温经汤药材不同炮制方法组方对小鼠体质量及脏器指数的影响*

张秀萍 孙达辰 梁启超 佟 雷 韩 犇 张文宇

温经汤出自《金匮要略·妇人杂病脉证并治》，由吴茱萸、当归、芍药、川芎、人参、桂枝、阿胶(烊化)、牡丹皮(去心)、生姜、甘草、生半夏、麦冬(去心)组成，其功效显著。近年来，为了提高方剂的疗效，有些学者开始研究中药炮制后对药效学的影响，但炮制后对全方的安全性研究非常少，而且中药炮制后其成分之间是否产生毒性也未见报道，因此本研究将从温经汤中药炮制前后进行对比，初步探讨温经汤炮制前后短期的安全效应，以期为后续研究提供实验依据。

1 实验材料

1.1 中药饮片吴茱萸、当归、阿胶、甘草、炙甘草、蜜炙桂枝、川芎、白芍药、生半夏、桂枝、麦门冬(去心)、蒲黄炒阿胶、人参、牡丹皮(去心)、生姜。购自哈尔滨市三棵树中药材市场；牡丹皮(不去心)网购于大别山特产；酒炙吴茱萸、炒白芍药、姜半夏、酒炙当归、酒炙川芎、煨姜、红参购自御桂圆；麦门冬(不去心)，火神派中药材。

1.2 实验动物雌雄各半ICR小鼠共40只，体质量(18±2)g， 雌雄各半，购自北京维通利华，生产许可证号(SCXK-2016-0011)。

1.3 实验方法

1.3.1 动物分组按文献[1,2]将ICR小鼠按体质量随机分为温经汤原方组(吴茱萸、当归、川芎、白芍药、生半夏、麦门冬(去心)、人参、牡丹皮(去心)、桂枝、阿胶、生姜、甘草)，温经汤全方炮制组(酒炙吴茱萸、酒炙当归、酒炙川芎、红参、蜜炙桂枝、炒白芍药、姜半夏、蒲黄炒阿胶、牡丹皮(不去心)、煨姜、炙甘草、不去心麦冬)，温经汤君药炮制品组(酒炙吴茱萸、当归、川芎、人参、桂蜜炙枝、白芍药、生半夏、阿胶、牡丹皮(去心)、生姜、甘草、麦冬)，温经汤臣药炮制品组(吴茱萸、酒炙当归、酒炙川芎、红参、桂枝、白芍药、生半夏、阿胶、牡丹皮(不去心)、生姜、甘草、麦冬(去心)及空白对照组。

1.3.2 药物制备将温经汤原方、全方炮制品、君药炮制品、臣药炮制品(除阿胶、蒲黄炒阿胶需烊化外)所有饮片分别取3剂剂量，加蒸馏水900 ml，浸泡30 min，煎煮至300 ml，纱布过滤，剩余药渣加水900 ml，继续煎煮至300 ml，连续煎煮3次，将3次药液混合均匀，加热浓缩至药液约500 ml，混合药液用旋转蒸发仪浓缩至180 ml，将阿胶或蒲黄炒阿胶烊化至药液中，用蒸馏水调整至234 ml(浓度为10 g/ml)。放凉后置于4 ℃保存备用。

1.3.3 给药方法及观察指标选取18～22 g ICR小鼠40只，随机分为5组，每组8只，即温经汤君药炮制组、臣药炮制组、空白对照组、全方炮制组及原方组。按照10 g/ml制备各组药液，以0.2 ml/10 g进行灌胃给药，连续给药14 d，空白对照组给予相同体积蒸馏水，每天观察小鼠一般情况，并末次给药第2天禁食不禁水，称取小鼠体质量，摘取小鼠心、肝、脾、肺、肾称重，观察小鼠体质量及脏器指数变化。

2 结果

2.1 温经汤炮制前后对小鼠一般情况影响连续给药14 d，小鼠生长正常，毛色未见变化，行为活动未受影响，饮水、进食及大、小便均未见异常，口、鼻等处未见异常分泌物，均未出现中毒现象。

2.2 温经汤炮制前后对小鼠体质量的影响与空白对照组比较，各温经汤炮制组对小鼠体质量无影响。表明温经汤炮制前后的安全性一致。见表1。

表1 温经汤炮制前后对小鼠体质量的影响

2.3 温经汤炮制前后对小鼠脏器指数的影响与空白对照组比较，各温经汤炮制组对小鼠心、肝、脾、肺及肾脏指数均无影响。表明温经汤炮制前后的安全性一致。见表2。

表2 温经汤炮制前后对小鼠脏器指数的影响 (只，

3 讨论

研究表明，温经汤可以改善持续光照环境下大鼠的卵巢周期紊乱[3]；治疗虚寒型妇科疾病，主要通过改善妇科虚寒证模型大鼠卵巢能量代谢的失调状态，恢复卵巢功能[4]；改善大鼠寒凝血瘀证模型血液流变学指标[5]；抑制子宫收缩，并有较好的镇痛作用[6]；改善子宫内膜异位症大鼠的妊娠功能，治疗子宫内膜异位症及不孕，主要通过改善盆腔粘连、免疫系统功能紊乱、内分泌紊乱等[7,8]。通过降低子宫内膜异位症大鼠在位和异位内膜中血管内皮生长因子及富含半胱氨酸的本性分泌蛋白表达，影响新生血管形成，抑制异位子宫内膜的生长[9]。

而以上研究大多是研究温经汤药味或者药量进行加减以达到相应药效或探讨相应的机制，但关于温经汤炮制后的毒性研究却未见报道，因此本研究通过观察后发现，温经汤炮制前后对小鼠的一般情况无影响，对小鼠的体质量及脏器指数也无影响，最大给药量为200 g/kg生药，相当于 60 kg 成人约154倍的临床推荐使用剂量，说明温经汤中药品炮制后对小鼠体质量及脏器指数无明显影响，可能无明显毒性，常规临床剂量下用药后是安全可靠的，为进一步证明温经汤炮制前后无明显毒性，后续实验将摘取相关组织进行病理切片，也会进行小鼠急性毒性实验及大鼠的长期毒性实验以保证实验数据的有效性。