经典型霍奇金淋巴瘤组织中COX-2、fascin蛋白表达水平及其与预后的相关性

刘 冰 王 舒 杨 莹

经典型霍奇金淋巴瘤(classical Hodgkin lymphoma,CHL)是最常见的淋巴瘤之一,与其他淋巴瘤实体相比,具有独特的细胞组成,在CHL中,不到2%的细胞是霍奇金和里德·斯腾伯格(HRS)细胞,其余包括巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、肥大细胞和 T 细胞[1-2]。环氧合酶(COX)-2是一种诱导性酶,负责在炎症和伤口愈合部位产生前列腺素[3]。COX-2在多种人类癌症中高度表达,例如乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌[4]。Fascin是一种肌动蛋白结合蛋白,由FSCN1编码基因(位于 7 号染色体上),其表达与肿瘤生长、迁移、侵袭和转移相关[5-6]。本研究旨在研究COX-2、fascin在CHL组织中的表达,并探讨其评估CHL预后的价值。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2016年5月至2018年5月本院收治CHL患者50例,年龄7～72岁,平均(24.54±5.13)岁。纳入标准:①根据2008版世界卫生组织(WHO)淋巴造血系统肿瘤分类标准[7],经病理及免疫组化确诊为CHL;②患者签署自愿受试同意书。排除标准:①精神疾病患者;②合并其他恶性肿瘤患者;③合并其他器官严重性病变患者。

1.2 免疫组化分析COX-2、fascin水平

用免疫组织化学检测COX-2、fascin表达,以鼠抗人COX-2、fascin单克隆抗体为一抗,用已知阳性切片作阳性对照,PBS代替一抗作阴性对照,用苏木精复染细胞核,参考标准,COX-2、fascin阳性产物均位于细胞核,视野中出现粗细一致的棕黄色为阳性染色,无棕色反应为阴性染色。根据阳性细胞占全部细胞数的百分数对其进行判断,阴性为阳性细胞数<10%;阳性为阳性细胞数>10%。

1.3 随访

随访时间指从确诊为CHL至死亡或随访截止的时间,随访截止时间为2021年8月1日,50例患者均采用电话随访。总生存(OS)时间从疾病确诊计算至任何原因引起的死亡、失访或随访结束。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 CHL患者临床病理特征

50例CHL患者中男性29例,患者年龄≥45岁有8例。参照WHO 2008版淋巴瘤分类标准进行分类:AnnArbor分期Ⅰ～Ⅱ期者22例(44%),Ⅲ～Ⅳ期者28例(56%)。国际预后指数(IPI)评分1～2分者43例(86%),3～5分者7例(14%)。根据B症状(发热、盗汗、6个月内体重减轻>10%)诊断标准,有B症状的患者共13例(26%)。血清乳酸脱氢酶(LDH)超过正常值高限(240 U/l)者15例(30%)。全部患者标本均进行了EBER原位杂交检测,检测结果显示EBV阳性率为40%(20/50)。

2.2 CHL患者COX-2、fascin表达与临床特征的相关性

COX-2阳性表达者42例(84%),fascin阳性表达者44例(88%)。将患者的临床特征分别与COX-2、fascin表达进行分析比较,差异均无统计学意义(P>0.05),见表1。

表1 COX-2、fascin表达与CHL患者临床特征的相关性分析/例

2.3 CHL患者COX-2、fascin表达与3年总生存率的关系

50例CHL患者中,截止到随访结束有19例死亡患者,3年OS率为62%。COX-2、fascin阳性表达患者的OS率明显低于阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 CHL患者COX-2、fascin表达与3年总生存率的关系/例

2.4 CHL患者3年总生存的多因素分析

多因素分析结果显示,COX-2阳性、fascin阳性是影响CHL患者3年OS预后独立影响因素(P<0.05),见表3。

表3 CHL患者3年总生存的多因素分析

3 讨论

CHL占所有淋巴瘤的15%～25%,是西方世界儿童和年轻人中最常见的淋巴瘤亚型[8]。在淋巴系统恶性肿瘤中,CHL具有显著的组织形态学外观、恶性细胞的特殊表型特征以及大量主要免疫细胞浸润等特征[9]。CHL的病理诊断需要存在特征性的肿瘤细胞,称为霍奇金和里德-斯腾伯格(HRS)细胞,其数量超过肿瘤微环境(TME)中的反应细胞,包括T和B淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、肥大细胞、浆细胞和基质细胞[10]。大多数局限期或晚期CHL患者可以通过化疗治愈;然而,5%～10%的患者会出现一线治疗难治的疾病,10%～30%的患者会复发[11]。

Fascin是一种肌动蛋白结合蛋白,可促进不同模式的细胞迁移,包括在胚胎发育和癌症转移期间[12]。Fascin促进迁移的一种方式是将肌动蛋白丝交联或捆绑在一起[13]。Fascin有助于形成许多富含肌动蛋白的迁移结构,如丝状伪足、片状伪足、应力纤维和微刺[14]。Fascin也定位于富含肌动蛋白的粘附结构[15]。由于其在细胞迁移中的作用,Fascin在成人上皮组织中不存在,但在许多类型的癌组织中高度表达[16]。Fascin的高表达与预后不良和转移增加有关[17]。因此,Fascin是一种预后生物标志物和转移性癌的潜在治疗靶点。COX-2,也称为前列腺素内过氧化物合酶-2,在多种细胞中表达,尤其是炎症细胞。在静止细胞状态下,COX-2的表达被限制在非常低的水平,在蛋白质印迹上几乎检测不到。在用细胞因子、脂多糖(LPS)、生长和促有丝分裂因子进行细胞刺激后,COX-2的表达激增[18-19]。环氧合酶催化花生四烯酸转化为前列腺素和血栓素,并以两种同工型Cox-1和Cox-2存在[20]。COX-2的持续过表达在介导炎性组织损伤和癌症生长和转移方面起着重要作用[21]。Cox2通过合成前列腺素E2调节细胞增殖、细胞粘附、抑制细胞凋亡、免疫监视和血管生成[22]。虽然COX-2已经被报道参与致癌作用,但很少有研究报告HL和Cox-2的表达之间的关联[23]。本研究中50例CHL患者中,截止到随访结束有19例死亡患者,3年OS率为62%。COX-2、fascin表达阳性的OS率明显低于阴性组,差异有统计学意义。多因素分析结果显示,COX-2阳性、fascin阳性是影响CHL患者3年OS预后独立影响因素。但是本研究存在局限性,样本量少以及选取中心单一,对结果可能会产生偏移,因此未来需要更具前瞻性的全面研究来证实此结果。

综上所述, COX-2、fascin蛋白表达均与CHL患者的预后相关,对CHL患者的预后具有一定判断作用。