HBV DNA定量与血清学标志物及CEA、HA联合检测HBV感染的临床价值

郑金萍 高勇 李团团

现阶段，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）患者在世界总人口中约为2.4 亿［1］，该病毒存在人体内会反复伤害肝细胞，进而演变为慢性乙型病毒性肝炎，若未及时治疗，会导致患者肝硬化的发生，严重者会导致患者死亡［1-2］。因此，检测和管理HBV 感染对临床患者治疗具有积极的价值。HBV 血清学标志物检测和乙肝病毒核糖核酸定量检查（Quantitative detection of HBV，HBV DNA）是目前普遍接受和公认的诊断与判断HBV 感染程度及传染性的两种主要方法［3］。血清透明质酸酶（hyaluronidase，HA）是由间质细胞合成的人体结缔组织基质，有研究表明其可以反映肝细胞是否存在炎症，炎症程度越深，血清HA 水平也会随之升高。而血清癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）作为一种富含多糖的蛋白复合物，可通过激发身体免疫反应，反映肝脏损伤程度［4-5］。为进一步提高乙肝病毒感染检测的准确性，本研究对HBV DNA定量与血清学标志物及CEA、HA联合检测HBV感染的临床价值进行了分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 基础资料

选取2019年1月至2021年11月阜南县人民医院收治的92 例慢性乙型病毒性肝炎患者，男性68 例，女性24 例；最小年龄21 岁，最大年龄68 岁，平均（45.38±11.96）岁。本研究经阜南县人民医院伦理委员会批准通过，患者或家属已签署知情同意书。纳入标准：患者均为慢性乙型病毒性肝炎［6］；年龄18 岁以上；患者近期均未接受抗病毒治疗；临床病历资料完整者。排除标准：合并严重心、肾、脑等脏器功能损害者；妊娠期或哺乳期妇女；存在神经系统疾病或精神障碍者；无嗜肝病毒感染者；伴有恶性肿瘤疾病者；临床依从性差者。

1.2 方法

所有研究对象入院之后，由护理人员在真空采血管中采集空腹肘静脉血5 mL，采用安信AXDD5M 离心机（离心半径10 cm）3 500 r/min 离心10 min 后分离血清，保存待检，保存温度控制在-70℃左右。原装配套厂家试剂盒及A2000 全自动化学发光仪进行检验郑州安图生物工程股份有限公司)检测患者的乙肝五项，包括乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、乙肝表面抗体（hepatitis B surface antibody，抗-HBs）、乙肝e抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）、乙肝e 抗体（HBeAb，抗-HBe）、乙肝病毒的核心抗体（Core antibody of hepatitis B virus，抗-HBc）。采用化学发光法测定血清CEA、HA 水平，CEA 测定所用仪器为罗氏cobas ee602 分析仪，试剂是罗氏公司专门提供检测试剂盒，HA 所用试剂盒购自郑州安图生物工程股份有限公司。HBV DNA定量检测采用荧光定量PCR 技术（西安天隆TL988-IV四通道荧光定量PCR 仪及配套试剂）进行检测。

1.3 观察指标

1.3.1 HBV 分类评判标准

根据不同血清检测结果将患者分为大三阳、小三阳、其他类型三组，其中大三阳组血清检测结果为（HBsAg、HBeAg、抗HBc 阳性），小三阳组血清检测结果为（HBsAg、抗HBe、抗HBc 阳性），其他类型血清检测结果为（抗-HBs、抗-HBc阳性，抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc 阳性，抗- HBc 阳性，抗-HBe、抗-HBc 阳性，抗-HBs 阳性，HBsAg及全阴性等）［6-7］。

1.3.2 HBV DNA定量评价标准

根据HBV DNA定量检测结果分为HBV DNA阳性和HBV DNA 阴性两组，HBV DNA定量评价标准：HBV DNA＜5.0×102copies/mL 为阴性，水平≥5.0×102copies/mL 为阳性［7］。HBV DNA定量结果以lg copies/mL 为单位。

