东北地区变应性鼻炎伴湿疹患者食入物皮肤点刺试验过敏原谱分析

刘璐 黄荷花 许翀 王新琢 关文超 柴若楠

过敏性疾病的患病率在世界范围内呈上升趋势[1]，已成为全球性的健康问题。目前我国约有3 亿变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）患者[2]，湿疹（eczema）发病率也逐年提高。食物过敏是临床上最常见、最重要的过敏性疾患之一[3]，可能影响近5%的成年人和8%的儿童[4]，它通过产生异常免疫应答，导致机体出现生理功能紊乱和/或组织损伤，进而引起一系列过敏症状。国内有一项研究针对我国31 个城市0～14岁儿童食物过敏的家长调查问卷显示，自我报告食物过敏占总调查人数的5.83%，不同年龄、地区及过敏原种类，食物过敏患病率存在明显差异。在食物过敏的儿童中，38.5%有湿疹病史，23.0%有过敏性鼻炎病史，37.7%有家族过敏史，但成人尚无明确资料[5]。针对过敏性疾病，明确过敏原、回避过敏原是治疗的关键。

皮肤点刺试验（skin prick test,SPT）是检测IgE介导的过敏性疾病最常用的方法，具有快速、简便、成本低等优点[6]，且能够检测的过敏原较广泛，已成为临床上最常用的过敏原检测方法之一。研究表明，食物特异性SPT 阳性的敏感度和特异度介于30%～ 0%和20%～60%，但阴性的临床特异度可达90%，可用于排除对某种变应原过敏的可能性，在食物过敏中尤为明显[7]。本研究纳入我科变应性鼻炎伴湿疹就诊的患者共计1269 例，进行回顾性研究，分析其SPT 阳性过敏原结果，统计常见的食物过敏原谱在不同年龄、性别之间的流行病学特点及与血清sIgE 检测结果的差异。

资料与方法

1 临床资料

回顾性分析我科自2020 年9 月～2021 年7 月因过敏性鼻炎伴湿疹行体内试验（皮肤点刺试验）及体外试验（血清sIgE 检测试验）的1269 例患者，其中男657 例（51.77%），女612 例（48.23%），年龄2～77 岁，平均(21.5±19.2)岁；按性别及年龄（儿童组2～14 岁，成人组≥15 岁）进行分组，其中男儿童组360 例（28.37%），男成人组297 例（23.40%），女儿童组258 例（20.33%），女成人组354 例（27.90%）。统计食入物阳性过敏原，分析不同性别、不同年龄患者食入物点刺阳性率差异及与sIgE 检测结论的一致性（比较食入物SPT 与血清sIgE 检测项目相同且常见的11 种过敏原），其中两种检测方法结果均呈阳性记为双阳，两种检测方法结果均呈阴性记为双阴，两种检测方法的总阳性率=（双阳人数+SPT 单阳人数+sIgE 单阳人数）/检测总人数，两种检测方法的一致率=（双阳人数+双阴人数）/检测总人数[8]；所有患者的临床诊断均由专科医生完成，符合目前我国变应性鼻炎[9]、湿疹[10]的诊断标准，本研究已获得本院伦理委员会批准。

纳入标准：①所有纳入病例均来自东北地区；②符合最新变应性鼻炎、湿疹的诊断标准，即有AR的典型症状：打喷嚏、流清水涕、鼻塞、鼻痒（出现2项或以上），每天持续时间大于1 小时，可伴有眼红、眼痒、眼干、流泪等过敏性结膜炎症状；体征：发作时双侧鼻腔黏膜苍白、肿胀，下鼻甲水肿以及鼻腔水样分泌物，符合以上症状和体征即可诊断为AR；特应性皮炎通常称为湿疹，目前常用的是“张氏”中国成人/青少年标准，即①病程＞6 个月的对称性湿疹；②有特应性个人史和/或家族史；③血清总IgE 升高/或外周血嗜酸性粒细胞升高和/或一种以上特异性IgE 阳性，符合①＋②或①＋③，即可诊断为特应性皮炎；③均进行14 组食入物SPT（包括鸡蛋白、牛奶、花生、黄豆、牛肉、羊肉、海鱼、虾、蟹、核桃、腰果、芒果、辣椒、苹果等14 种常见易致敏食物）和血清sIgE 检测{包括10 种吸入性变应原和11种食入性变应原，其中食物组过敏原包括鸡蛋白、牛奶、花生、黄豆、牛肉、羊肉、海鱼、虾、蟹、核桃与腰果}；④7d 内未服用对研究结果造成影响的药物，如抗组胺药或局部应用糖皮质激素。

