薄层色谱技术在中药检验中应用的研究进展＊

张晓丹，刘宏，邹洪平，黄昊，邓淑晶

（广州白云山光华制药股份有限公司，广东 广州 510285）

0 引言

薄层色谱法自《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）1985年版后的历版药典均有收载。《中国药典》2020年版一部收载品种2 711个，其中超过50%的品种应用了薄层色谱鉴别方法，薄层色谱分析是各级药品检验机构、药品生产经营部门质检人员检验中药的强制性检验项目［1］。薄层色谱技术是一种经典的中药分析技术，其受测试样品种类限制很小，适用范围广［2-3］。多年来，薄层色谱技术在中药上的应用开发研究趋于多元化，尤其在中药成分的鉴别和定量分析方面，涌现出许多高质量的学术研究成果［4-5］。目前，对薄层色谱技术在中药检验应用方面的研究主要集中在以下3个方面：一是对现有的中药薄层色谱鉴别方法的优化，如改进样品制备方法、优化展开剂和显色剂等；二是建立新的中药成分薄层色谱鉴别方法，例如建立药典中未曾规定的中药薄层色谱系统；三是联合其他技术手段进行更全面的中药检验分析。本文介绍、分析薄层色谱技术在中药检验方面的应用研究情况，尤其是中药定性鉴别和定量分析方面的研究进展，以期为相关学者提供研究方向和思路。

1 薄层色谱在中药快速鉴别中的应用

随着色谱技术的发展及检验质量的提高，目前《中国药典》中的绝大部分中药是利用薄层色谱法进行检验的，利用薄层色谱法可对一些强挥发性、无紫外线吸收的药物组分进行定性及定量检测，还可以对中药进行分离和分析鉴定。薄层色谱技术可用于快速鉴别中药材的产地及真伪，以及鉴别药材中的非法添加。

不同产地的中药材所含的化学成分存在微小差别，可用薄层色谱技术方便地鉴别出不同产地的中药。巢颖欣等［6］应用薄层色谱技术反映广陈皮药材的鉴别信息，通过分析广陈皮特有的2-甲氨基-苯甲酸甲酯斑点作为快速鉴别广陈皮与其他产地陈皮的有效手段。

薄层色谱除了用于不同产地中药的鉴别，也可用于伪中药的鉴别。孔娟等［7］发现，在相同的色谱条件下，不同产地何首乌及其伪品的薄层色谱图均有明显差异，可凭此快速、高效地鉴别何首乌的真伪。

在中药中非法添加色素一直是影响中药发展的阻碍之一［8］，薄层色谱技术在中药非法色素鉴别上也有很好的应用。李启艳等［9］用薄层色谱法快速筛查中药中的29种非法添加色素，发现各色素分离效果较好，可采用薄层色谱法解决中药中多色素染色的问题。

2 优化现有中药材薄层色谱方法

随着薄层色谱法在中药鉴别中的广泛应用，一些原有的鉴别体系逐渐显现出不足，如供试品制备过程复杂、展开剂与显色剂对生态环境不友好、显色特征性不强等。目前，中药研究者的很多工作是围绕优化现有中药薄层色谱鉴别体系中的各项条件展开。

2.1 单方药材鉴别条件优化

赵晓梅等［10］深入研究泽泻药材的物质基础，构建多指标定性、定量评价系统，并选择合适的指标，完善泽泻药材及饮片的质量标准，最终给《中国药典》2020年版提供了泽泻的来源、鉴别（薄层）、浸出物（盐泽泻）、含量测定等项目的修订建议。荆晓烨等［11］研究发现，现行版的《中国药典》中降香标准的薄层色谱鉴别仍使用三氯甲烷、甲苯、甲醇等有毒有害试剂，因此从绿色环保、生态友好的角度出发，研究运用天然低共熔溶剂提取样品，利用改进的无毒或低毒的薄层展开系统对中药降香进行薄层色谱鉴别，为降香绿色质量标准的制定提供了参考。

2.2 复方制剂多组分鉴别

一些中药复方制剂通常含有多味药材且各药材组成比例悬殊，成分比单味药复杂，一般采用多个薄层色谱鉴别项控制其质量。复方制剂的薄层定性鉴别一直是一件费时、费力的工作。冯文明等［12］建立了“一板多药”薄层色谱鉴别方法，可同时对小柴胡颗粒中的柴胡、黄芩、甘草3味药材进行鉴别，操作简单、快速，专属性强，完善了小柴胡颗粒的质量标准。

3 新建中药材薄层色谱方法

中药品类繁多，随着人们对中药研究的不断深入，原有中药材中被发现的新中药成分也会越来越多，对应的鉴别方法也需要完善。对于一些现行药典中还没有质量控制体系的中药材成分，也需要逐渐建立起科学可控的质量体系。