1.3.3 血清学标志物评价标准

HBsAg＜0.05 IU/mL 为阴性，≥0.05 IU/mL 为阳性［8］；抗-HBs 浓度＜10.00 mIU/mL 为阴性，抗-HBs 浓度≥10.00 mIU/mL 为阳性［8-9］；HBeAg＜0.30 PEI U/mL 为阴性，≥0.30 PEI U/mL 为阳性［9］；抗-HBc＜0.70 PEI U/mL 为阴性，≥0.70 PEI U/mL 为阳性［5］；抗HBe＜0.40 PEI U/mL 为阴性，≥0.40 PEI U/mL 为阳性［5］。

1.3.4 血清CEA、HA 的变化趋势

记录并分析所有患者的血清CEA、HA 的变化趋势。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 25.0 统计软件。 正态计量资料以（）描述，行t检验，非正态以四分位数表示，行Mann-WhitneyU 检验；计数资料以n（%）表示，行采用χ2检验。采取Spearman 相关检验分析HBV DNA 与血清HBsAg、CEA、HA 之间是否存在相关，以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料

92 例患者根据血清检测结果分为大三阳组33例，男25 例，女8 例，年龄平均（41.55±11.61）岁；小三阳组31 例，男23 例，女8 例，年龄平均（47.29±11.81）岁；其他类型组28 例，男20 例，女8 例，年龄平均（47.79±11.37）岁。根据HBV DNA定量结果分为阴性组（n=38）和阳性组（n=54），阴性组男25 例，女13 例；年龄平均（48.42±12.14）岁；阳性组男43 例，女11 例；年龄平均（43.24±11.35）岁。以上各分组基础资料比较（P>0.05），具有可比性。

2.2 所有患者HBV DNA、CEA、HA 的检测结果

92 例患者中，HBV DNA 阳性患者54 例（58.70%），阴性38 例（41.30%）；92 例患者CEA 水平4.20（3.20，5.30）ng/mL，其中最大值6.6 ng/mL，最小值1.9 ng/mL。所有患者HA 水平分别为112.00（98.00，126.00）ng/mL，其中最大值143.00 ng/mL，最小值70.00 ng/mL。

2.3 大三阳、小三阳、其他类型组HBV DNA定量检测结果对比

大三阳组患者HBV DNA 阳性31/33 例（93.94%），小三阳组患者HBV DNA 阳性19/31 例（61.29%），其他类型组患者HBV DNA 阳性4/28例（14.29%）；大三阳组HBV DNA定量检测结果为5.90（4.67，6.80）lg copies/mL，小三阳组为4.90（3.10，6.10）lg copies/mL，其他类型组为2.10（1.96，5.40）lg copies/mL。3 组HBV DNA定量检测水平比较（P=0.010）。

2.4 HBV DNA 结果与患者CEA、HA 对比

HBV DNA 阳性组患者CEA、HA 水平显著高于HBV DNA 阴性组（P＜0.05）。见表1。

表1 HBV DNA 结果与患者CEA、HA 水平的对比［M（Q1，Q3），ng/mL］Table 1 Comparison of HBV DNA results with CEA and HA levels of patients［M（Q1，Q3），ng/mL］

2.5 HBsAg、HBeAg 阳性检出率与HBV DNA 结果对比情况

HBV DNA 阳性组中，HBsAg 阳性检出率显著高于HBeAg（P=0.000）。见表2。

表2 HBsAg、HBeAg 阳性检出率与HBV DNA 结果对比［n（%）］Table 2 Comparison of HBsAg，HBeAg positive detection rate and HBV DNA results［n（%）］