排除标准：①患有呼吸道感染性疾病、恶性肿瘤、严重全身系统疾病患者；②皮肤划痕症阳性或点刺区域有皮损或皮肤过度松弛者（老年人）；③7d内口服抗组胺药物或皮肤外用糖皮质激素者；④只有SPT 检测结果或血清sIgE 检测结果其中之一。

2 皮肤点刺试验

2.1 点刺针与点刺液

采用一次性金属单头点刺针和食入物标准化变应原点刺液（北京新华联协和药业有限责任公司试剂）。检测范围为14 种食物过敏原组合（具体同上），用0.1%组胺液（阳性对照）和0.9%生理盐水（阴性对照）作为对照试验。

2.2 操作步骤

进行SPT 前7d，停用一切口服抗组胺或外用糖皮质激素类药物。具体操作步骤如下：①选择单侧或双侧前臂内侧作为点刺部位，用记号笔标记出点刺区域；②用75%酒精消毒点刺区域，待干；③将各种过敏原点刺液、阳性对照液、阴性对照液依次滴在点刺区域，相邻药滴之间间隔至少2cm，避免相互干扰；④使用金属单头点刺针90 度角透过药滴垂直刺入皮肤，避开血管，尽量不刺出血，刺入后停留1s 拔出；⑤若患者无强烈反应，则于点刺完成后5～10min 擦拭残存点刺液体，若患者反应强烈，局部点刺部位风团直径＞4cm，出现发红、瘙痒刺激、伪足等，则立即将点刺液擦拭干净；⑥15～20min 后判读点刺结果，用SPT 专用测量尺测量风团及红晕大小，并记录。

2.3 结果判读

依据最新过敏原皮肤点刺试验的专家共识[11]，SPT 结果判读中以风团大小作为判定标准，红晕大小作为参考，结果判定标准如下:“-”为与阴性对照风团大小相同;“+”为大于阴性对照但<1/2 阳性对照风团;“++”为≥1/2 但小于阳性对照风团;“+++”为1～<2 倍阳性对照风团;“++++”为≥2 倍阳性对照风团。

3 血清sIgE 检测试验

抽取患者血液，采用EUROBIotMaster 全自动免疫印迹仪定量检测患者血清sIgE 水平，所用试剂为吸入性及食物性过敏原特异性IgE 抗体检测试剂盒（欧蒙印迹法）。血清变应原浓度分为7 个等级：0 级为0～0.35KU/L，1 级为0.36～0.70KU/L，2 级为0.71～3.50KU/L，3 级为 3.51～7.50KU/L,4 级为 7.51～17.5KU/L，5 级为17.6～50.0KU/L，6 级为＞50KU/L，以血清sIgE 浓度＞1 级为阳性标准。

4 统计学分析

采用SPSS 25.0 统计软件分析数据。食入性变应原皮肤点刺试验结果以频数和率（%）表示，组间阳性率比较选用卡方检验和fisher 确切概率法，两种检测方法一致性比较选用配对四格表资料卡方检验，确定检验水准α=0.05，以P＜0.05 表示结果有统计学差异。

结果

1 一般情况，见表1

表1 调查人群一般情况

2 不同性别、年龄患者食入物SPT 阳性率

把变应性鼻炎伴湿疹患者按性别进行分组，分别统计男女患者食入物SPT 阳性率，具体频数（见表2-1），经比较差异无统计学意义（P>0.05），表明食入物SPT 阳性率不受患者性别影响。

表2 -1 不同性别组食入物变应原SPT 阳性率比较（例，%）

把变应性鼻炎伴湿疹患者按年龄分组，分别统计儿童组与成人组患者食入物SPT 阳性率，具体频数（见表2-2），经比较差异有统计学意义（P<0.05），表明年龄是影响食入物SPT 阳性率的因素之一。

表2 -2 不同年龄组食入物变应原SPT 阳性率比较（例，%）

3 儿童食入物变应原SPT 检测结果

儿童食入物SPT 过敏原阳性率前8 位由高到低依次是：鸡蛋白（n=102，16.50%）、核桃（n=78，12.62%）、牛奶（n=66，10.68%）、花生（n=54，8.74%）、芒果（n=54，8.74%）、蟹（n=49，7.93%）、海虾（n=44，7.12%）、腰果（n=42，6.80%）；其余食入物SPT 过敏原阳性率分别是：黄豆（n=36，5.83%）、苹果（n=30，4.85%）、牛肉（n=24，3.88%）、辣椒（n=24，3.88%）、海鱼（n=21，3.40%）和羊肉（n=18，2.91%）。

