24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂分析方法研究

王丹斌，曹俊丽，余德勉，王陈杰

(上海悦联化工有限公司，上海 201416)

霜脲氰[1]是一种高效、低毒杀菌剂，其作用机理与特点主要对真菌的类脂化合物的生物合成和细胞膜机能起作用，抑制孢子萌发、牙管伸长、附着胞和菌丝的形成。是触杀和预防性杀菌剂，对霜霉目真菌如疫霜属、霜霉属、单轴霜属有效。霜脲氰与其他保护性杀菌剂混用广泛，适用于黄瓜、葡萄、番茄、荔枝、巨菜等十字花科蔬菜及烟草等。

氰霜唑[1]是一种新型低毒杀菌剂，具有很好的保护活性和一定的内吸治疗活性，持效期长，耐雨水冲刷，使用安全、方便。该药属线粒体呼吸抑制剂，其杀菌机制是通过抑制病菌代谢过程中细胞色素bcl中的Qi，而导致病菌死亡，不同于甲氧基丙烯酸酯类药剂(是细胞色素bcl中QO抑制剂)。对卵菌的所有生长阶段均有作用，对甲霜灵产生抗性或敏感的病菌均有活性。

将霜脲氰和氰霜唑以适当比例混配成制剂，具有混配比例合理，防治效果好，持效期延长，抗性风险小，用药成本低的优点.还可以与其它具有杀虫或杀菌性能的化合物特别是保护性杀菌剂混合使用，也可以与杀线虫剂，防护剂，生长调节剂，植物营养素或土壤调节剂混合物使用。

有关霜脲氰的分析方法[2-4]和氰霜唑的分析方法[5-7]已有相关的行业标准及相关报导，但两者混配悬浮剂的分析方法还未见报道，本文采用反相高效液相色谱法，对24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂(16%+8%)中有效成分霜脲氰和氰霜唑同柱分析和定量，经过实验验证，此方法操作快速、简便，精密度和准确度均能满足定量分析要求，能适用于产品质量控制和相关分析的研究。

1 材料仪器

1.1 样品和试剂 乙腈：色谱纯；水：二次重蒸蒸馏水；霜脲氰标样：已知霜脲氰质量分数≥98.0%；氰霜唑标样：已知氰霜唑质量分数≥98.0%，流动相：(乙腈∶水)=(60∶40)，经0.45 μm孔径的滤膜，并在超声波浴槽中脱气10 min。

1.2 仪器 高效液相色谱仪：具紫外可变波长检测器；色谱柱：Φ4.6 mm×150 mm不锈钢柱，内装Kromasil C18/5 μm为填充料的不锈钢柱。

1.3 高效液相色谱操作条件 流量：1.0 mL/min，柱温：室温(温差变化≤2℃)，检测波长215 nm，进样体积：20 μL，保留时间：氰霜唑约2.1 min，霜脲氰约9.0 min。

上述操作条件是典型的，可根据仪器的特点对操作参数做适当调整，以期获得最佳效果，典型的霜脲氰(氰霜唑)高效液相色谱图(图1)。

图1 24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂高效液相色谱图

2 试验方法

2.1 标准溶液配制 称取霜脲氰标样0.1 g和氰霜唑标样0.05 g(精确到0.0 001 g)，置于50 mL容量瓶中，加入适量乙腈超声振荡5 min使样品溶解，恢复至室温后用乙腈定容，摇匀；再用移液管准确吸取5 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，摇匀，备用。

2.2 试样溶液配制 称取0.625 g(精确到0.000 1 g)样品，置于50 mL容量瓶中，加入适量乙腈超声振荡5 min使样品溶解，恢复至室温后用乙腈定容，摇匀；再用移液管准确吸取5 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，滤液备用。

2.3 试样的测定 在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性，待相邻2针的响应值变化<1.5%后，按照标样溶液，试样溶液，试样溶液，标样溶液的顺序进行测定。

2.4 试样中有效成分质量分数的计算 S将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中的峰面积分别进行平均，试样中霜脲氰(氰霜唑)的质量分数X(%)分别按式(1)计算：

(1)

式中：

A1—标样溶液中霜脲氰(氰霜唑)峰面积的平均值；

A2—试样溶液中霜脲氰(氰霜唑)峰面积的平均值；

m1—霜脲氰(氰霜唑)标样的质量，g；

m2—试样的质量，g；

P—标样中霜脲氰(氰霜唑)的质量分数，%。

3 结果与讨论

3.1 溶剂的选择 根据两种待测物质的溶解度性质，选择乙腈作为溶剂。

3.2 流动相和检测波长选择 通过二极管阵列检测器对霜脲氰标样和氰霜唑标样进行200～800 nm范围内的吸收光谱扫描(图2～3)，由光谱信息(图2～3)并结合分析中助剂杂质干扰因素(图4)，选定检测波长为215 nm。在乙腈、水中调节比例，将霜脲氰和氰霜唑进行有效分离，同时避免助剂和杂质干扰，最后确定为乙腈∶水=60∶40作为流动相，在此条件下对24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂中霜脲氰、氰霜唑峰纯度扫描，24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂中霜脲氰、氰霜唑的峰纯度均>99.9%，24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂中霜脲氰、氰霜唑有效成分出峰位置无明显物质干扰，符合定量分析要求。

图2 24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂中霜脲氰HPLC-DAD特异性扫描图

图4 24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂制剂空白图

3.3 分析方法的线性相关试验 准确配制一系列不同浓度的霜脲氰和氰霜唑标样溶液，然后分别按本文中2.3测定步骤进行分析检测，分别以霜脲氰和氰霜唑的质量浓度为横坐标，霜脲氰和氰霜唑的峰面积为纵坐标，计算一元线性回归方程。线性相关性测定试验数据(表1)。

表1 分析方法的线性线性实验结果

霜脲氰一元线性回归方程：y=20.894 81x+0.038 12，相关系数：R=0.999 975。

氰霜唑一元线性回归方程：y=42.756 9x-0.048 7，相关系数：R=0.999 75。

3.4 分析方法的精密度相关试 任取一批24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂，按本文中试验方法测定步骤连续测定霜脲氰、氰霜唑质量分数10次，分别计算其平均值、标准偏差、变异系数。精密度测定试验数据(表2)。

表2 分析方法的精密度实验结果

从霜脲氰、氰霜唑精密度测定试验结果中可以看出，霜脲氰的标准偏差为0.069%，变异系数为0.42%，Horwitz方程计算值为1.765，氰霜唑的相对标准偏差为0.036%，变异系数为0.44%，Horwitz方程计算值为1.959。

3.5 分析方法的准确度相关试验 选取已知含量的24%霜脲氰.氰霜唑悬浮剂样品，准确称取5份，并分别加入定量的霜脲氰、氰霜唑标样，然后按2.3测定步骤测定霜脲氰、氰霜唑标样的加入量，同理论值进行比较，计算回收率。准确度测定试验数据(表3)。

按照本标准规定的方法进行检测试验，霜脲氰回收率在99.07%～100.95%之间，平均回收率为99.90%，氰霜唑回收率在98.94%～100.91%之间，平均回收率为100.17%。

4 结论

实验结果表明，本文建立高效液相色谱分析方法能对24%霜脲氰·氰霜唑悬浮剂中有效成分进行分离测定，且具有良好的线性、精密度和准确度，操作简便，符合农药产品的质量分析要求，适用于产品的质量检测和控制，可以作为霜脲氰和氰霜唑混配制剂的分析方法。