2.6 HBV DNA定量与血清学标志物及血清CEA、HA 的相关性分析

Spearman 相关结果显示，患者的HBV DNA定量与血清学标志物及血清CEA、HA 指标成正相关关系。见表3。

表3 HBV DNA定量与血清学标志物及血清CEA、HA 的相关性分析Table 3 Correlation analysis of HBV DNA quantity with serological markers and serum CEA and HA

2.7 HBV DNA定量值与血清学标志物及血清CEA、HA检测乙肝病毒感染的ROC 分析

ROC 分析显示：HBV DNA定量与血清学标志物及血清CEA、HA 联合检测乙肝病毒感染的AUC=0.985（P<0.05），诊断敏感度为97.76%，高于HBV DNA定量、血清学标志物、及血清CEA、HA 单独检测。见表4。

表4 HBV DNA定量值与血清学标志物及血清CEA、HA检测乙肝病毒感染的ROC 分析Table 4 ROC analysis of HBV DNA quantitative value，serological markers and serum CEA，HA in detection of HBV infection

3 讨论

HBV 感染后，患者体内出现炎症，若未能及时防范治疗，会增大患者肝衰竭、肝硬化、肝癌的发生风险，甚至导致患者死亡，HBV 感染是目前对卫生健康影响最大的病毒之一［8-9］。近年来，随着技术的进步和医学的发展，人们对慢性乙型病毒性肝炎的认识越来越清晰［10］。目前临床上检测HBV 感染金标准方法有血清标志物检测和HBV-DNA定量检测，其中HBV-DNA定量检测可以反映患者体内HBV 复制状态，已有研究证明这两种检测手段结合能优缺点互补［11］。有研究表明，血清HA、CEA 水平在一定程度上反映了乙肝患者肝功能状态，可作为临床上判定疾病严重程度的参考，对疾病预测和治疗具有一定的临床价值。

HBeAg 作为乙型肝炎病毒感染的标志物之一，是对病毒复制活跃程度以及传染性强弱的反映，HBeAg 持续阳性表明存在乙肝病毒的活动性复制，说明传染性较大。本研究结果显示，大三阳组的HBV-DNA 阳性率高于小三阳组和其他类型，说明HBeAg 阳性与HBV 持续复制存在直接联系，提示患者目前传染性较强，该结论与邹卓林等学者研究一致［11-12］。CEA 为一种糖蛋白，来源于内胚层，当肝脏受损、病情加重的时候肠道分泌内毒素，使内胚层分泌CEA。HA 作为蛋白多糖的一部分存在于肝细胞外间质，当肝脏受到损害时其水平会发生相应的变化，HA 可以作为肝细胞急慢性损伤的标志。CEA、HA 两者可有效反映出慢性乙型病毒性肝炎的病情严重程度。本文研究结果提示慢性乙肝病毒感染患者仍存在肝损伤和肝硬化风险，且发生机率较大。原因在于慢性乙肝病毒感染患者体内病毒仍具有一定的活动性，而部分大三阳患者病毒复制较快，会造成一定程度上的肝脏损伤，该结论与吴婷、罗艳等研究结论相似［13-14］。

研究发现，在HBV-DNA 阳性患者中HBsAg阳性检出率显著高于HBeAg，该结论与赵棉等［7］的研究结果一致。相关性分析结果显示，HBVDNA定量与HBsAg、HA、CEA 存在正相关关系，表明随着HBsAg 定量增高，患者体内HBV 复制逐渐活跃，患者体内病毒数量不断增多，这与卢建华等［15］的研究结果相似。ROC 分析结果提示HBV DNA定量、血清学标志物、及血清CEA、HA 对检测HBV 感染均有一定的临床意义，且四者联合检测能够起到较好的互补作用，准确率更高，有效弥补了单项检测的不足。

综上所述，HBV DNA定量、血清学标志物、及血清CEA、HA 均可反映患者的HBV 感染情况，三者联合检测在HBV 感染诊断中可起到良好的互补，能得出更精确的结果，对于患者病情程度的预估具有较高的临床价值。