4 成人食入物变应原SPT 检测结果

成人食入物SPT 过敏原阳性率前8 位由高到低依次是：蟹（n=64，9.83%）、核桃（n=60，9.22%）、牛肉（n=57，8.76%）、海虾（n=48，7.37%）、牛奶（n=48，7.37）、花生（n=46，7.07%）、芒果（n=44，6.76%）、辣椒（n=36，5.53%）；其余食入物SPT 过敏原阳性率分别是：海鱼（n=21，3.23%）、苹果（n=21，3.23%）、黄豆（n=20，3.07%）、鸡蛋白（n=18，2.76%）、腰果（n=17，2.61%）和羊肉（n=12，1.84%）。

5 儿童食入物变应原SPT 与血清sIgE 检测阳性率及一致性分析

618 例儿童变应性鼻炎伴湿疹患者，SPT 与血清sIgE 检测阳性率及一致性结果，见表3。

表3 儿童SPT 与血清sIgE 检测阳性率结果及一致性分析（n=618）

儿童11 种食入物变应原SPT 与sIgE 检测结果的一致性介于60.03%～96.44%,其中花生、蟹、腰果、黄豆SPT 与血清sIgE 两种方法检测结果高度一致，一致性平均大于95%，差异无统计学意义（P>0.05）。

6 成人食入物变应原SPT 与血清sIgE 检测阳性率及一致性比较

651 例成人变应性鼻炎伴湿疹患者，SPT 与血清sIgE 检测阳性率及一致性结果，见表4。

表4 成人SPT 与血清sIgE 检测阳性率结果及一致性分析（n=651）

成人11 种食入物变应原SPT 与sIgE 检测结果的一致性介于80.34%～97.85%,其中核桃、牛肉和海虾SPT 与血清sIgE 两种方法检测结果高度一致，一致性平均大于95%，差异无显著性（P>0.05）。

讨论

变应原皮肤点刺试验（SPT）是IgE 介导的Ⅰ型过敏性疾病的一线诊断方法，具有安全、灵敏度高和特异性好等优点[6]，目前我科采用标准化过敏原提取物组合，涵盖生活中常见的12 种吸入物过敏原和14 种食入物过敏原。一般来说SPT 安全性高，已商用的过敏原提取物引起的全身反应少见。食物变应原SPT 阳性的敏感度和特异度不高[12]，易受患者年龄、点刺区域皮肤敏感性及试验前口服抗组胺药物等因素影响，且SPT 阳性结果还需结合患者临床症状方有诊断价值；体外血清sIgE 检测是诊断过敏性疾病的一种常规定量检测手段，测定食物过敏敏感度高但特异性有限，且不易受药物干扰，除需抽血外不会给患者带来任何风险，检测结果sIgE 的浓度越高，诊断食物过敏的可能性越大，因此临床诊断食物过敏时，建议两种检测方法同时进行。食入物SPT 是临床检测过敏性疾病不可或缺的诊断工具，标准化过敏原提取物的制备虽已取得较大进展，但是仍有许多变应原尚无法被检测，且许多商用变应原提取物的质量仍有待提高，未来筛选高品质、标准化的变应原点刺液是国内外学者的研发重点。目前国内外开展IgE 介导食物过敏反应的检测除体内SPT 和体外sIgE 检测外，还有口服食物激发试验（OFC）、嗜碱性粒细胞活化试验（BAT）、特异性IgG4 抗体检测试验、头发分析、皮肤电测试等，但因临床应用风险较高、操作技术复杂、缺乏科学、彻底的验证，因此临床可应用受限，未来是否能作为食物过敏新的诊断工具，还有工作许多需要去完善。

本研究依据患者食物SPT 统计结果，发现东北地区儿童食物阳性率前8 位的过敏原是鸡蛋白、核桃、牛奶、花生、芒果、蟹、海虾、腰果；成人食物阳性率前8 位的过敏原是蟹、核桃、牛肉、海虾、牛奶、花生、芒果、辣椒，表明不同年龄患者食物过敏原谱分布不同，且儿童组食入物点刺阳性率（41.75%）高于成人组（32.72%），结果具有显著性差异（P<0.05），表明食物过敏在儿童中更容易发生。国内张筱佼等[13]研究发现南部沿海珠海地区2146 例过敏性疾病儿童行变应原SPT 检测，食物组阳性过敏原前9 位依次是：牛奶、鸡蛋、虾、鸡蛋清、鸡蛋黄、花生、核桃、鳕鱼、蟹肉，且儿童食物过敏以鸡蛋、牛奶最为常见；国内学者黄霞[14]关于分析1863 例过敏性疾病患儿食入物变应原SPT 结果，发现食物变应原总阳性率31.7%，阳性过敏原前8 位由高到低依次是蟹、海虾、花生、鸡蛋、牛奶、大豆、牛肉、芒果，且婴幼儿期以牛奶、鸡蛋过敏为主。本文结果与既往研究重合率高，但仍有部分差别，提示过敏原种类可能与地理区域相关，或纳入研究对象所患过敏性疾病不同导致。总体来说，东北地区AR 伴湿疹患者最常见的食物过敏原为鸡蛋、核桃、牛奶、蟹、花生、芒果和海虾，不同年龄阶段过敏原阳性率及分布不同，儿童以鸡蛋、核桃、牛奶过敏为主，成人蟹、牛肉、海虾过敏阳性率逐年提高，可能与随着患者年龄增长，可接触到的食入性过敏原种类增多有关；不同年龄患者变应原反应强度都主要集中在+或++，较少出现重度过敏反应，但鸡蛋、牛奶、蟹因含有丰富的异种蛋白，变应原致敏性强，所以容易导致人体严重过敏反应的发生，在食物过敏患者中应引起重视。