3.1 建立单味中药材鉴别新方法

罗健菱等［13］发现苦皮藤药材尚未有完善可行的质量控制体系，并且2020版《中国药典》中也未收载其质量标准，故系统地建立苦皮藤薄层色谱鉴别项的各个条件，并确定最佳的薄层色谱条件。张颖等［14］建立薄层色谱法鉴别地黄及其炮制品，根据糖类成分在生地黄与熟地黄中的差异，对地黄不同的炮制品进行薄层鉴别方法研究，建立可区别生地黄、熟地黄的薄层色谱鉴别方法，为地黄饮片的质量评价提供参考。

3.2 建立复方中药制剂鉴别新方法

复方中药由多味中药按照一定的比例混合而成，原则上复方中药中的各味药材均需建立各自的质量控制标准，一般每一味中药都会有其特征鉴别项。研究者对中药进行系统研究后发现，原有复方中药鉴别项的不足，建立一套新的薄层色谱鉴别项，完善了复方药剂的质量控制标准。魏艳芸等［15］发现桂附地黄丸（浓缩丸）的质量标准相对滞后，鉴别项下仅对粉末入药的牡丹皮、附子（制）、肉桂、山药进行显微鉴别，而浸膏入药的主药熟地黄无任何鉴别方法，因此对熟地黄进行研究，建立一套熟地黄的薄层色谱鉴别方法，可为桂附地黄丸（浓缩丸）的质量评价提供参考。

4 薄层色谱联用技术应用

在中药检验中只应用薄层色谱法存在一定的局限性（灵敏度不高），薄层色谱只适合快速进行一些简单的定性分析。为更全面地检验分析中药中的复杂化学成分，各类高效的现代化学分析检测技术被引入中药分析中，如薄层色谱与质谱、红外、高效液相、拉曼、核磁共振等一种或多种检测分析技术联用。

4.1 薄层色谱与质谱联用

质谱是一种基于测量离子质荷比（质量—电荷比）的分析方法，具备高特异性和高灵敏度的特点。薄层色谱与质谱的联用形式主要可分为3类：一是接口仪器的间接联用；二是质谱对薄层板的原位检测；三是质谱对薄层分离过程的实时监测［16］。

郭依俐等［17］结合薄层板分离中药成分快速、高效的特性和质谱分析成分的特异性，将薄层色谱和串联质谱联用，将粗叶悬钩子的薄层板上的各成分斑点提取浓缩后逐个进入质谱进行分析，可便捷地得到斑点中化合物一级质谱和二级质谱的信息。

薄层色谱和质谱联用技术作为一种新型分析技术，常用来定性或定量分析生物活性样品或提取物中的未知化合物。张强等［18］探索质谱在中药分析中的应用效果，一是实现了肉桂和川芎薄层色谱分析后层析板上化合物的原位快速鉴定，成功鉴定了川芎中的香豆素和桂皮醛，以及藁本内酯、蛇床内酯和洋川芎内酯A等成分；二是对肉桂药材中的香豆素进行定量测定，得到香豆素的含量数据。

4.2 薄层色谱与高效液相色谱联用

应用薄层色谱技术可以进行化合物的简单分离，得到相对较纯的组分，但由于分辨率不高，对于一些性质或结构类似的物质还不能完全分离。此时，需要借助更灵敏和精确的分离分析手段，高效液相色谱技术联合薄层色谱技术可应用于此种情况的分析。陈培英等［19］对经过薄层色谱分离后的硅胶板上的几个荧光点应用高效液相色谱进行分离和分析发现，每一个荧光点均又出现了2～3个色谱峰，表明每个荧光点中还包含有结构或性质相似的不同化合物。高效液相色谱除了用于高分辨定性分析有效成分，还有许多研究报道其应用于定量分析中药中的有效成分。

4.3 薄层色谱与拉曼光谱联用

拉曼光谱是一种灵敏性高、特异性好的无损分析方法。薄层色谱与拉曼光谱联用将使薄层色谱的成分分离功能和拉曼光谱获取特征信息的功能合二为一，能精密区分中药中结构类似的化合物，并减少一些微量有效成分的丢失［20］。

顾晓玲［21］应用薄层色谱和拉曼光谱的联用技术分析中草药黄连中的有效成分（主要含有异喹啉类生物碱，如小檗碱、黄连碱、巴马汀和药根碱），发现联用方法可以很好地区分异喹啉类生物碱中的4个目标分析物，尤其是通过拉曼强度比值（I708/I728）可以分析鉴别出一个斑点中的2个结构类似物（小檗碱和黄连碱），并且4个目标物具有很低的表面增强拉曼光谱检测限，表明该方法灵敏度非常高。

5 结语

中药材复杂成分的检验是中药质量控制的关键内容。随着我国中药的发展与壮大，中药质量研究的很多基础工作需要基于中药有效成分的检验展开。薄层色谱检验方法已经成为药典规定的法定中药检验方法，现有中药材成分薄层色谱分析方法各项条件的优化和未知中药薄层色谱方法的开发是一项基础工作。同时，随着中药检验技术和现代化学分析方法的发展，多种检测方法的高效联用技术是未来中药检验和应用研究的重要方向。建立科学且全面的中药检验方法能为我国中药的发展提供保障。