猪链球菌病研究进展

魏述亮，邱家章，张恒彬

（山东裕城生物技术有限公司，山东 济南 251403）

猪链球菌病（Swine Streptococosis），作为猪养殖行业最为常见的病症之一，临床主要表现为：仔猪脑膜炎、猪败血症、猪心肌内膜炎、猪肺炎等等[1]，对养殖户带来严重经济损失。近年来研究发现，该病毒力因子复杂、发病机理众多、防治难度大，引起了越来越多科研工作者的重视。

1 病原学

猪链球菌作为革兰氏阳性球菌的一种，无芽孢、鞭毛，呈短链状，有荚膜，通常为圆形或椭圆形，早期培养出现荚膜，有菌毛，在含血液、血清或葡萄糖的培养基中生长良好。根据血平板类型不同，培养时产生的溶血环略有差异，猪链球菌在多数血平板呈 α溶血，在马等动物血平板呈 β溶血[2]。它能够发酵棉子糖、蔗糖、山梨醇、海藻糖和乳糖；不发酵甘露糖和阿拉伯糖。生存能力表现较强，在动物尸体内能存活 6周左右（温度 4℃以内），脱离动物机体在一般水体中能存活 2周左右。常用杀菌剂可将其灭杀，如含氯、乙醇、季铵盐类等。

猪链球菌血清表现类型复杂，种类众多，根据荚膜多糖抗原进行分类，目前已发现的血清型有 35种之多，但不是所有的都具有致病性。截至目前，能引起动物感染较强病症的主要为 1、2、7和9型，其中能导致人类致病或致死的主要为血清2型，可采用专业诊断试剂进行鉴别[3]。

2 流行病学

从流行病学角度分析，猪链球菌病的发病无显著季节性特征，一般在天气炎热时发病率略高于其他季节，该病发病通常出现大面积流行性，致死率高，多呈现地域性流行。感染对象不局限于猪，马、牛、羊、犬、猫等也易被病菌感染，临床表现与猪相似。在科学研究中，研究人员通常用小鼠作为感染动物研究对象[4]。

猪链球菌病常见于 1~3个月龄的仔猪，感染后病症严重。其中在正常的猪群中，链球菌 2型几乎存在于所有的猪体内，扁桃体为定值的靶向器官。以致病猪和病死猪的尸体为猪链球菌病的主要传染源，除此之外，已痊愈的带病毒猪以及带病毒尚无症状的健康猪也是其传染源。通过研究发现，如母猪生殖系统中带有病毒，那其所生产的仔猪也有很大几率发生感染，且仔猪在哺乳过程中也易感染病毒。

链球菌病毒感染动物机体的方式多种多样，主要感染途径有消化道、呼吸道、皮肤接触、伤口感染等等，环境传播已水体传播和污染环境空气传播为主。在人兽之间的传播途径与之类似，人类感染人群主要集中在养殖场工作人员及猪肉屠宰加工工人，目前为止尚未发现人与人之间的传播。

3 临床症状

3.1 败血症型

一般发生在流行初期，突然发病，体温升至41～42 ℃，在数小时至 1 d内死亡。急性病例，常见精神沉郁，体温 41 ℃ 左右，呈稽留热，减食或不食，心跳加快，眼结膜潮红，流泪，有浆液性鼻液，呼吸浅而快。部分病猪在发病的后期，耳尖、四肢下端、腹下可见有紫红色或出血性红斑，有跛行病程2～4 d。

3.2 脑膜炎型

多发于哺乳仔猪和保育仔猪，与水肿病的症状相似。发病初期患猪体温升高，食欲废绝，便秘，有浆液性或粘液性鼻液，继而出现神经症状，转圈，空嚼，磨牙，直至后躯麻痹，共济失调，侧卧于地，四肢作游泳状，颈部强直，角弓反张，甚至昏迷死亡。部分猪出现多发性关节炎、关节肿大，病程5～10 d。

3.3 关节炎型

患猪体温升高，被毛粗乱，呈现关节炎病状，表现一肢或肢关节肿胀，高度跛行，甚至不能起立。病程 2～3周。小部分哺乳仔猪也可发生，常常因抢不上吃奶而逐渐消瘦。

3.4 化脓性淋巴结炎型

病猪淋巴肿胀，坚硬，有热痛感，采食、咀嚼、吞咽和呼吸较为困难，多见于颌下淋巴结化脓性炎症，咽喉、耳下、颈部等淋巴结也可发生。一般不引起死亡，病程为 3～5周。病猪经治疗后肿胀部分中央变软，皮肤坏死，破溃流脓，并逐渐痊愈。

4 剖检病变

病猪死后血液凝固不良呈污秽色。心冠脂肪水肿，心内外膜有出血点或出血斑；心包、胸腔积液，呈黄色，有时积液中有纤维蛋白；鼻黏膜、喉头、气管、黏膜充血或出血，有泡沫状物；肺充血、水肿；肝瘀血肿大，呈暗紫色，有时呈黄色；脾瘀血肿大，呈暗黄色，病程稍长的多为黄色；膀胱皱缩，少尿或无尿，全身淋巴结出血肿大或水肿，有的淋巴结周围结缔组织水肿或呈胶冻样；胃和小肠黏膜有不同程度的出血，肠系膜水肿；神经症状严重的脑膜充血、出血，严重的甚至脑膜出血或脑膜下积液。

5 致病机理

自建国后有首次报道记录以来，关于猪链球菌病大面积暴发案例越来越多，其中人感染情况频发[5]，造成严重经济损失及社会影响。1999年江苏一猪养殖场大面积疫情暴发，引起万余头猪死亡，养殖人员25人感染，其中14人死亡，死亡率高达 56 %。2005四川省大面积猪链球菌病暴发，涉及 9个地市，数万头猪死亡，206感染，其中死亡人数高达 38人。以上致人传染死亡主要为 2型猪链球菌，因此近年来越来越多的研究人员聚焦于此，开展毒力因子、发病机理及防治免疫研究，并取得了一定的科研成果。

