15%氯虫苯·虱螨脲悬浮剂高效液相色谱法分析

马 涛，刘 哲，迟归兵

(1.山西省检验检测中心(山西省标准计量技术研究院)，山西 太原 030025；2.吉林省农业技术推广总站，吉林 长春 130033；3.山东省农药检定所，山东 济南 250100)

1 前言

氯虫苯甲酰胺是邻甲酰氨基苯甲酰胺类广谱杀虫剂，最早由美国杜邦公司于2008年在我国登记，化学式为C18H14BrCl2N5O2，CAS登录号500008-45-7。熔点(℃)208～210，水中溶解度(mg/L，pH4～9，20～25℃)1.0；有机溶剂中溶解度(g/L，20～25℃)丙酮3.4、乙腈0.71、二氯甲烷2.48、二甲基甲酰胺124、乙酸乙酯1.14、乙腈1.71[1]。杀虫机理：主要通过激活害虫体内鱼尼丁(肌肉)受体，造成过度释放细胞内的钙离子，导致昆虫瘫痪死亡。氯虫苯甲酰胺高效广谱，对鳞翅目的夜蛾科、螟蛾科、蛀果蛾科、卷叶蛾科、粉蛾科、菜蛾科、麦蛾科、细蛾科等均有很好的控制效果，还能控制鞘翅目象甲科，叶甲科；双翅目潜蝇科等多种非鳞翅目害虫。虱螨脲属苯甲酰脲类杀虫杀螨剂，最早由瑞士先正达作物保护有限公司于2003年在我国取得登记，分子式为C17H8Cl2F8N2O3，CAS登录号103055-07-8。熔点(℃)168.7～169.4，水中溶解度(mg/L，pH7.7，20～25℃)0.048，有机溶剂中溶解度(g/L，20～25℃)丙酮460、二氯甲烷84、乙酸乙酯330、正己烷0.10、乙腈52、甲苯66[1]。作用机理：通过抑制幼虫几丁质合成酶的形成而发生作用，干扰几丁质在表皮的沉积，导致昆虫不能正常蜕皮变态而死亡。主要用于防治棉花、玉米、蔬菜、果树等鳞翅目等幼虫，适于防治对合成除虫菊酯和有机磷农药产生抗性害虫。氯虫苯甲酰胺由于不科学合理使用，早在2012年就有报道其在防治对象上形成严重抗性报道[2]，与虱螨脲混配，在取得更好的防治效果同时，将大大减缓抗性问题。

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以“±s”表示；采用t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

“Canterbury”英格兰肯特郡的一个城市，有许多古旧精美的建筑，包括英国国教会的著名的中心大教堂。1170年托马斯·贝克特在这里遇害后，此地成为基督徒朝圣地。现在是重要的旅游胜地。1988年坎特伯雷大教堂入选世界遗产名录（克劳瑟，2007）。[13]译者采用音译的方法，保留了源语言文化，但是由于儿童读者在身心发展两方面都还没有发育完全，太多的异质语言会超过他们的知识范围和理解能力。添加注释，会更易于儿童读者接受。

这一切，天空中的青辰看得十分清楚。他不明白，白鹫这类生物，一向以尸体为食，除非生命受到威胁，否则不会攻击活物。即使它处于饥饿中，而面前恰巧有一只濒死的猎物，它也要等，直到对方的最后一丝气息断绝。

目前国内该混剂的分析方法尚未见公开报道，本文介绍了一种用高效液相色谱法同时分离测定氯虫苯甲酰胺和虱螨脲的方法。该方法操作简单、快速，分离效果和稳定性好，准确度和精密度均能达到定量分析要求，是一种比较实用的产品质量检测方法。

2 实验部分

2.1 仪器和试剂

式中：

2.1.2 试剂 超纯水(电阻率：25℃，18.2 MΩ.cm)；乙腈(色谱纯)；氯虫苯甲酰胺标样99.7%；虱螨脲标样98.5%；15%氯虫苯·虱螨脲悬浮剂(氯虫苯甲酰胺10%、虱螨脲5%)。

