中剂量。两法相比，水提法略优于醇提法，主要表现为水提法的低剂量组与空白对照组相比，耳廓肿胀度具有显著性差异，而醇提法的低剂量组则无显著性差异，但水提法与醇提法的相同剂量组间比较却无明显差异性。其原因可能是提取物在进入小鼠体内后，机体对有效成分的吸收、代谢有限，略微的含量差异，无法在活性表达上显现出不同。

综上所述，奇楠沉香叶中含有较多的总黄酮、总多糖和鞣质成分，同时具有较强的抗氧化、抗菌、抗炎活性，且成分含量与生物活性基本呈现正相关性。相比醇提法，水提法制备的奇楠沉香叶提取物具有更多的有效成分和更强的生物活性。