研究证实，该菌经呼吸道进入机体，起初定值于机体扁桃体及呼吸道黏膜内，在突破机体局部屏障后入侵淋巴系统和血液系统，通过血液循环散播至机体各组织，产生毒力因子，进而引发各种临床症状，主要表现为急性脑膜炎、肺组织病变、关节炎症等。截止目前，该细菌在动物机体内的具体传播机制尚未有明确研究报道，对于该方面的研究主要聚焦在细菌导致脑膜炎的机制方向上。

6 毒力因子

研究发现，猪链球菌的毒力因子主要包括 7种，具体如下：

6.1 荚膜多糖（CPS）

为细菌细胞壁的主要组成部分，由多种同多糖、异多糖组成，分子量达18万ku上下，在众多毒力因子的起决定作用，其具体成分及结构受细菌血清型影响，保护细菌免受机体免疫系统的吞噬。

6.2 黏附素（Adhesin）

黏附素存在于细菌表面，保证细菌能够黏附在受感染机体内，保证细菌在机体内定植，为感染提供前提条件。在猪链球菌中，黏附素[7]主要分为两种，一种为 18 ku，存在于大多数血清型菌体中；另一种为 39 ku，主要存在于 2型猪链球菌中，其粘附性对机体具有较强的致病力。

6.3 溶血素（SLY）

为细菌在生长过程中产生的一种血液毒素，是蛋白毒素的一种，胆固醇能够不可逆的抑制它的溶血性，与介导细菌的入侵和裂解细胞密切相关[8]。其作为一种成孔毒素，在病毒定值于呼吸系统黏膜后，破坏呼吸道上皮组织，使大量繁殖的细菌进入呼吸道毛细血管系统，最终扩散近循环系统。

6.4 溶菌酶释放蛋白（MRP）及细胞外蛋白因子（EF）

溶菌酶释放蛋白及胞外蛋白因子均为 2型猪链球菌重要毒力因子之一。溶菌酶释放蛋白是细菌的胞壁蛋白，分子质量为 136 ku，具有黏附上皮细胞和介导细菌侵袭作用，还能诱导上皮细胞和巨细胞凋亡[9]，促进感染过程。细胞外蛋白因子是一种分泌性蛋白，分子质量为 110 ku，目前作用不详。根据MRP和EF的有无可将2型猪链球菌分为 3种表型：MRP+EF+，致病力最强；MRP+EF-，致病力较弱；MRP-EF-，无致病力，MRP和EF也是判定菌株致病力的标准。

6.5 纤维结合蛋白（FBPS）

王花茹等[10]对 2型猪链球菌的纤维蛋白结合蛋白开展了具体研究，其通过化学手段分离纯化了猪链球菌的纤维结合蛋白，该蛋白能保护细菌免受猪免疫系统的吞噬，同时还具备黏附素的功能，在保证细菌定值机体的同时保护菌体。同时其还发现该蛋白能帮助细菌黏合在人体纤维蛋白中，是使人类致病的重要因素之一。

6.6 谷氨酸脱氢酶（GDH）

其为最晚发现的毒力因子，经研究人员DNA分析，该脱氢酶中含有一份开放性的阅读框，其能对四百多个氨基酸残基进行编码。该酶可以和感染猪链球菌猪血清发生反应，目前作为检测猪链球菌的抗原物质之一。

7 防治措施

7.1 药物治疗

先前，针对猪链球菌病主要以抗生素药物治疗为主，针对具体细菌类型，选择合适的抗生素药物混入饲料内，在药物使用过程中应防止细菌产生耐药性，用药最好经过药敏试验筛选敏感药物，并经常变换使用药物。近年来，随着中兽药的快速发展，中药在治疗猪链球菌病中的优势逐渐凸显出来，其中地丁、蒲公英、金银花等药物被广泛用于该病治疗。

7.2 免疫预防

作为最行之有效的预防手段之一，免疫预防能够有效控制猪链球菌病的大面积暴发。相对其他种类细菌，链球菌的血清型多种多样，存在地域性差别，不同血清型抗原的交叉免疫效果较差。对此，研制疫苗的关键就在于选择具有代表性的血清型作为疫苗株。Okwumabua等[11]研究表明，2型猪链球菌中 38 ku蛋白具有显著代表性，其为目前诊断应用最广的抗原。

Wisselink等[12]研究发现，MRP、EF也可以作为研制链球菌疫苗的代表标志物，并开发了WO作为佐剂的 MRP+EF+亚单位疫苗，已能有效预防2型猪链球菌。

李明等[13]利用 2型猪链球菌株 MRP和EPF的 NDA序列表达合成 74 ku蛋白作为免疫原，具有较好的保护效果。

范红结等[14]通过马链球菌兽疫亚种类M蛋白和猪链球菌 MRP融合表达，发现表达产物具有类M蛋白和MRP的双重抗原性，融合蛋白对仔猪的免疫保护率为60%。

7.3 卫生管理措施

污染环境中细菌传播作为主要传染源之一，因而环境卫生对于防治猪链球菌病有着重要作用，其中母猪作为重点关注对象，其饲养管理显得额外重要。在现在猪养殖场现代化、规模化提前下，猪舍的环境管理逐渐趋于智能化，猪舍卫生环境管理主要为：（1）外来猪需确保无疫病。（2）注重环境卫生及通风，猪舍布局科学合理，养殖密度适中。（3）定期消毒能够有效防止猪链球菌病的发生，也能有效杀灭其他细菌。