2.2 液相色谱条件 色谱柱：Ultimate®LP-C184.60×250 mm，5 μm不锈钢柱；柱温：30℃；流动相：乙腈∶水=70∶30(V/V)；流速：1.0 mL/min；检测波长：260 nm；进样量：5.0 μL。在上述条件下，氯虫苯甲酰胺和虱螨脲的保留时间分别约为4.8 min和13.1 min。

2.3 操作步骤

A2—试样溶液中氯虫苯甲酰胺(虱螨脲)峰面积的平均值；

2.3.2 试样溶液的配制 称取0.5 g(精确至0.000 2 g)的试样，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，超声振荡10 min，静置到室温，摇匀，用0.2 μm孔径针头式滤器过滤，备用。

2.3.3 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针标样溶液的2个待测组分响应值相对变化均≤1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

2.3.4 计算 采用外标法计算。将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样中的氯虫苯甲酰胺(或虱螨脲)峰面积分别进行平均。试样中氯虫苯甲酰胺(或虱螨脲)的质量分数X(%)按下式计算：

1）扭转冲击工具可将流体的液压能转换成周向的、高频的机械能，用于给钻头施加周期性的低幅高频扭转冲击，能对钻头施加高效的破岩扭矩，大幅减小或消除钻头的黏滑振动。

2.1.1 仪器与设备 Agilent HPLC 1100液相色谱仪(配工作站、在线脱气机、100位自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器)；梅特勒AG285十万分之一电子天平；Agilent针头式过滤器(RC 0.2 μm)；Millipore QG超纯水机；超声波清洗机；常用玻璃器皿；2.5 mL一次性注射器。

A1—标样溶液中氯虫苯甲酰胺(虱螨脲)峰面积的平均值；

审计画像指标体系分为正向“经责像素体系”和负向的“风险像素体系”，两大类，正向经责像素体系主要用来描述所属公司的基本运营情况。涵盖集团公司战略、优化配置资源及管理提升情况、网络投资建设及资产运营效率情况、业务经营情况、市场拓展及发展能力情况五大类指标组成，目前共由36个细项指标组成。风险像素指标主要涉及的是企业的经营风险指标，主要分成收入、成本、业务发展、资金资产、红线等七大类指标体系，目前共由35个风险指标组成。

2.3.1 标准溶液的配制 称取氯虫苯甲酰胺标准品0.05 g(精确至0.000 2 g)、虱螨脲标准品0.03 g(精确至0.000 2 g)置于同一100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，超声振荡10 min，静置到室温，摇匀，用0.2 μm孔径针头式滤器过滤，备用。

m1—标样氯虫苯甲酰胺(虱螨脲)的质量，g；

3.3 精密度测定 将样品分别称取6份，分别测定，结果经统计分析，氯虫苯甲酰胺和虱螨脲的标准偏差分别为0.061 887和0.064 704，变异系数分别为0.61%和1.20%。

3.2 检测波长的选择 分别将某一浓度氯虫苯甲酰胺和虱螨脲标准溶液进行分析，利用DAD检测器进行光谱扫描，得到二者的紫外吸收光谱图(图3、4)，可见二者最大吸收均在低紫外区。经对照实验，选择波长在260 nm处时，各杂质不影响测定，两个待测组分都有较大吸收，且远离低波长紫外区。

3 结果与讨论

3.1 流动相的选择 15%氯虫苯·虱螨脲悬浮剂中杂质成分较少，为确保待测组分与杂质完全分离，分别用甲醇/水和乙腈/水的不同比例进行了试验。结果表明：使用同样比例的情况下，乙腈/水的系统压力显著低于甲醇/水，随着流动相中乙腈所占比例的减小，出峰时间会延迟。在乙腈∶水=70∶30(V/V)时，各待测组分与杂质能得到较理想地分离，且基线平稳、峰形对称，分析时间也较短。在上述分析条件下，同一样品溶液间隔72 h以上进行重复测定，对所得谱图分析比对，两个感兴趣组分的保留时间、峰形和峰面积大小等均一致。(图1、2)