研究发现两种方法同时检测可以提高检测阳性率，且二者具有较好的一致性（均>60%），与鄢勤文[8]、张迎宏等[15]报道一致。最新的过敏原皮肤点刺试验的专家共识[11]中指出：SPT 和sIgE 检测具有一定的一致性，成年人鱼、虾、鸡蛋白的检测一致性较好；而花生、核桃、碧根果一致性中等，儿童食物过敏的一致性较成人差。在本研究中，儿童花生、蟹、腰果、黄豆SPT 与血清sIgE 两种方法检测结果高度一致，一致性平均大于95%，差异无显著性（P>0.05），鸡蛋白、牛奶一致性较差（>60%），其余核桃、海虾、牛肉、海鱼、羊肉一致性良好（85%～95%）；成人核桃、牛肉和海虾SPT 与血清sIgE 两种方法检测结果高度一致，一致性平均大于95%，差异无统计学意义（P>0.05），蟹一致性中等（>80%），余鸡蛋白、牛奶、花生、黄豆、腰果、海鱼与羊肉一致性良好（90%～95%），结果显示儿童两种方法诊断食物过敏的一致性较成人差，与既往研究高度一致[11]，且食物SPT 与血清sIgE 检测变应原敏感性因过敏原种类不同而存在差异，表明过敏原种类可影响检测方法的一致性；且两种检测方法的一致性差异不仅与体内、体外试验的免疫反应不同有关，还与变应原检测机制、技术操作不同有关，研究表明SPT 的试验原理是抗原抗体复合物在体表的反应，通过肥大细胞释放组胺等介质，观察皮肤表面免疫反应发生情况，属于间接的生物测定，而血清sIgE 检测是对血清游离的特异性sIgE 抗体的直接免疫化学测定[9]；此外SPT 使用的是否是标准化的变应原提取液，也会导致检测结果的不一致，因此SPT 与血清sIgE 检测具有一定的一致性，临床应用中可相互补充，但不可替代[11]。国内杨晴等[16]在一项关于苏皖地区101例变应性鼻炎患者吸入物过敏原SPT 与血清sIgE检测一致性与相关性分析中，提出不同气传变应原，两种检测方法检出阳性率一致性及相关性存在差异，这与本文结果一致。但值得注意的是，大多数文献研究表明，SPT 的敏感性高于血清sIgE，本研究结果中，几乎所有食物过敏原血清sIgE 检测敏感性高于SPT，扩大样本量研究，结果仍未改变，这可能因为在以往的研究中，大多数是关于吸入物过敏原如屋尘螨、粉尘螨、季节性蒿属花粉的SPT 与血清sIgE 的比较研究，很少有关于食物SPT 与血清sIgE的研究，也可能与变应原种类、检测食物过敏机制不同等因素有关。当然任何检测方法都不能代替充分评估的重要性，临床诊断食物过敏还需要结合病史和体格检查。

综上所述，东北地区AR 伴湿疹患者最常见的食物过敏原是鸡蛋、核桃、牛奶、蟹、花生、芒果和海虾，过敏性疾病患者因各种原因无法进行变应原检测时应尽量避免食用上述食物；受检人群儿童食物SPT 阳性率高于成人患者，差异具有显著性，且不同年龄组食物过敏原谱也存在较大差异；食入物SPT检测能有效预测阳性过敏原，且与血清sIgE 检测结果具有很好的一致性（>60%），同时检测可以提高食物过敏原阳性检出率，因此在临床诊断中可相互补充。本研究对确定东北地区过敏性疾病患者常见食物过敏原谱、分析食入物SPT 与sIgE 检测的敏感性、一致性方面有较大意义；对临床合理规避过敏原、更好的对患者进行饮食管理提供科学依据。