图1 标样液相色谱图

图2 试样液相色谱图

p—标样氯虫苯甲酰胺(虱螨脲)的质量分数，%。

图3 氯虫苯甲酰胺紫外吸收谱图

图4 虱螨脲紫外吸收谱图

m2—试样的质量，g；

表1 精密度测量结果

3.4 准确度测定 采取添加回收率测定方法来计算本方法的准确度，称取5份已知含量的试样，分别加入不同量的氯虫苯甲酰胺和虱螨脲标样，在上述2.2色谱条件下进行测定，测得氯虫苯甲酰胺的平均回收率为100.11%，虱螨脲的平均回收率为100.30%。

调用中心随后连接注册中心，并通过服务名称从注册中心获取服务所在的IP地址和端口号(即服务地址)，该过程称为“服务发现”。由此，调用中心可根据服务地址，以反向代理的方式调用具体的服务容器，该过程称为“服务调用”。

3.重视“服”好务。加强硬件和软件建设，配足办税设备，优化整合办税厅人员，坚持执行限时办结制度，采取限时办结+即时办结，以及预约服务+延时服务等有效措施，为纳税人提供便捷的人工办税和自助办税服务，使办税服务质量不断提高。同时，结合“便民办税春风行动”大力做好政策宣传，及时把税收优惠政策送到纳税人手中，让纳税人应知尽享税收红利。

表2 添加回收率测定结果

3.5 线性关系的测定 将已知含量的标样分别配制成一系列已知浓度的梯度溶液(包含分析方法中的检测浓度水平)，以质量浓度(mg/mL)为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制相关曲线，可知在下述浓度范围内，两个待测组分均呈线性关系。虱螨脲线性方程为：y=16 333x+241.91，线性范围内，相关系数为0.999 7；氯虫苯甲酰胺线性方程为：y=15 844-49.303，线性范围内，相关系数为0.999 9。试验数据(表3)。

表3 虱螨脲(氯虫苯甲酰胺)的线性相关性试验数据

3.6 方法特异性 方法特异性是指分析方法中特定组分产生的特定信号，即在其他成分(如杂质、添加剂等)可能存在时，采用的分析方法能够准确测定目标组分(有效成分、杂质等)特性的能力[3]。为确证本方法分析两种组分的特异性，用二极管阵列检测器分别对15%氯虫苯·虱螨脲悬浮剂试样两个待测组分峰的纯度进行检测，结果(图5、6)，表明本方法可以有效分离两个待测组分。

图5 虱螨脲峰纯度光谱图

图6 氯虫苯甲酰胺峰纯度光谱图

3.7 方法各指标结果判定 参照NY/T 2887-2016《农药产品质量分析方法确认指南》要求[3]，判定本分析方法各指标参数结果是否满足标准要求。对于15%氯虫苯·虱螨脲悬浮剂产品，氯虫苯甲酰胺和虱螨脲分析方法精密度要求变异系数分别<1.89%和2.10%(计算公式：2(1-0.5logC)×0.67，对于氯虫苯甲酰胺C=0.10，对于虱螨脲C=0.05)，线性相关系数均大于0.99，添加回收率要求在97%～103%之间才合乎要求。与本文上述3.3、3.4、3.5各项计算结果值相比较可知，该方法线性相关系数、精密度和准确度数值均满足NY/T 2887-2016标准要求。待测组分峰纯度指数均大于999.000，满足方法特异性要求。

4 结论

试验结果表明，本方法的准确度、精密度较高，线性关系和特异性良好，具有简便、快速、准确，分离效果、稳定好等特点，是一种比较实用的方法。